51 Методы оценки фагоцитарной активности фагоцитирующих клеток

Определение активности и интенсивности фагоцитоза и НСТ-теста позволяет оценить состояние фагоцитарной системы, возможность участия фагоцитирующих клеток в патогенезе заболевания и определить тактику лечения.

Активность фагоцитоза (ПФ — процент фагоцитоза) — отображает процент фагоцитов, способных к активному захвату частиц.

Интенсивность фагоцитоза (ФЧ — фагоцитарное число) — показывает количество частиц, поглощенное одним фагоцитом.

Оба эти показателя характеризуют поглотительную способность фагоцитирующих клеток крови (нейтрофилов и моноцитов).

НСТ-тест спонтанный — отображает метаболический потенциал покоящихся фагоцитирующих клеток крови.

НСТ-тест стимулированный — таковой же при стимуляции (аналог антигенного раздражения в организме). Разница между этими показателями (которая в норме составляет 1,5 и более раза) указывает на метаболический потенциал фагоцитов и фактически характеризует их переваривающую способность. Соответственно, снижение активности и интенсивности фагоцитоза расценивается как показатель ослабления поглотительной функции фагоцитов, метаболического резерва — как недостаточности их переваривающей функции.

Снижение функциональной активности фагоцитирующих клеток крови наблюдаются при хронических, часто рецидивирующих заболеваниях бактериальной и грибковой этиологии различной локализации, фурункулезе, туберкулезе, хронических заболеваниях лимфоглоточного кольца и дыхательных путей, пиелонефритах, пиогенных инфекциях, атопическом дерматите,бронхиальной астме, ревматизме, ряде онкопролиферативных заболеваний.

52 Реакция Кумбса для выявления неполных антител: механизм

Выявить непол­ные антитела можно при помощи реакции Кумбса — путем использования «вторых», антииммуноглобулиновых антител.

Реакцию агглютинации для определения антирезусных антител (непрямую реакцию Кумбса) применяют у больных при внутрисосудистом гемолизе. У некоторых таких боль­ных обнаруживают антирезусные антитела, которые являются неполными, одновалент­ными. Они специфически взаимодействуют с резус-положительными эритроцитами, но не вызывают их агглютинации. Наличие таких неполных антител определяют в непрямой реакции Кумбса. Для этого в систему антирезусные антитела + резус-положительные эритроциты добавляют антиглобулиновую сыворотку (антитела против иммуноглобули­нов человека), что вызывает агглютинацию эритроцитов. С помощью реакции Кумбса диагностируют патологические состо­яния, связанные с внутрисосудистым лизисом эритроцитов иммунного генеза, например ге­молитическую болезнь новорожденных: эрит­роциты резус-положительного плода соединя­ются с циркулирующими в крови неполными антителами к резус-фактору, которые пере­шли через плаценту от резус-отрицательной матери.

Механизм. Сложность выявления неполных (моновалентных) антител связана с тем, что эти антитела, связываясь с эпитопами специфического антигена, не образуют структуру решетки и реакция между антигенами и антителами не выявляется ни агглютина­цией, ни преципитацией, ни другими тестами. Для выявления образовавшихся комплексов антиген — антитело приходится ис­пользовать дополнительные тест-системы. Для выявления непол­ных антител, например к резус-антигену эритроцитов в сыворот­ке крови беременной женщины, реакция ставится в два этапа: 1) к двукратным разведениям испытуемой сыворотки добавляют эритроциты, содержащие резус-антиген, и выдерживают при 37 °С в течение часа; 2) к тщательно отмытым после первого этапа эритроцитам добавляют кроличью античеловеческую анти-глобулиновую сыворотку (в заранее оттитрованном рабочем раз­ведении). После инкубации в течение 30 мин при 37 °С резуль­таты оценивают по наличию гемагглютинации (положительная реакция). Необходимо ставить контроль ингредиентов реакции: 1) антиглобулиновая сыворотка + заведомо сенсибилизирован­ные специфическими антителами эритроциты; 2) обработанные нормальной сывороткой эритроциты + антиглобулиновая сыво­ротка; 3) обработанные исследуемой сывороткой резус-отрица­тельные эритроциты + антиглобулиновая сыворотка.