3.При определении примеси «Другие пуриновые основания» в одной из серий теофиллина по методике нд в растворе аммиака появилось сильное помутнение раствора.

Теофиллин (Theophyllinum, Theophylline)

Функцгр: пуриновый цикл, 2 метильные, 2 окси-группы

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок без запаха.

Растворимость. Мало растворим в воде, спирте 96% и хлороформе.

2. Реакции идентификации:Подлинность(ГФ 12) Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра теофиллина.

К 0,1 г субстанции прибавляют 0,5 мл водорода пероксида, 0,5 мл хлористоводородной кис-ты разведенной 8,3% и выпаривают на вод бане досуха. Остаток смачивают 0,1 мл раствора аммиака; появляется пурпурно-красное окрашивание. Реакция основана на разложении производных ксантина до производных пиримидина, где аминогруппы конденсируются друг с другом и образуется пурпурная кислота в виде аммонийной соли. (Мурексидная К 0,1 г субстанции встряхивают с 2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида в течении 3 мин. и фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,2 мл 2% раствора кобальта хлорида и перемешивают; образуется белый с розовым оттенком осадок. (общегрупповая реакция, но у разных продуктов – разный цвет - дифференциация).

Реакции с солями тяж мет – основаны на свойствах препарата. Теофиллин переводят сначала в соли, прибавляя гидроксид натрия. Температура плавления от 270 до 274 град. С.

Прозрачность раствора. 0,5 г субстанции растворяют в горячей воде, охлаждают и разбавляют водой до 75 мл. Раствор должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на прозрачность раствора, должен быть бесцветный или выдерживать сравнение с эталоном В9.

Кислотность.0,5 г субстанции растворяют в 75 мл свежепрокипяченной воды и прибавляют 0,05 мл раствора метилового красного; появившееся красное окрашивание должно переходить в желтое от прибавления не более 0,4 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида.

Примеси:Другие пуриновые основания, например теобромин. Раствор должен быть прозрачным и бесцветным (ГФ10) В условии сказано, что появилось сильное помутнение раствора. Мы можем предположить, что в данном ЛП недопустимой примесью является теобромин, который и дал помутнение раствора. По ГФ 12 – проведение хроматографии. Хроматографируют испытуемый раствор и раствор сравнения. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 3 раза превышать время удерживания пика теофиллина. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика любой примеси должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%); суммарная площадь пиков примесей должна не более чем в 5 раз превышать площадь пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%).

Остальные примеси:хлориды, сульфаты, сульфатная зола, потеря в массе при высушивании, тяжелые металлы, остаточные органические растворители, микробиологическая чистота.

Количественное определение: Косвенный метод нейтрализации. При взаимодействии теобромина и теофиллина с раствором нитрата серебра образуется эквивалентное препаратам количество азотной кислоты, которую титруют стандартным раствором гидроксида натрия.Fэкв = 1 Титрант: Гидроксид натрия 0,1. Индикатор: 1 мл 0,04% раствора фенола красного. В ТЭ изменяется окраска раствора до фиолетово-красного окрашивания. К общегрупповым реакциям для данного препарата относятся Мурексидная проба (см. выше), образование нерастворяемых соединений с тяж мет (Ag+,Co++,Cu++), Теофиллин образует с 2,6-дихлорхинонхлорамидом в боратном буферном растворе (рН 8,5) мероцианиновый краситель интенсивно-голубого цвета.К экспресс-методам ИК-спектрофотометрию, УФ-спектрофотометрию, ТСХ.

Другие методы количественного определения: КО-титрование в неводнойсреде (протофильного растворителя – ДМФА, пиридин, Титрантметилат натрия или калия – основано на слабых кислых свойствах препарата, усиление кислотных свойств в протофильном растворителе), Обратный способ аргентометрии: к р-ру прибавляют избыток нитрата серебра, образуется нерастворимая соль. Осадок отфильтровывают ,в фильтрате определяют избыток нитрата серебра титрованием со стандартным раствором роданида аммония (инд – железоаммонийные квасцы), ГЖХ, ВЭЖХ, УФ-спектрофотометрия. Возможен классический способ Къельдаля. В ЛФ – УФ основан на законе Бугера-Ламберта-Бера D=Elc. Измерение поглощения в мах. ВЭЖХ в ЛФ – по площ пика.