Работа 14. Метод комплексонометрии. Определение содержания кальция в плазме крови (для лечебно-профилактического и педиатрического факультетов)
Химический состав крови довольно стабилен, несмотря на то, что в кровь постоянно поступают и выводятся различные по составу и действию вещества. Любые сдвиги состава крови характеризуют определенные патологические изменения в организме. Вот почему исследования крови представляют особую важность для клиники и помогают врачу правильно поставить диагноз.
Биологическая функция кальция заключается в регулировании ферментных систем и, в частности, процессов свертывания крови. Содержание ионов кальция в крови 98 мг/л.
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
1. Ознакомиться с возможностями метода трилонометрии.
2. Научиться записывать реакции образования внутрикомплексных соединений.
3. Ознакомиться с условиями проведения анализа, выбором индикатора.
4. Освоить методику титрования.
5. Овладеть методикой трилонометрического определения содержания ионов кальция в плазме крови.
6. Научиться на основании результатов титрования рассчитывать содержание ионов кальция (Са2+) в плазме.
ЗАДАНИЕ:
Выполните трилонометрическое определение и рассчитайте содержание ионов кальция в плазме крови в мг % и в мг/л. Представьте отчет по работе.
Методические указания к выполнению работы:
Рабочий раствор: трилон Б, Сэ = 0,01 моль экв/л.
Исследуемый раствор: плазма крови.
Вспомогательный раствор: аммиачно-буферный (рН = 9,5-10).
Индикатор: хромоген черный.
Способ титрования: прямой.
Для установления точки эквивалентности используется индикатор хромоген черный, который в зависимости от рН раствора ионизирует по-разному:
H3V ↔ H2V- + H+ ↔ HV2- + 2H+ ↔ V3- + 3H+
рН<6 pH=6 pH=7-11 pH=11,5
винно-красный синий оранжевый
При рН = 9,5-10 комплекс Са2+ с индикатором имеет винно-красную окраску:
Са2+ + HV2- → СаV- + H+
синий винно-красный
П ри титровании трилоном Б в точке эквивалентности наблюдается полный переход металла из непрочного комплекса с индикатором в более прочный комплекс с трилоном Б (бесцветным), и винно-красная окраска меняется на синюю:
СаV- + Na2H2Y Na2СаY + HV2- + H+
винно-красн. б/цветн. б/цветн. синяя
и
ли:
В коническую колбу с помощью пипетки отмерьте 10 мл плазмы крови. Добавьте 5 мл буферного раствора мерной пробиркой и несколько кристалликов индикатора. Исследуемый раствор приобретает винно-красную окраску. Титруйте из бюретки трилоном Б до перехода винно-красного окрашивания в синее. Показания бюретки отметьте с точностью до 0,1 мл. Титрование повторите до получения трех результатов, отличающихся не более чем на 0,1±0,2 мл. Результаты титрования занесите в табл. 17.
По рассчитайте содержание ионов Са2+ в плазме, в мг % и мг/л, сравните с нормой, сделайте вывод.
Таблица 17
№ опыта |
V иссл.р-ра, мл |
Vтр., мл |
|
|
Относит. ошибка
|
Содержание Са2+, мг/л |
1 |
10,0 |
|
|
|
|
|
2 |
10,0 |
|
|
|
|
|
3 |
10,0 |
|
|
|
|
|
КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ:
1. Почему определение ионов Са2+ необходимо проводить в щелочной среде?
2. Возможно ли применение метода трилонометрии для анализа магния, железа, других биогенных элементов в живых организмах?
3. Как рассчитывается эквивалент определяемого элемента в методе трилонометрии?
4. Рассчитайте содержание ионов Са2+ в исследуемой плазме в моль ион/л по результатам титрования.
5. Возможны ли другие аспекты применения комплексонов в биологии и в медицине, кроме аналитических целей?
ЛИТЕРАТУРА:
1. С. 250-252; 2. С. 226; 4. С. 151-155; 6. С. 263-265.