Вопросы для самопроверки:

1.Опишите метод определения метахроматина?

2.Почему дрожжи называются сахарными грибами?

3.Основное свойство дрожжей?

4.Объсните назначение плодовых тел?

5.Укажите основные отличия в строении пенициловых и аспергиловых грибов?

6.Какую роль могут играть мицелиальные грибы в пищевых производствах?

Лабораторная работа № 3.

Тема: Приготовление питательных сред. Выполнение посевов и пересевов микрoорганизмов

Цель: 1. Изучить методику приготовления питательных сред.

2. Приобретение практических навыков по технике посевов и пересевов микрoорганизмов

Материальное обеспечение:

1. Картофель. 2. Капуста . 3. Молоко . 4. Глюкоза . 5.Пентон. 6.Соляная кислота. 7.Желатин. 8. Сахар. 9. Сухие питательные среды заводского приготовления. 10. Пробирки. 11. Фильтровальная бумага. 12. Весы технические. 13. Конические колбы на 200см³, 14. Вата. 15. Чашка Петри. 16. Автоклав . 17. Спиртовки. 18. Фосфорнокислый калий. 19. Сернокислый магний. 20. Марля.

21. Универсальная индикаторная бумага.

Теоретическая часть приготовления питательных сред

Для культивирования микрoорганизмов необходимы питательные среды, из которых микробы получают материал для пластических и энергетических процессов клетки. Любая питательная среда должна содержать органогены

(углерод, водород, кислород, азот) и элементы (фосфор, калий, магний, железо, сера), а также факторы роста (витамины и некоторые аминокислоты, гормоны).

Универсальные среды пригодны для большинства микрoорганизмов.

Элективные среды (избирательные) пригодны для развития определенных групп микрoорганизмов и менее пригодны для других микрoорганизмов.

Естественными питательными средами для микрoорганизмов могут являться молочный, мясной, рыбный бульон, овощи, фрукты, а также их отвар.

Чаще используются искусственные питательные среды, т. е. приготовленные из известных химических соединений в определенных концентрациях. При культивировании на них микрoорганизмов можно легко исследовать их физиологические свойства.

Для получения плотных сред в бульоны вводят желирующие вещества

(агар-агар - 1,5- 2%, желатин - 10-15%)

Агар-агар - это высокомолекулярное вещество типа полисахарида, получаемое из морских водорослей.

Желатин – это белковое вещество, получаемое из кожи, сухожилий, хрящей животных.

Эти вещества при нагревании растворяются и дают коллоидный раствор, а при охлаждении образуют плотный студень.

При подготовке к работе письменно ответьте на вопросы

1.Приведите классификацию питательных сред с конкретными примерами.

2. Дайте определение, что такое чистая культура микроорганизмов.

3. Объясните, с какой целью в микробиологии используют микробиологические петли.

4. Почему питательную среду МПА нужно охладить при посеве?

Ход работы

1. Приготовление питательных сред

   1. Среда Ганзена (для дрожжей)

В 1 см³ дистиллированной воды растворяют глюкозы 5 г, пентона – 10 г, фосфорнокислого калия – 3 г, сернокислого магния – 25 г.

2. Картофельная среда (для бактерий)

Очищенный картофель нарезают ломтиками, которые укладывают в чашки Петри и стерилизуют в автоклаве при давлении 1 атм. 30 мин или в сушильном шкафу при температуре 120^оС в течение 20 – 30 мин.

3. Среда Чапека (для мицелиальных грибов)

Глюкоза – 30 г, азотнокислый натрий – 2 г, фосфорнокислый калий – 1 г, сернокислый магний – 0,5 г, хлористый калий – 0,5 г, сернокислое железо – 0,01 г, вода – 1000 см³.

4. Капустная среда (для молочно - кислых бактерий)

1 см³ молока, 20 г. измельченной капусты помещают в кастрюлю, заливают водой и кипятят в течение 10 мин., затем отжимают через двойной слой марли, полученную жидкость фильтруют и в 2 раза разводят водой. К отвару добавляют 2 % глюкозы и 1 % пентона. Стерилизуют при давлении 0,5 атм. 30 мин.

5. Мясопептонный агар (МПА) – удобная для использования питательная среда заводского приготовления. Порошок (5 гр.) высыпают в холодную воду (100см^з) взбалтывают, а затем нагревают при помешивании до полного растворения агара. Разливают по колбам или пробиркам, закрывают ватными пробками и стерилизуют в автоклаве. Является универсальной средой.

6. Среда Эндо (для кишечной палочки)

Готовится из сухого порошка заводского происхождения. Способ приготовления указан на этикетке упаковки.