- •Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Свойства интерферонов
- •Противовирусный иммунитет
- •Реакция гемагглютинации
- •Ртга с типоспецифической сывороткой
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Противомикробный иммунитет (общая схема)
- •Противогрибковый иммунитет
- •Противогрибковый иммунитет
- •Иммунитет к простейшим
- •Иммунитет к гельминтам
- •6. Изучить факторы, участвующие в развитии опухоли
- •Противоопухолевый иммунитет
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •2. Изучить постоянные противопоказания к препаратам календаря прививок (записать в тетрадь).
- •Постоянные противопоказания к препаратам календаря прививок
- •Определение титра токсина
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Классификация аллергенов по происхождению
- •Механизм образования IgE
- •Анафилактический тип реакции
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Антигистаминные препараты второго поколения
- •Антигистаминные препараты третьего поколения
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Цитотоксический тип реакции
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Иммунокомплексный тип реакции
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Гиперчувствительность замедленного типа (гзт)
- •Биологические эффекты основных цитокинов, вовлеченных в патогенез ра
- •Иммунопатогенез ревматоидного артрита
- •Лабораторные признаки ра и скв
- •И измененного в результате ревматоидного артрита (б)
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Механизмы формирования толерантности
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Аутоиммунные реакции
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •1. Изучить иммунопатогенез стоматитов. Аллергический стоматит (составить схему, оформить протокол)
- •Диагностика аллергической реакции на акриловые зубные протезы (по л. Д. Гожая)
- •Проявления аллергического воздействия пластмассовых зубных протезов на слизистую оболочку полости рта (по т. П. Кравец, м. Ю. Кравец)
- •Дифференциальная диагностика аллергического стоматита на акрилаты и металлы
- •4. Изучить методы диагностки аллергических заболеваний in vivo и in vitro
- •Современные методы, применяемые для
- •In vitro-диагностики аллергических заболеваний
- •Концентрация IgE в сыворотке крови здоровых людей
- •5.1. Изучить проявления первичных иммунодефицитов по международной классификации болезней (мкб-10).
- •12. Перечислить проявления атаксии-телеангиоэктазии (Синдром Луи-Барр)
- •13. Перечислить проявления хронической гранулоцитарной (гранулематозной) болезни
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Иммунодефицитные состояния
- •2. Решение задачи
- •Иммунограмма пациент б.
- •5. Изучить анализ и этапы лабораторных иммунологических исследований (записать в тетрадь)
- •Характеристика некоторых этапов диагностического анализа
- •Характеристика терминов и критериев статистических методов, используемых при проведении иммунологических исследований
- •Некоторые процедуры иммунологических исследований и критерии их стандартизации
- •Характеристика наиболее часто встречающихся причин аналитических ошибок при проведении рид и ифа
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Цитокины – более узкое понятие, гуморальная составляющая межклеточных взаимодействий в иммунной системе. Гормоны тимуса.
- •Система цитокинов
- •Иммуносупрессия
- •Биологические эффекты основных цитокинов (л.В. Ковальчук)
- •Системные проявления (синдромы) токсического Действия цитокинов (а.А.Ярилин)
- •Провоспалительные цитокины (а.А. Тотолян, и.С. Фрейдлин)
- •Противовоспалительные цитокины (а.А. Тотолян, и.С. Фрейдлин)
- •Иммуноглобулины класса g (IgG)
- •Требования к результатам освоения дисциплины
- •Содержание разделов дисциплины, которые формируют компетенции при их изучении
- •Сокращения
Характеристика наиболее часто встречающихся причин аналитических ошибок при проведении рид и ифа
Характеристика ошибки |
Метод |
Возможные причины |
Мероприятия по устранению ошибок |
Занижение результатов |
РИД |
1.Изменение физи-ко-химических сво-йств аналита (полимеризация) |
1.Контроль правильности хранения образцов для исследования |
2.Неправильное разведение анти-сыворотки, низкий угол крутизны калибровки |
2. Предварительный подбор антисыворот-ки и правильное раз-ведение стандартов |
||
3.Неидентичность структуры стандар-тов и образца |
3.Контроль адекват-ности стандартных материалов, парал-лельное исследова-ние другим методом |
||
4.Незавершенность инкубаци |
4.Контроль времени инкубации (электрофорез и др.) |
||
ИФА |
1.Неподготовленность измеритель-ного прибора |
1.Подготовка фотометра (прогрев не менее 15–20 мин.) |
|
|
2. Сокращение времени проведения реакции на этапе субстратной смеси |
2.Проявление реакции в течение 10–15 мин. (характер и кон-центрация хромогена и субстрата), как ука-зано в инструкции |
|
|
3. Неправильное предварительное разведение стан-дартов и образцов |
3.Использование откалиброванных пипеток, одноразовых наконечников и т.п. |
|
|
4.Захват пузырьков воздуха при пипети- ровании |
4.Тщательное перемешивание контрольных материалов щадящее пипети-рование, контроль |
|
Завышение результатов |
РИД |
1.Мономерные формы Ig |
1.Контроль образца другим методом для выявления парапротеина |
2.Высокий угол на- клона калибровки |
2.Повторная калибровка |
||
3.Низкие значе-ния стандарт-ных образцов |
3.Соответствие кон центраций стандарта и образцов |
||
4.Длительная инку -бация, высокая тем пература инкубации |
4.Стандартизация температуры и вре- мени инкубации |
||
5.Неправильность разведения образцов |
5.Контроль разведения, использова- ния откалиброванных пипеток, одноразо-вых наконечников |
||
6.Несоблюдение ус ловий хранения об разцов до исследо-вания |
6.Правильность хранения образцов до исследования |
||
ИФА |
1.Некачественная отмывка планшет |
1.Тщательная повторная отмывка |
|
2.Изменение конце-нтрации детергента в отмывающем рас-творе |
2.Контроль правильности разведения отмывающих растворов |
||
3.Удлинение сроков инкубации субстратной смеси |
3.Подбор инкубации на этапе субстратной смеси с контролем предыдущего опыта (сравнение результатов |
||
|
|
4.Изменение крутизны калибровки |
4.Повторная калибровка |
|
5.Изменение качества субстратной смеси в результате хранения |
5.Предварительный визуальный контроль цвета субстратной смеси (при необхо-димости заменить) |
|
|
6.Изменение кон-центрации контро-льных материалов |
6.Тщательное пере-мешивание образцов |
|
|
7.Захват пузырьков воздуха при пипети- ровании |
7.Щадящее пипети-рование |
Таким образом, основным правилом работы лаборатории является проведение внутрилабораторного контроля качества по описанным выше критериям. Внешняя экспертиза лабораторных исследований обязательна для всех лабораторий и не заменяет внутрилабораторного контроля качества. Внутрилабораторный контроль выявляет преимущественно случайные ошибки, внешний – систематические ошибки исследований лаборатории. Ряд фирм, включая отечественные, представляет компьютерные программы по проведению контроля качества лабораторных исследований.
9. Решение ситуационной задачи. Определить воспроизводимость (В) результатов ИФА (записать в тетрадь, оформить протокол).
10 образцов сыворотки крови поставлены в 5 повторах. При этом один слабоположительный образец в 4 случаях дал положительный результат, а в 1 случае – отрицательный, и один отрицательный образец в 3 случаях дал отрицательный результат, а в 2 случаях – положительный, остальные результаты воспроизвелись все 5 раз. Заключение: воспроизводимость (В) тест-системы ИФА при этом составит:............... %
5. Подведение итогов занятия – 5 мин
Практическое занятие 13
Тема. Цитокины провоспалительной и противовоспалительной природы. Значение цитокинов Th1 и Th2 типов в регуляции клеточного и гуморального иммунного ответа. Иммунотропные препараты. Классификация. Принципы применения иммунотропных препаратов. Иммунотерапия, схемы лечения. Иммунотерапия аллергенами (ИТА). Иммуносупрессия. Лечебные препараты на основе МкАТ. Определение цитокинов ИФА.
Цель занятия. Ознакомить студентов с иммунотропными препаратами, их механизмом действия. Разобрать метод (ИФА) определения цитокинов в сыворотке крови.
