Контрольные вопросы.
1. Что мы понимают под морфологическими признаками микроорганизмов?
2. Где выращивают картофельную и сенную палочку?
3. В каких продуктах можно увидеть молочно-кислые бактерии?
4. С какой целью проводится фиксация микроорганизмов?
5. Как осуществляется фиксация жаром?
6. Назовите основные части микроскопа.
7. Назовите особенности работы с объективом увеличением в 100 раз.
8. Назовите основные формы клетки бактерий.
Лабораторная работа № 2.
Тема:Изучение морфологических признаков плесневых грибов и дрожжей.
Цель: Изучение строения тела грибов и возможностей отличия их друг от друга, изучения формы дрожжевой клетки.
Материальное обеспечение: микроскопы, чашки Петри с выращенными микроорганизмами, реактивы.
Плесневые грибы — это чаще всего многоклеточные микроорганизмы, достигающие размеров нескольких миллиметров и видимых простым глазом.
Однако исследование плесневых грибов возможно только с помощью микроскопа. Выращивают плесневые грибы обычно на поверхности питательных сред, т. к. они растут с обязательным доступом воздуха. В условиях лаборатории их выращивают в чашках Петри на плотных питательных средах. Чашку Петри с выращенными грибами помещают на столик микроскопа и, используя объектив с увеличением в 10 и 40 раз, изучают плесневые грибы. В микроскоп можно увидеть непосредственно грибницу, воздушные гифы и плодовые тела.
По форме плодовых тел можно определить вид плесневых грибов. Кроме того каждый гриб даёт характерные колонии при выращивании, отличающиеся чаще всего цветом, что является дополнительным фактором для развития различных видов плесневых грибов.
В условиях лаборатории чаще всего растут мукоровые грибы, пеницилловые, аспергилловые грибы и др.
Мукоровые грибы — образуют на поверхности питательных сред серый ватообразный налёт, а при рассмотрении под микроскопом видны характерные шаровидные вздутия чёрного цвета (спорангии), в которых находятся органы размножения (спорангиеспоры).
При обнаружении данного вида гриба можно сделать рисунок, определить к какому классу грибов он относится и дать его практическое применение.
Пеницилловые грибы — на поверхности питательных сред образую колонии зелёного цвета. В микроскопе напоминают короткие кисти, состоящие из органов размножения (конидий). Нужно рассматривать край колонии, иначе рисунок будет густым и его будет трудно рассматривать.
Род Oidium (кл. Дейтеромицеты) характеризуетсяналичием сильно разветвленного мицелия, гифы которого легко расспадаются на оидии – отдельные клетки, служащие для бесполого размножения. Характерным представителем является молочная плесень, часто встречается в виде бархатистой пленки на поверхности кисломолочных продуктов, вызывая их порчу.
Ход работы:
Изучение плесневых грибов.
Чашку Петри с выращенными грибами помещают на столик микроскопа и с помощью объектива с увеличением в 10 раз находим изображение.
Изучение дрожжей.
Для изучения морфологии дрожжей из дрожжевой суспензии готовим препарат «раздавленная капля» и рассматриваем форму дрожжевой клетки. Для рассмотрения можно использовать хлебопекарные дрожжи.
Все рассматриваемые препараты нужно зарисовать и сделать необходимые пояснения и выводы к ним.
Дрожжевые клетки содержат запасное азотистое вещество метахроматин (волютин), который содержится в клетках в форме полужидких зёрен. Для их обнаружения препарат окрашивают в течение 0,5-1 мин. карболовым фуксином Циля. Сливают краситель, промывают водой и обесцвечивают препарат 1% раствором серной кислоты в течении 20-30 сек. Сливают кислоту, препарат промывают водой и окрашивают слабым раствором метиленового синего(1:40) в течении 1-2 мин. При окрашивании метахроматин в клетках приобретает красный цвет, а протоплазма - синий.
Включения жира встречаются в клетках многих микроорганизмов. Их легко обнаружить при окраске клеток суданом III. Для этого каплю культуры на предметном стекле смешивают с каплей краски. При исследовании под микроскопом, протоплазма клеток будет бесцветной, а капля жира окрашенной в красный цвет.
Микроскопируют препараты с сухой или иммерсионной системой.
После проведения опытов необходимо сделать выводы по работе.