Определение малярийных антигенов гнб-2 (а, с) и пЛдг (в) Таблица5. Скорые тесты определения малярии

Признак	PfГНБ-2 тесты	пЛДГ тесты
Принцип, лежащий в основе теста	Использует моноклональные антитела Определяет гистидин-насыщенный белок P.falciparum -а Воднорастворимый белок выделяется из пораженных возбудителем эритроцитов Отсутствует в зрелых гаметоцитах	Использует моно- и поликлональные антитела Определяет фермент паразита, лактатдегидрогеназу (пЛДГ) пЛДГ найдена в бесполых и половых формах Дифференциация видов паразита основана на антигенных различиях между изоформами пЛДГ
Преимущества	Порог чувствительности определения паразита составляет 10 паразитов/мкл (но чувствительность падает при < 100 паразитов/мкл) Не реагирует перекрестно с другими видами- P.vivax, P.ovale, P.malariae	Порог чувствительности опредления паразита составляет 100 паразитов/мкл Опредлеяет все виды, поражающие человека Дифференцирует малярию, вызваннуе P.falciparum и non-falciparum Не реагирует перекрестно с человеческой ЛДГ Положительный только с живыми паразитами, потенциально целесообразен для наблюдения за эффективностью лечения
Недостатки	Некоторые тесты определяют лишь P.falciparum Не определяет смешанные инфекции Чувствительность и специфичность снижаются при паразитемии < 100/мкл Остается положительным в течение 14 дней после лечения, несмотря на очищение от половых и бесполых форм паразита, из-за наличия циркулирующих антигенов	Не дифференцирует виды non-falciparum Не определяет смешанные инфекции Чувствительность и специфичность снижаются при паразитемии < 100/мкл
Чувствительность/ специфичность*	Чувствительность 92-100% Специфичность 85- 100%	Чувствительность  P.falciparum 88-98%  P.vivax 89-94% Специфичность P.falciparum 93-99% P.vivax 99-100%
Коммерческая цена/тест**	Приблизительно 0.60-1.00 $США	Приблизительно 2.50$ США
Коммерческие продукты	PATH falciparum Malaria IC Strip test Program for Appropriate Technology in Health MAKROmed TM Orchid ®	OptiMAL ® - Flow, Inc. Binax NOW ® ICT Malaria - Binax, Inc.

* По сравнению с микроскопией ** Меняется в зависимости от поставщика и размера поставки

Полимеразная цепная реакция (PCR) Этот метод основан на молекулярном биологическом методе для определения генетического материала возбудителя. Он имеет крайне высокую чувствительность. Принцип теста: выявление ничтожно малого количества паразитарной ДНК и увеличние в миллионы раз для более легкого определения. Порог чувствительности составляет 0.05-0.1 паразитов/мкл. Сегодня данный метод позволяет дифференцировать виды плазмодия. Более того, он может быть использован для определения мутацийобуславливающих лекарственную устойчивость возбудителя. Тем не менее,на сегодня этот многообещающий метод используется лишь в больших исследовательских лабораториях. Метод связан с высокой стоимостью и вовлечением обученного персонала. Вероятность загрязнения (ложно-положительный тест) крови остается другим недостатком полимеразной цепной реакции.

19. LE-клеточный синдром: причины возникновения, методы лабораторной диагностики. 

LE-феномен (lupus erythematosus) наблюдается в процессе инкубации периферической крови больныхсистемной красной волчанкой и некоторых других заболеваний аутоиммунной природы.

Положительный LE-тест - метод ротирования крови со стеклянными бусами в модификации Е. И. Новоселовой, включает следующие морфологические образования:

- LE-клетки — нейтрофильный лейкоцит, содержащий фагоцитированный гомогенный ядерный материал. Ядерное тело LE-клетки имеет округлую форму, окрашивается в ярко-красный цвет, занимает центральную часть клетки, оттесняя собственное ядро нейтрофила к периферии, причем клетка с включением выглядит в 1,5—2 раза крупнее обычной. Истинные LE-клетки необходимо отличать от так называемых tart-клеток, обычномоноцитов с фагоцитированным ядром;

- свободно лежащий ядерный материал (гематоксилиновые тела) — образование ядерной природы, округлой формы и величиной с 1—2 лейкоцита, по гомогенной структуре и ярко-красной окраске сходный с телами внутри LE-клеток;

- «розетки» — образования из нейтрофилов, кольцом окружающие ядерное тело.

Внеклеточные ядерные (гематоксилиновые) тела и розетки рассматривают как промежуточные этапы образования LE-клеток. Формирование

LE-клеток зависит от LE-фактора, содержащегося в плазме крови и других жидкостях у больных системной красной волчанкой и представляющего собой антинуклеарные антитела(главным образом к нуклеопротеину, в меньшей степени к гистону и ДНК) гамма-глобулиновой природы.

Взаимодействие LE-фактора с ядром лейкоцита ведет к деполимеризации ядерного хроматина, освобождению ядерного материала из клетки и последующему фагоцитозу его нейтрофильными лейкоцитами, причем для фагоцитоза необходимо участие комплемента.

 LE-клетки  находят в 80 % случаев системной красной волчанки, приревматоидном артрите, активном гепатите, системной склеродермии и при лекарственных волчаночноподобных  синдромах .

LE-клетки в норме в крови отсутствуют.

Обнаружение в крови LE-клеток является специфическим симптомом системной красной волчанки (СКВ). Однако, отрицательный результат исследования не исключает возможность заболевания СКВ. Частота обнаружения LE-клеток у больных острой СКВ лежит в пределах 40..95%. Чаще волчаночные клетки обнаруживаются при обострении болезни.

LE-клетки образуются как результат фагоцитоза нейтрофильными лейкоцитами ядер клеток, которые содержат диполимеризованную ДНК. Субстанция представляет собой иммунный комплекс, который состоит из волчаночного фактора, остатка ядра лейкоцитов и комплемента.

  LE-клетки  обычно обнаруживаются в раннем периоде СКВ, при выраженном нефротическом  синдроме  и потере с мочой значительного количества белка.

Появление LE-клеток в большом количестве является неблагоприятным прогностическим признаком. По мере улучшения состояния больного в процессе лечения количество LE-клеток снижается.

LE-клетки следует дифференцировать с ложными волчаночными В-клетками и tart-клетками, которые отличаются от LE-клеток морфологическими признаками и диагностического значения для СКВ не имеют.

LE-клетки в редких случаях могут обнаруживаться (непостоянно) при других заболеваниях: тяжелые поражения печени, острые лейкозы, острый ревматизм, эритродермия, милиарный туберкулез, пернициозная анемия, при непереносимости антибиотиков, при узелковом периартериите, гемолитической анемии, тромбоцитопенической пурпуре.