2.1.3. Выбор и подготовка лабораторных животных к эксперименту

Прежде чем начать токсикологический эксперимент, необхо­димо четко определить задачу исследования, выбрать объект ис­следования (вид животных), метод введения вещества, установить длительность опыта.

Выбор животных для эксперимента является весьма ответ­ственным моментом. В первую очередь учитывают такие факторы, как видовая чувствительность, возраст и пол животных. Под видо­вой чувствительностью понимают неодинаковое отношение жи­вотных различных видов к одному и тому же яду.

При определении показателей токсикометрии рекомендуется производить опыты не менее чем на двух видах животных, а имен­но на лабораторных мышах и крысах. Определение среднесмертельной дозы следует проводить как на самцах, так и на самках, поскольку у них прослеживается разница в величинах LDy), ко­торая, вероятно, частично может быть обусловлена различиями в метаболизме вещества в печени животных разного пола. Острая токсичность может существенно меняться с возрастом исследуе­мых животных.

Кроме того, животные перед исследованием не должны ис­пользоваться для других экспериментов, а также подвергаться воз­действию любых фармакологических препаратов. Число использу­емых животных должно быть достаточным для статистического анализа и зависит от метода расчета LDy^. Обычно для каждой дозы используют группу из 8—10 животных. Масса выбранных животных должна соответствовать массе половозрелых особей, для мышей — 18—20 г, а для крыс — 180—240 г.

Исходный период постановки токсикологического экспери­мента можно условно разделить на следующие этапы:

•подбор требующихся по условиям опыта животных;

•наблюдение, карантин и выбраковка больных животных;

• определение исходных значений исследуемых показателей — фона;

• выбраковка животных с резко выделяющимися значениями показателей;

• распределение по группам;

• статистическая проверка отсутствия межгрупповых различий.

2.1.4. Условия содержания лабораторных животных

Немаловажное значение для токсикологического эксперимента имеют условия содержания подопытных животных. Содержание животных в условиях, вызывающих у них стресс (одиночное со­держание в пенале, грубая фиксация в нефизиологическом положении), приводит к увеличению токсичности. Изменения в пита­нии также сказываются на показателях токсичности.

Для экспериментальных исследований в токсикологических лабораториях используют крыс линии Вистар или белых беспо­родных крыс, которые являются альбиносами черной (Rattus rattus) и серой (пасюк — Rattus norvegicus) крыс, а также белых мы­шей, которые являются альбиносами домовой мыши (Mus musculus). И крысы, и мыши принадлежат к одному и тому же от­ряду грызунов (Rodentia), семейству мышиных (Muridae).

Важное преимущество белых крыс как лабораторных животных заключается в том, что они довольно устойчивы к инфекционным заболеваниям и дают большой приплод.

Белых крыс содержат в помещениях с хорошей вентиляцией, достаточным освещением и равномерной температурой — 20— 22 *С. Лабораторные крысы плохо переносят холод. Влажность воздуха в помещениях не должна превышать 40—45 %.

Для содержания крыс наиболее пригодны цельнометалличес­кие или полистироловые клетки, покрытые сеткой из нержавею­щей или оцинкованной стали. Минимальная площадь дна клетки на одно животное составляет для крыс 150 см2.

В качестве подстилки для животных используют крупные опилки, измельченный торф или сечку из соломы или бумаги, тряпки. В клетках поддерживают надлежащую чистоту. Они долж­ны быть всегда сухими, чистыми, хорошо вентилируемыми. Не допускают скопления в них мочи и фекалий.

Кроме ежедневной уборки клетки I —2 раза в месяц тщательно моют и дезинфицируют. Дезинфицировать клетки лучше всего крутым кипятком, горячим 5—10%-м раствором едкой щелочи или такими противомикробными средствами, как хлорная из­весть, креолин, сулема, формалин и др.

Крысы — всеядные животные, поэтому нельзя ограничивать их рацион только растительной пищей. Крысы, не получающие в не­обходимых количествах продукты животного происхождения (мо­локо, мясо, мясокостную муку), минеральные вещества и витами­ны, перестают расти.

Суточная потребность взрослой крысы в кормах составляет в среднем 30—32 г, из них 25 г смешанного корма и 5—7 г овощей.

Кормят крыс обычно 2 раза в сутки. Ввиду того что крысы ночные животные и едят в темное время суток, основную часть корма следует давать вечером, примерно к 20 ч. Не рекомендуется резко менять пищевой режим, к новой пище крыс нужно приучать постепенно. Вода для питья должна быть чистой и свежей, реко­мендуется пользоваться кипяченой водой. Заменять воду молоком также надо постепенно, в противном случае животные отказыва­ются от еды и заболевают.

Содержание и кормление мышей во многом сходно с содержа­нием и кормлением лабораторных крыс. Отличием является то,

что мыши более чувствительны к нарушениям температурного ре жима, смене корма и инфекционным заболеваниям (в частности сальмонеллезу). У мышей в гораздо большей степени, чем у крыс проявляется «социальная» иерархия в группе — борьба за лидер­ство, вследствие чего не рекомендуется изменять состав мышей Е клетках.

Суточная потребность взрослой мыши в кормах составляет Е среднем 9,5—10 г смешанного корма и 1—2 г овощей.