Б. Количественное определение общего белка в моче с помощью сульфосалициловой кислоты

Для работы необходимы: фотоэлектроколориметр (ФЭК), центрифужные мерные пробирки, 3% раствор сульфосалициловой кислоты, мерная пипетка.

Ход работы. 1. В центрифужную пробирку налить 1,25·10^-3 л (1,25 мл) профильтрованной мочи. Долить до 5·10^-3 л (5 мл) 3% раствор сульфосалициловой кислоты.

2. Через 15 мин на ФЭКе против контроля определить оптическую плотность. При этом использовать оранжевый светофильтр № 7 (длина волны 650-590 нм), кювету с рабочей шириной 5·10^-3 м (5 мм).

3. Постановка контроля: в центрифужную пробирку наливают 1,25·10^-3 л (1,25 мл) профильтрованной мочи и доливают до 5·10^-3 л (5 мл) 0,9% раствором хлорида натрия. Производят измерения на ФЭКе при тех же условиях, что и в опытной пробе. При расчете из оптической плотности опыта вычитают оптическую плотность контроля.

4. Расчет произвести по калибровочному графику. Для его построения необходимо приготовить стандартные растворы альбумина в 0,9% растворе хлорида натрия с концентрацией белка (5, 10, 20, 50 и 100)·10^-2 г/л (5, 10, 20, 50 и 100 мг%). Из каждого разведения взять по 1,25·10^-3 л (1,25 мл) и обработать так же, как опытные пробы. Прямолинейная зависимость при построении калибровочного графика сохраняется до концентрации 100·10^-2 г/л (100 мг%)^*.

^* (Расчет по калибровочной кривой см. "Унифицированные методы клинических лабораторных исследований" / Под ред. В. В. Меньшикова, М., Издательство I ММИ, 1971, в. III, ч. I.)

Задание 4. Определение сахара в моче а. Качественная проба Гайнеса

Для работы необходимы: пробирки, градуированные пипетки, водяная баня, реактив для определения сахара в моче^*.

^* (Приготовление реактива: 1) 13,3·10^-3 кг (13,3 г) химически чистого кристаллического сульфата меди (CuSО₄·5H₂О) растворить в 400·10^-3 л (400 мл) воды; 2) 50·10^-3 кг (50 г) едкого натра растворить в 400·10^-3 л (400 мл) воды; 3) 15·10^-3 кг (15 г) чистого глицерина развести в 200·10^-3 л (200 мл) воды; 4) смешать первый и второй растворы и тотчас прилить третий. Реактив стоек.)

Ход работы. 1. К 4·10^-3 л (4 мл) реактива прибавить 8-12 капель мочи и поставить в кипящую водяную баню. В присутствии сахара жидкость окрашивается в желтый или красный цвет, появляется осадок. При отсутствии сахара в моче цвет реактива не меняется (синий).

Б. Определение сахара в моче

Для работы необходимы: реактивная бумага "Глюкотест".

Ход работы. 1. На реактивную бумагу нанести несколько капель мочи. В присутствии сахара в моче изменяется окраска бумаги.

2. Моча для исследования должна быть свежей, так как при стоянии ее на холоду количество сахара в моче значительно уменьшается, а если его немного, то совсем исчезает.

Нервно-мышечная система

Методы исследования свойств мышц. Физиологические свойства мышечной ткани обычно изучают на нервно-мышечном препарате лягушки, чаще всего на изолированной икроножной мышце с седалищным нервом. Нервно-мышечный препарат помещают в специальную камеру, в которой поддерживают определенную влажность.

В качестве раздражителя преимущественно используют электрический ток. Однако можно применять механические (щипок, укол, удар), химические (кислоты), температурные (тепло, холод) и другие раздражители.

О функциональном состоянии мышцы судят по результатам регистрации ее Механической реакции (миография) и биопотенциалов (электромиография).

Регистрация мышечного сокращения. Для записи сокращений мышцы ее укрепляют в вертикальном миографе, специальном зажиме, в который помещают бедренную кость нервно-мышечного препарата. Сухожилие мышцы соединяют с пишущим рычажком, свободный конец которого прикладывают к барабану кимографа. Главную часть кимографа - барабан - покрывают бумагой. Барабан приводят в равномерное вращение часовым механизмом или электромотором. Часовой механизм заводят с помощью ключа. Для приведения барабана во вращение смещают стопор, находящийся на стенке коробки часового механизма. Скорость вращения регулируют с помощью специального валика, расположенного на оси барабана. Для замедления вращения применяют крылатки, оказывающие сопротивление действию часового механизма.

Для электрического раздражения мышцы используют электронные стимуляторы или санный аппарат Дюбуа-Реймона.

Основной частью стимулятора является генератор колебаний, включающий электронные лампы или транзисторы. Прибор питается от сети переменного тока и имеет гнезда для подключения электродов. На лицевой панели стимулятора имеются ручки и шкалы. Поворотом тумблера "частота" устанавливают нужную частоту раздражения в секунду, переключателем "длительность" устанавливают необходимую продолжительность стимуляции. С помощью ручки "амплитуда" и тумблера переключения диапазонов амплитуды (×1, ×10) можно изменять величину раздражающего стимула. Имеется тумблер "пуск", при включении которого раздражение подается к препарату. Корпус заземляют.

При раздражении нервно-мышечного препарата возникает мышечное сокращение, которое регистрируется на барабане кимографа в виде кривой, получившей название миограммы.