Реакция гемагглютинации

№№ пробирок	1	2	3	4	5	6
Разведения аллантоисной жидкости	1:4	1:8	1:16	1:32	1:64	контроль
Физиологический раствор	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	-
Аллантоисная жидкость, разв. 1:2	0 ,25	0,25	0 ,25	0,25	0,25 0,25	в дез.р-р -
1% куриные эритроциты	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Учет гемагглютинации					-	-

3.5. РТГА для определения прироста антител в сыворотках больных (составить алгоритм реакции, записать в тетрадь, оформить протокол).

В качестве антигена используют стандартные диагностикумы, представляющие собой взвесь эталонных штаммов вируса различных серологических типов. Диагностикум предварительно титруют, определяют 4 АЕ.

В качестве антител используют парные сыворотки больных. Сыворотки разводят, к каждому разве­дению сыворотки крови больного, взятой в острый период и в период реконвалесценции, прибавляют равный объем диагностикума в титре 4 АЕ, пластины встряхивают, оставляют на 30 мин при комнатной температуре, после чего добавляют по 0,5 мл 1% взвеси куриных эритроцитов. Пластину встряхивают и оставляют на 45 мин при комнатной температуре, после чего учитывают результат. Определяют титр сыворотки № 1 и № 2. Наибольшее разведение сыворотки, которое тормозит гемагглютинацию эритроцитов, является титром сыворотки. Четырехкратное и более увеличение титра антител в сыворотке реконвалесцентов свидетельствует о связи перенесенной болезни с данным вирусом (таблица 4).

Таблица 4

Ртга с типоспецифической сывороткой

№№ пробирок	1		2		3			4		5		6		7	8
														контроль
Разведения сыворотки	1:20		1:40		1:80			1:160		1:320		1:640		с-ки		вируса
Физиологический раствор	0,25		0,25		0,25			0,25		0,25		0,25		0,25		0,25
Сыворотка типоспецифическая разв. 1:10 (титр 1:320)	0,25		0,25		0,25			0 ,25		0 ,25		0 ,25 0,25		в дез. р-р. 0 ,25 - 1:10
Аллантоисная жидкость 4 АЕ	0,25		0,25		0,25			0,25		0,25		0,25		-	0,25
Пластину встряхивают и оставляют на 30 мин при комнатной температуре
1% куриные эритроциты		0,5		0,5		0,5	0,5		0,5		0,5		0,5		0,5
Учет реакции											-		-		-

Заключение: .........

3.6. Реакция торможения гемадсорбции (составить алгоритм реакции, записать в тетрадь, оформить протокол).

Реакция торможения гемадсорбции основана на способности антител иммунной противовирусной сыворотки тормозить адсорбцию эритроцитов на клетках культуры ткани, зараженной вирусом. Реакцию применяют как для типирования вируса, так и для обнаруже­ния антител. Эту реакцию применяют для вирусов, которые, реплицируясь в клетке, не вызывают видимого цитопатического эффекта. Типирование ви­русов проводят с помощью типоспецифических иммунных сывороток. Цельную или слегка разведенную сыворотку смешивают с заражен­ной культурой клеток, предварительно удалив из нее питательную среду, помещают в термостат на 2 часа. Затем вносят в пробирки 0,4% взвесь эритроцитов, опять выдерживают в термостате, встряхивают и изучают под микроскопом с малым увеличением, обращая внимание на эритроциты, прилипшие к клеткам. Если антитела соответствуют вирусу, на клетках не будет адсорбированных эритроцитов, произой­дет реакция нейтрализации вируса. Тип вируса определяют по той специфической антивирусной сыворотке, которая задерживает гемадсорбцию.

5. Подведение итогов занятия – 5 мин

Практическое занятие 2

Тема. Противобактериальный иммунитет. Противогрибковый иммунитет. Иммунитет к простейшим. Иммунитет к гельминтам. Противоопухолевый иммунитет.

Цель занятия. Ознакомить студентов с механизмами противобактериального и противогрибкового иммунитетами. Рассмотреть иммунитет к простейшим и к гельминтам.