Работа 20. Фотоколориметрия. Определение содержания Fe (III) в минерализованной плазме крови (для лечебно-профилактического и педиатрического факультетов)

Железо по его биологической роли относится к биометаллам, а по количественному содержанию (до 5 мг в организме взрослого человека) – к микроэлементам. Содержится железо в составе гемоглобина (70%), в составе миоглобина (5-10 %), остальное – в составе Fe-содержащих белков (ферритина, трансферрина). Недостаток железа в организме приводит к анемии, избыток (сидероз) может привести к нарушению деятельности сердечно-сосудистой системы, печени, легких.

В плазме крови содержание железа в норме составляет 105 мкг% или 1050 мкг/л.

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

1. Ознакомиться с возможностями фотоколориметрического анализа.

2. Научиться работать на ФЭК.

3. Освоить методику приготовления проб на анализ.

4. Научиться пользоваться калибровочным графиком.

5. Научиться оценивать содержание железа (Ш) в исследуемом растворе.

ЗАДАНИЕ:

Выполните фотоколориметрическое определение содержания ионов Fe³⁺ в плазме крови, мкг/л, сравните с нормой, сделав вывод. Представьте отчет.

Методические указания к выполнению работы:

В основе фотометрического определения содержания ионов Fe³⁺ в плазме лежит образование прочных окрашенных комплексов:

Fe³⁺ + nSCN^- ↔ [Fe(SCN)_n]^3-n

Оптическую плотность раствора, содержащего указанные комплексные ионы, определяют на ФЭК при λ = 500 нм (сине-зеленый светофильтр), т.к. оптическая плотность при этом максимальна.

В мерную колбу на 50 мл внесите пипеткой 5 мл плазмы № , прибавьте 2,5 мл раствора НС1 и перемешайте. Затем прибавьте 5 мл раствора NH₄SCN и доведите объем раствора до метки водой. После перемешивания налейте раствор в кювету и измерьте оптическую плотность на ФЭК. Введите поправку на оптическую плотность «холостой» пробы. «Холостая» проба готовится аналогично, но она не содержит плазму.

Из D_оп. вычтите D_хол. и по калибровочному графику определите содержание железа (Ш) в пробе. Определение повторите три раза. Результаты занесите в табл. 23.

По среднему значению массы железа в пробе рассчитайте содержание железа в 1 л исследуемой плазмы, мкг/л. Сравните с нормой. Оцените относительную ошибку определения.

Таблица 23

№ опыта	Dоп.	Dхол.	Dиссл.	mFe3+, мкг в пробе	м кг в пробе	м кг
1
2
3

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ:

1. Предложите окислитель, который можно использовать при подготовке плазмы на анализ для перевода железа (П) в железо (Ш).

2. Как повлияет увеличение концентрации ионов SCN^- на смещение равновесного процесса образования комплексного иона?

3. Дайте название комплексному иону.

ЛИТЕРАТУРА:

1. С. 279-281; 6. С. 349-351.