2. Загальна будова дріжджової клітини
Клітина дріжджів має основні структури, притаманні будь-якій еукаріотичній клітині; в той же час, вона має властивості, притаманні грибам: щільна клітинна стінка (як у рослин), відсутність хлоропластів і здатність до накопичення глікогену (як у тварин). Більшість даних по цитології дріжджів отримано при вивченні клітин Saccharomyces cerevisiae. Саме тому нами буде розглянуто будову клітини на прикладі цих дріжджів.
Клітини S. cerevisiae мають округлу, яйцевидну чи еліпсовидну форму, розмір 2,5-10,0 мкм впоперек і 4-5-10 мкм в довжину. Середній об’єм клітини – 29 та 55 мкм3 для галоїдної та диплоїдної клітини відповідно. З віком розміри клітини збільшуються.
Д
ріжджі
S.
cerevisiae
під світловим мікроскопом (збільшення
×600).
У світловому мікроскопі у незафарбованих клітин практично нічого не видно. Більше інформації можна отримати з використанням барвників та електронної мікроскопії.
Барвники для виявлення структур клітини дріжджів
Барвник |
Структура, яка віалізується |
Примітка |
Метиленовий синій |
Цілісна клітина |
Фарбуються нежиттєздатні клітини |
Аміноакридин |
Клітинна стінка |
Індикатор поверхневого заряду |
F-C Con A |
Клітинна стінка |
Зв’язується специфічно з мананом |
Калькофлуор білий |
Брунькові рубці |
Флуоресціює хітин у рубцях |
DAPI (4,6-діаміно-2-феніліндол) |
Ядро |
Флуоресціює ДНК |
Нейтральний червоний |
Вакуолі |
Вакуолі фарбуються у червоно-пурпуровий колір |
Розчин Люголя |
Гранули глікогену |
Глікоген зафарбовується у червоно-коричневий колір |
DAPI |
Мітохондрії |
|
Родамін |
Мітохондрії |
Мітохондрії флуоресціюють блідо-рожевим кольором |
Клітини дріжджів, зафарбовані метиленовим синім (під оптичним мікроскопом)
Дріжджі під електронним мікроскопом
Dapi-фарбування днк
Загальна будова дріжджової клітини
Органела/компартмент |
|
Маркерний фермент |
Клітинна стінка |
Секретовані у периплазму |
Кисла фосфатаза Інвертаза |
Плазматична мембрана |
|
Ванадат-чутлива АТФаза |
Цитозоль |
|
Г6ФДН |
Ядро |
|
РНК полімераза |
ЕПР |
Мікросомальна фракція |
НАДФН-цитохром с оксидоредуктаза |
Вакуоля |
|
α-манозидаза, протези |
Апарат Гольджі |
|
β-глюкансинтаза |
Мітохондрії |
Матрикс |
Аконітаза, фумараза |
|
Міжмембранний простір |
Цитохром с пероксидаза, |
|
Внутрішня мембрана |
Цитохром с оксидаза |
Пероксисоми |
|
Каталаза, ізоцитратліаза |