5.10. Клітинна інженерія. Використання культур клітин рослин для отримання лікарських засобів. Гібридомна технологія для одержання моноклональних антитіл. Напрямки використання моноклональних антитіл

Клітинна інженерія - метод конструювання клітин нового типу на основі їх культивування, гібридизації та реконструкції.

Клітинна інженерія пов’язана зі стерилізацією рослинних тканин та органів, їх ізолюванням і вирощуванням в умовах in vitro на спеціальних поживних середовищах. Клітинні суспензії широко застосовуються для отримання вторинних метаболітів, які мають практичне значення для фармацевтичної промисловості (антибіотики, алкалоїди, глікозиди, для промислового вирощування клітинної біомаси, з якої отримують білкові, вітамінні, ферментні препарати, Використовують з метою отримання лікарських речовин широко використовуються суспензійні культури клітин таких видів рослин, як женьшень, наперстянка шерстиста, раувольфія зміїна, беладона.

Гібридна клітина, що створюється в результаті – гібридома – поєднує в собі здатність тривалого розмноження в культурі, як ракова клітина, із здатністю біосинтезу моноклональних антитіл – моноатів, як лімфоцитарна клітина. Моноклональні антитіла однорідні за своїми властивостями, володіють однакової спорідненістю до антигену і зв’язуються з однією єдиною антигенною детермінантою.

Біотехнологія отримання моноклональних антитіл передбачає, з одного боку, гарантовану елімінацію (розчеплення, руйнування) пухлинних клітин, що не злилися, а також гібридів, що створилися в результаті злиття мієломних клітин. З іншого боку, серед отриманих гібдидом ідентифікують ті клони, що синтезують антитіла певної специфічності. Культивують клон гібридомних клітин, що був відібраний, або у вигляді асцитної пухлини, коли гібридомну клітинну суспензію вводять мишам усередину очеревини, або у вигляді клітинної культури, яку постійно пересаджують на свіже поживне середовище для подовження росту і розмноженню отриманих гібридомних клітин. Титр моноклональних антитіл, що містяться в асцитної рідині, на 2-3 порядки вище їх кількості, що знаходиться у культуральному середовищі. Однак, отримання антитіл в умовах клітинної культури має суттєві переваги, що обумовлені більш простим виділенням антитіл з культурального середовища і наступним їх очищенням, а також більш сприятливими умовами для контролю процесу біосинтезу.

Іммобілізовані моноклональні антитіла використовуються при очищенні таких біологічно активних речовин, як інсулін, інтерферон, соматотропін та інших, біосинтез яких заснований на використанні технології рекомбінантних ДНК. Пропонується можливість використання моноклональних антитіл для доставки ліків до клітини, що містить певну антигенну детермінанту. Цей підхід може збільшити ефективність лікарських препаратів не тільки проти інфекційних, але і проти ракових захворювань. На основі моноатів розроблені перспективні методи діагностики: метод імуноферментного аналізу (ІФА) і метод молекулярної гібридизації (ММГ).