Розрахунок вмісту компонентів для приготування 1360 мл середовища

Компонент поживного середовища	Концентрація, г/л	Вміст компонента у 1360 мл середовища, г	Композиція	Об’єм композиції, мл
глюкоза	20,0	27,2	І	250
дигідрофосфат калію КН2РО4	9,6	13,15	ІІ	1000
діамонійфосфат (NH4)2HPO4	4,75	6,5
цитрат натрію (Na3C6H5O7)	1,28	1,75
сульфат магнію MgSO4 ×7Н2О	0,18	0,25	ІІІ	110

ДР 2.3.1 Приготування і стерилізація композиції І

На технічних вагах зважують 27,2 г глюкози. Наважку поміщають у колбу об’ємом 1 л, доливають 250 мл дистильованої води. Закривають колбу ватно-марлевою пробкою і стерилізують в автоклаві при температурі 112 °С (тиск 0,05 МПа) упродовж 30 хв. (Кт, Км 2.3.1).

ДР 2.3.2 Приготування і стерилізація композиції ІІ

На технічних вагах зважують 13,15 г дигідрофосфату калію (КН₂РО₄), 6,5 г діамонійфосфату ((NH₄)₂HPO₄) та 1,75 г цитрату натрію (Na₃C₆H₅O₇). Наважки переносять у колбу об’ємом 2000 мл, доливають 1000 мл води питної. Закривають колбу ватно-марлевою пробкою і стерилізують в автоклаві при температурі 131°С (0,15 МПа) упродовж 50 хв. (Кт, Км 2.3.2).

ДР 2.3.3 Приготування і стерилізація композиції ІІІ. На торсійних вагах зважують 0,25 г сульфату магнію (MgSO₄ ×7Н₂О). Наважку поміщають у колбу об’ємом 200 мл, додають 110 мл води питної. Закривають колбу ватно-марлевою пробкою і стерилізують в автоклаві при температурі 131°С (0,15 МПа) упродовж 50 хв. (Кт, Км 2.3.3).

ДР 2.4. Підготовка поживного середовища для вирощуванні посівного матеріалу в інокуляторі об'ємом 20 л . Вміст компонентів для для отримання 13,6 л поживного середовища аналогічного складу наведено в табл. 2.2.

Таблиця 2.2

Розрахунок вмісту компонентів для приготування 13,6 л середовища

Компонент поживного середовища	Концентрація, г/л	Вміст компонента у 13,6 л середовища, г	Композиція	Об’єм композиції, л
глюкоза	20,0	272	І	1,0
дигідрофосфат калію КН2РО4	9,6	1315	ІІ	11,0
діамонійфосфат (NH4)2HPO4	4,75	65
цитрат натрію (Na3C6H5O7)	1,28	17,5
сульфат магнію MgSO4 ×7Н2О	0,18	2,5	ІІІ	0,1

ДР 2.4.1 Приготування і стерилізація композиції І

Розчин глюкози готують окремо від розчинів солей і стерилізують у автоклаві. На технічних вагах зважують 272 г глюкози. Наважку поміщають у колбу об’ємом 2 л, доливають 1 л дистильованої води. Закривають колбу ватно-марлевою пробкою і стерилізують в автоклаві при температурі 112 °С (тиск 0,05 МПа) упродовж 30 хв (Кт, Км 2.4.1).

ДР 2.4.2 Приготування композиції ІІ.

На технічних вагах зважують сольові компоненти композиції ІІ згідно табл. 2.2 та вручну, через люк, завантажують у збірник об'ємом 20 л. Відкривають вентиль подачі води питної і подають у збірник 11,0 л води. Вмикають мішалку і проводять перемішування до повного розчинення солей упродовж 10±1 хв. У рубашку апарату для інтенсифікації процесу розчинення подається глуха пара. Контроль розчинення проводять візуально (Кт 2.4.2)

ДР 2.4.3 Стерилізація композиції ІІ.

У попередньо простерилізований інокулятор об'ємом 20 л за допомогою насосу перекачують композицію ІІ від ДР 2.4.2 та починають процес стерилізації. У апарат подається гостра пара. Після досягнення тиску усередині апарату 0,15 МПа за показниками манометра починають відлік часу стерилізації. Процес стерилізації триває 50 хв при температурі 131 °С. У рубашку апарату для зменшення енерговтрат подається глуха пара.

ДР 2.4.4 Приготування і стерилізація композиції ІІІ. На технічних вагах зважують 2,5 г сульфату магнію (MgSO₄ ×7Н₂О). Наважку поміщають у колбу об’ємом 200 мл, додають 100 мл води питної. Закривають колбу ватно-марлевою пробкою і стерилізують в автоклаві при температурі 131°С (0,15 МПа) упродовж 50 хв. (Кт, Км 2.4.4).

ДР 2.5. Підготовка поживного середовища для культивування посівного матеріалу у посівному апараті об'ємом 250 л. Для вирощування посівного матеріалу у посівному апараті об'ємом 250 л готують 136 л середовища складу, наведеного у табл. 2.3.

Таблиця 2.3