- •Часть 4
- •Тема: общая вирусология.
- •Теории происхождения вирусов
- •I. Цпэ (цпд) - цитопатический эффект (действие). Нормальные клетки
- •II. Цветная проба Солка.
- •III. Феномен гемадсорбции.
- •IV. Образование бляшек (феномен Дюльбекко).
- •V. Феномен интерференции.
- •VI. Метод флюоресцирующих антител.
- •Определение инфекционной активности вирусов (титрование).
- •Общая схема идентификации (серотипирования) выделенного вируса.
- •Тема: острые респираторные вирусные инфекции (орви). Грипп.
- •Этиология орви
- •Краткая характеристика вирусов гриппа
- •1 Этап. Подготовка исследуемого материала ____________________________________
- •4 Этап.
- •Титрование вируса в рга
- •5 Этап.
- •Идентификация вируса в ртга
- •III. Серодиагностика Серодиагностика гриппа в рск
- •1 Сыворотка
- •2 Сыворотка
- •Серодиагностика гриппа с помощью ртга
- •1 Сыворотка
- •2 Сыворотка
- •Аденовирусные инфекции краткая характеристика аденовирусов
- •Лабораторная диагностика аденовирусных инфекций
- •I. Экспресс-диагностика
- •Цитоскопический метод
- •1 Этап. Подготовка исследуемого материала ____________________________________
- •Тема: энтеровирусные инфекции.
- •Краткая характеристика пикорнавирусов
- •Сравнительная характеристика энтеровирусов
- •5 Этап.
- •Рн с поливалентной сывороткой
- •2. Рн с моновалентными сыворотками
- •Заключение:
- •2. Серодиагностика
- •1 Сыворотка
- •2 Сыворотка
- •Лабораторная диагностика заболеваний, вызванных вирусами echo и коксаки вирусологический метод
- •Заключение:
- •Тема: вирусные гепатиты.
- •Сравнительная характеристика вирусных гепатитов
- •Лабораторная диагностика гепатита а
- •Диагностика гепатита а в ифа.
- •Лабораторная диагностика гепатита в
- •Диагностика гепатита b в ифа.
- •Лабораторная диагностика гепатитов с, д и е
- •Тема: особо-опасные вирусные инфекции.
- •Вирусы, вызывающие поражение цнс
- •Краткая характеристика вируса бешенства
- •1) Инактивированная антирабическая вакцина - _______________________
- •2) Антирабический гамма-глобулин - __________________________________
- •Лабораторная диагностика бешенства
- •1. Экспресс-диагностика
- •2. Вирусологический метод
- •Арбовирусы
- •Краткая характеристика вируса клещевого энцефалита
- •1) Инактивированная вакцина - _____________________________________
- •2) Гамма-глобулин - _________________________________________________
- •Лабораторная диагностика клещевого энцефалита
- •2. Обнаружение антигена вируса клещевого энцефалита в рнга
- •3. Серодиагностика клещевого энцефалита в ртга
- •Вирусы иммунодефицита человека Краткая характеристика вирусов иммунодефицита человека
- •1. Выявление антител к антигенам из вирусного лизата.
- •II. Экспертное исследование (иммуноблоттинг, молекулярная гибридизация)
- •Вопросы к коллоквиуму № 4 по медицинской микробиологии
Теории происхождения вирусов
1. __________________________________________________________________
____________________________________________________________________
2.___________________________________________________________________
____________________________________________________________________
3. __________________________________________________________________
____________________________________________________________________
РЕАЛИЗАЦИЯ ГЕНЕТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА
Тип НК вируса транскрипция трансляция
(±) ДНК
(±) РНК
(+) РНК
(-) РНК
(-) РНК
информационная
РНК
(+) РНК
белок
(+) РНК у ретровирусов
(-) ДНК
(±) ДНК
МЕХАНИЗМЫ ПЕРЕДАЧИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
Механизм |
Примеры |
|
|
|
|
|
|
|
|
МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
I. ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКА
1. Выявление вирусов или их АГ в исследуемом материале методами: иммунофлюоресцентным; иммуноферментным, радиоиммунным; РСК; РНГА; РП; иммунная электронная микроскопия (ИЭМ).
2. Выявление специфических включений: тельца Бабеша-Негри, Пашена и др.; риноцитоскопия.
II. ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД
Исследуемый
материал (фекалии, носоглоточные смывы,
секционный
материал и др.) обрабатываются для
подавления бактериальной
и грибковой микрофлоры антибиотиками,
центрифугируется,
фильтруется
ЗАРАЖАЮТ СЕРИЮ
Куриных
эмбрионов
Культур
клеток
Животных
ОЦЕНИВАЮТ ФЕНОМЕНЫ, УКАЗЫВАЮЩИЕ НА ПРИСУТСТВИЕ ВИРУСА:
РГА;
гибель;
отставание
в развитии;
изменение
оболочек.
ЦПД;
образование
бляшек;
цветная
проба Солка;
гемадсорбция;
интерференция;
РГА;
ИФ.
заболевание;
гибель;
морфологические
изменения в тканях.
ПАССАЖИ
ТИТРОВАНИЕ ВЫДЕЛЕННОГО ВИРУСА (выбор рабочей дозы)
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
ВЫДЕЛЕННОГО ВИРУСА
Используют
диагностические иммунные сыворотки в
РН, РТГА, РСК,
цветной пробе Солка, РТГАдс,
в
реакции подавления, бляшкообразования
и др.
Выделение, титрование и идентификация вируса проводятся с использованием одного и того же феномена.
III. СЕРОДИАГНОСТИКА
Использование парных сывороток; крови больного, выявление нарастания титра антител в реакциях: РСК; РТГА; РН; ИФА; РИА и др. Диагностическим считается 4-х кратное нарастание титра антител.
ОСНОВНЫЕ ЭТАПЫ ВИРУСОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА ДИАГНОСТИКИ.
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ВИРУСОВ
СТРОЕНИЕ КУРИНОГО ЭМБРИОНА.
Обозначьте на рисунке основные структурные элементы куриного эмбриона.
Феномены, позволяющие выявить вирус в курином эмбрионе.
1_________________________________________________________________
2_________________________________________________________________
3_________________________________________________________________
4_________________________________________________________________
ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ И СОЛЕВЫЕ РАСТВОРЫ ДЛЯ КУЛЬТУР КЛЕТОК
Тип и область применения Примеры |
Примеры |
СОЛЕВЫЕ РАСТВОРЫ - по набору солей качественно и количественно приближаются к составу жидкостей организма, создают буферность и изотоничность среды. Применяются для промывки тканей и клеток в процессе приготовления культур клеток и для приготовления питательных сред. |
|
СРЕДЫ: 1 РОСТОВЫЕ - Содержат питательные вещества, обеспечивающие активное размножение клеток, формирование монослоя на поверхности стекла. Отличаются сложным составом. Обязательно включают сыворотку или кровь животных. ПОДДЕРЖИВАЮЩИЕ - Обеспечивают переживание клеток в уже сформировавшемся монослое при размножении в клетках вирусов. Не содержат сыворотки крови животных. |
|
КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК.
1. ПЕРВИЧНО-ТРИПСИНИЗИРОВАННЫЕ - фибробласты куриного эмбриона (ФК), фибробласты эмбриона человека (ФЭЧ), клетки почки эмбриона человека и т.д.
2. ПОЛУПЕРЕВИВАЕМЫЕ - получают из легкого или мышечной ткани эмбриона человека.
3. ПЕРЕВИВАЕМЫЕ - HeLa (карцинома шейки матки), НЕр-2 (карцинома гортани человека), BHK-21 (почки хомячка) и др.
КОНТРОЛЬНЫЕ МЕРОПРИЯТИЯ ПРИ РАБОТЕ С КУЛЬТУРАМИ КЛЕТОК
1. Бактериологический контроль;
Контроль на вирусологическую стерильность;
Цитогенетический контроль (количественная и качественная характеристика хромосомного аппарата).
ФЕНОМЕНЫ, ПОЗВОЛЯЮЩИЕ ВЫЯВИТЬ ВИРУС В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК
