Методические указания к практической работе

Продолжительность занятия: 2 академических часа (90 минут)

Место проведения занятия: учебная аудитория

Материально-техническое оснащение – таблицы, стенды, микроскопы, микропрепараты, вакцины

Хронометраж практического занятия:

1. Вводное слово преподавателя – 5 мин

2. Проверка исходного уровня знаний (тест-контроль) – 15 мин

3. Разбор теоретических вопросов по теме: «Специфическая профилактика при бактериальных и вирусных инфекциях» – 40 мин

1. Основные механизмы гиперчувствительности замедлен­ного типа (ГЗТ)

2. Принцип реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ). Значение метода

3. Техника постановки РТМЛ

4. Определение понятий «вакцины»

5. Вакцинопрофилактика, вакцинотерапия

6. Типы вакцин, получение

7. Национальный календарь прививок

8. Календарь прививок по эпидемиологическим показаниям

9. Формирование поствакцинального иммунитета

10. Противопоказания к прививанию

11. Реакция флоккуляции

4. Выполнение практической работы – 30 мин

Практическая работа

1. Изучить биологические препараты (записать в тетрадь, оформить протокол). При изучении препаратов студент обращает внимание:

- на внешний вид препарата;

- из инструкции записывает, что содержит препарат, как он получен;

- какое биологическое действие на организм оказывает;

- с какой целью препарат вводится в организм;

- как препарат вводится в организм.

Обращает внимание на перечень обязательных сведений, которые указаны на этикетке:

- наименование препарата;

- номер государственного контроля;

- номер серии препарата;

- срок годности;

- срок вакцинации и ревакцинации.

Биологические препараты представляют собой вид продукции к производству и контролю, к которым предъявляются особо жесткие требования. Эти требования обеспечивают безвредность, надежность и стандартность препарата для прививаемых лиц.

Контроль препаратов осуществляется на всех этапах производства, кроме того, проводится полный дополнительный контроль в специальном подразделении – отделе биологического контроля, после заключения, которого препараты выпускаются для практического применения.

2. Изучить постоянные противопоказания к препаратам календаря прививок (записать в тетрадь).

Таблица 5

Постоянные противопоказания к препаратам календаря прививок

Состояние	Вакцина
Иммунодефицит первичный	БЦЖ, ОПВ, ЖКВ, ЖПВ
ВИЧ-инфекция	БЦЖ, ЖПВ
Злокачественные новообразования, гемобластозы	БЦЖ, АКДС, ЖПВ, ЖКВ, ОПВ
Тяжелые реакции или осложнения на предыдущую прививку данной вакциной	Все вакцины
Прогредиентная неврологическая патология, судороги в анамнезе	АКДС
Тяжелые формы аллергических заболеваний (анафилактический шок, рецидивирующий отек Квинке, полиморфная экссудативная эритема, сывороточная болезнь)	АКДС
Аллергическая реакция на аминогликозиды	ЖКВ, ЖПВ
Анафилаксия на гетерологичный белок сыворотки КРС (следовое количество которой может содержаться в препарате)	ЖКВ, ЖПВ

3. Изучить реакцию нейтрализации (составить алгоритм реакции, записать в тетрадь, оформить протокол).

Реакция нейтрализации токсина антитоксином основана на способности антител нейтрализовывать действие экзотоксина бактерий (таблица 6). В качестве антигена используют белковые токсины бактерий (экзотоксины), сила которых выражается в специальных единицах.

Dlm – минимальная летальная доза – наименьшая доза токсина, способная убить животное определенного вида, веса в течение определенного времени. Например: для дифтерийного токсина – наименьшее его количество, которое убивает морскую свинку весом 250 г в течение 4 дней.

L_m – наибольшее количество токсина, которое в смеси с 1 антитоксической единицей антитоксина, введенное морской свинке весом 250 г, не дает никакой видимой реакции.

L_t – наименьшее количество токсина, которое в смеси с 1 антитоксической единицей антитоксина, введенное морской свинке весом 250 г, приводит к ее гибели в течение 4 дней

L_f – доза или единица флоккуляции – это количество токсина, которое дает самую быструю реакцию флоккуляции при смешивании токсина с одной из доз антитоксической сыворотки. В качестве антитела используется антитоксическая сыворотка, сила которой измеряется в антитоксических или международных единицах.

За международную единицу антитоксина принимают то его наименьшее количество, которое нейтрализует стандартную дозу токсина. Нейтрализация токсина антитоксином получается в строго определенных пропорциях и при одномоментном добавлении всего количества токсина к антитоксину. При дробном добавлении токсина смесь остается токсичной. Реакцию нейтрализации токсина антитоксином применяют: 1) для обнаружения и титрования токсина с помощью диагностической антитоксической сыворотки; 2) для выявления и идентификации в сыворотке нейтрализующих антител с помощью стандартного диагностикума. Реакцию нейтрализации можно поставить в двух вариантах: в организме и в пробирке. В первом случае токсинсодержащие экстракты из выделений, органов больного или продуктов смешивают со стандартными антитоксическими сыворотками и после 30–45 мин экспозиции при комнатной температуре смесь вводят чувствительному животному, чтобы убедиться, что она безвредна. Контрольному животному вводят смесь токсинсодержащих экстрактов и физиологического раствора. Сравнивают эффект в опыте и в контроле. Животные, оставшиеся в живых, при гибели в контроле, свидетельствуют о нейтрализации токсина, содержащегося в исследуемой пробе. Титруют токсин по методу Эрлиха.

Метод Эрлиха состоит из двух этапов:

1 этап – оттитровывают опытную дозу токсина со стандартной сывороткой. Опытная доза токсина Limes tod – это количество токсина, которое в соединении с 1 МЕ стандартной сыворотки вызывает гибель морской свинки весом 250 г при подкожном введении на 4-е сутки (или 50% взятых в опыт мышей).

Таблица 6