Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
mikra_30_kollok.docx
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
111.01 Кб
Скачать

53 Радиалльная иммунодифузия( реакция преципитации) по Манчини

Цели применения механизм.

Для количественного определения антигена часто используют простую радиальную иммунодиффузию по Манчини, которая основана на измерении диаметра кольца преципитации, образующегося при внесении раствора исследуемого АГ в лунки, вырезанные в слое геля, в котором предварительно диспергирована моноспецифическая антисыворотка.

В стандартных условиях опыта диаметр кольца преципитации прямо пропорционален концентрации исследуемого АГ. Содержание АГ определяют относительно стандартного раствора АГ с известной его концентрацией. Чаще всего при помощи этого метода определяют белковые АГ: количество Yg разных классов в сыворотке крови и других жидкостях, секретов желез, белков крови, спинномозговой жидкости и т.д.

Реакцию иммунодиффузии обычно поводят при комнатной температуре, во влажных камерах. Продолжительность иммунодиффузии зависит от природы АГ.

Методы иммунодиффузии обладают высокой специфичностью и чувствительностью.

Реакция радиальной иммунодиффузии.Иммунную сыворотку с расплавленным агаровым гелем равномерно наливают на стекло. После застывания в геле делают лунки, в которые помещают антиген в различных разведениях. Антиген, диффундируя в гель, образует с антителами кольцевые зоны преципитации вокруг лунок. Диаметр кольца преципитации пропорционален концентрации антигена. Реакцию используют для определения в сыворотке крови иммуноглобулинов различных классов, компонентов системы комплемента и др.

54 Методы определения первичного и вторично иммунного

ответа(дифференцировка IgM и IgG)

Первичным – при первой встрече с антигеном. Его выраженность достигает максимума к 7-8-му дню, сохраняется в течение 2 недель, а затем снижается;

• Вторичным – при повторной встрече с антигеном. Вторичный иммунный ответ развивается быстрее и достигает большей (в 3-4 раза)

интенсивности;

1. ЛАТЕНТНАЯ ФАЗА 1. Презентация Ag 2. Активация, пролиферация и дифференциация соответствующих клонов ИКК 3. Синтез IgM (при первичном) 4. При вторичном иммунном ответе сразу IgG 2. ЛОГАРИФМИЧЕСКАЯ ФАЗА Нарастание титра антител более интенсивное и до более высоких титров – при вторичном иммунном ответе 3. СТАЦИОНАРНАЯ ФАЗА Максимальный и постоянный уровень специфических Ig 4. ФАЗА СНИЖЕНИЯ Постепенное снижение титра специфических Ig

Норма для IgM: 0,8 - 2,5 г/л Причины повышения содержания IgM:

- активация первичного иммунного ответа на антиген в первые 5 дней; - инфекции (острые или обострения хронических); - аутоиммунные заболевания, особенно ревматоидный артрит. Причины снижения содержания IgM: - иммунодефициты первичные и вторичные.

Норма для IgG: 8,0 - 16,0 г/л Причины повышения содержания IgG: - специфические антитела в иммунном ответе с 5-7 до 21 дня;

- иммунопатологические реакции на основе II и III типа повреждения тканей; - аутоиммунные заболевания.

Причины снижения содержания IgG: - иммунодефициты первичные и вторичные.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]