Краткие сведения:

Пигмент столовой свеклы бетацианин — относительно большая, хорошо растворимая в воде молекула, находящаяся в клеточном соке. Чтобы попасть во внешнюю среду, молекула бетацианина должна пройти через тонопласт, основной цитоплазматический матрикс и плазмалемму. Диффузия бетацианина из вакуоли в среду может проходить достаточно быстро при действии различных факторов или агентов, вызывающих изменение проницаемости мембраны. Измеряя оптическую плотность инкубационной среды через определенный промежуток времени, можно оценить степень воздействия данного фактора на проницаемость мембран. Этот простой и быстрый метод, использующийся обычно в прикладных исследованиях при изучении действия какого-либо вещества или фактора на биологические объекты.

Ход работы:

Из корнеплода столовой свеклы сверлом вырезают столбики ткани диаметром 5 мм, с помощью лезвия и линейки разрезают их на миллиметровые кусочки, отбирая одинаковые по цвету. Отсчитывают 60 дисков, которые для удаления остатков клеточного сока течение 15—20 мин промывают водопроводной водой на воронке Бюхнера.

В три пробирки наливают по 10 мл воды, в три другие — по 10 мл сахарозы. В каждую пробирку помещают по 10 дисков свеклы. Две пробирки (одна с водой, другая с сахарозой) оставляют при комнатной температуре, две другие помещают на водяную баню с температурой 35°С, остальные также помещают на водяную баню при 45° С и фиксируют время.

В течение 1 ч через каждые 10—15 мин в пробирках измеряют выход бетацианина в раствор. Для этого из опытной пробирки пипеткой отливают раствор в чистую пробирку и после измерения оптической плотности выливают раствор в ту же опытную пробирку, стараясь не терять жидкость. Измерение плотности проводят на ФЭКе с зеленым светофильтром (кюветы 0,5 см) или спектрофотометре λ = 535 нм.

Полученные результаты заносят в итоговую таблицу.

Таблица 1

Время, мин	Оптическая плотность
	Вода (контроль)			Сахароза, 0,5 М
	220С	350С	450С	220С	350С	450С
15 мин
30 мин
45 мин

Постройть график зависимости оптической плотности раствора от времени. Сделайте выводы.

Работа 5. Движение цитоплазмы в растительных клетках

Цель: изучить влияние различных факторов на скорость движения цитоплазмы

Объекты, реактивы, оборудование: веточки элодеи, листья валлиснерии, 0,1 и 0,3 М растворы КNО₃ , 0,1 и 0,001 М растворы глюкозы, растворы спирта – 2 и 15 капель 96% спирта на 10 мл воды, предметные и покровные стекла, препаровальные иглы, микроскоп, лампы на 60 и 300 Вт, водяные бани, термометры.