Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Prak_zan_immunol_stom_sem_2-2_-_kopia.doc
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
9.57 Mб
Скачать

Характеристика наиболее часто встречающихся причин аналитических ошибок при проведении рид и ифа

Характери­стика ошибки

Метод

Возможные причины

Мероприятия по устранению ошибок

Занижение результатов

РИД

1.Изменение физи-ко-химических сво-йств аналита (полимериза­ция)

1.Контроль пра­вильности хранения образцов для иссле­дования

2.Неправильное раз­ведение анти-сыво­ротки, низкий угол крутизны калибровки

2. Предварительный подбор антисыво­рот-ки и правильное раз-ведение стандар­тов

3.Неидентичность структуры стандар-тов и образца

3.Контроль адек­ват-ности стандарт­ных материалов, парал-лельное ис­следова-ние другим методом

4.Незавершенность инкубаци

4.Контроль време­ни инкубации (элек­трофорез и др.)

ИФА

1.Неподготовлен­ность измеритель-ного прибора

1.Подготовка фо­тометра (прогрев не менее 15–20 мин.)

2. Сокращение времени проведения ре­акции на этапе суб­стратной смеси

2.Проявление реак­ции в течение 10–15 мин. (характер и кон-центрация хро­могена и субстрата), как ука-зано в инст­рукции

3. Неправильное предварительное раз­ведение стан-дартов и образцов

3.Использование откалиброванных пипеток, одноразо­вых наконечников и т.п.

4.Захват пузырьков воздуха при пипети- ровании

4.Тщательное пе­ремешивание кон­трольных материа­лов щадящее пипети-рование, контроль

Завышение результатов

РИД

1.Мономерные фор­мы Ig

1.Контроль образца другим методом для выявления парапротеина

2.Высокий угол на-­ клона калибровки

2.Повторная калиб­ровка

3.Низкие значе-ния стандарт-ных образ­цов

3.Соответствие кон­ центраций стандар­та и образцов

4.Длительная инку­ -бация, высокая тем­ пература инкубации

4.Стандартизация температуры и вре-­ мени инкубации

5.Неправильность разведения образцов

5.Контроль разве­дения, использова­- ния откалиброванных пипеток, одно­разо-вых наконечни­ков

6.Несоблюдение ус­ ловий хранения об­ разцов до исследо-ва­ния

6.Правильность хранения образцов до исследования

ИФА

1.Некачественная отмывка планшет

1.Тщательная по­вторная отмывка

2.Изменение конце-н­трации детергента в отмывающем рас-тво­ре

2.Контроль пра­вильности разведе­ния отмывающих растворов

3.Удлинение сроков инкубации субстрат­ной смеси

3.Подбор инкуба­ции на этапе суб­стратной смеси с контролем преды­дущего опыта (срав­нение результатов

4.Изменение крутиз­ны калибровки

4.Повторная калиб­ровка

5.Изменение качест­ва субстратной смеси в результате хранения

5.Предварительный визуальный кон­троль цвета суб­стратной смеси (при необхо-димости за­менить)

6.Изменение кон-цен­трации контро-льных материалов

6.Тщательное пе­ре-мешивание об­разцов

7.Захват пузырьков воздуха при пипети- ровании

7.Щадящее пипети-рование

Таким образом, основным правилом работы лабора­тории является проведение внутрилабораторного контроля качества по описанным выше критериям. Внешняя эксперти­за лабораторных исследований обязательна для всех лабора­торий и не заменяет внутрилабораторного контроля качества. Внутрилабораторный контроль выявляет преимущественно случайные ошибки, внешний – систематические ошибки исследований лаборатории. Ряд фирм, включая отечественные, представляет компьютерные программы по проведению кон­троля качества лабораторных исследований.

9. Решение ситуационной задачи. Определить воспроизводимость (В) результатов ИФА (записать в тетрадь, оформить протокол).

10 образцов сыворотки крови поставлены в 5 повторах. При этом один слабоположительный образец в 4 случаях дал положительный результат, а в 1 случае – отрицательный, и один отрицательный образец в 3 случаях дал отрицательный результат, а в 2 случаях – положительный, остальные результаты воспроизвелись все 5 раз. Заключение: воспроизводимость (В) тест-системы ИФА при этом составит:............... %

5. Подведение итогов занятия 5 мин

Практическое занятие 13

Тема. Цитокины провоспалительной и противовоспалительной природы. Значение цитокинов Th1 и Th2 типов в регуляции клеточного и гуморального иммунного ответа. Иммунотропные препараты. Классификация. Принципы применения иммунотропных препаратов. Иммунотерапия, схемы лечения. Иммунотерапия аллергенами (ИТА). Иммуносупрессия. Лечебные препараты на основе МкАТ. Определение цитокинов ИФА.

Цель занятия. Ознакомить студентов с иммунотропными препаратами, их механизмом действия. Разобрать метод (ИФА) определения цитокинов в сыворотке крови.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]