33. Лактоны ненасыщенных полиоксикарбоновых кислот: аскорбиновая кислота. Способ получения, требования к качеству. Методы анализа.

Acidum ascorbinicum

Кислота аскорбиновая

(Y-Лактон 2,3-дегидро-L-гулоновой кислоты)

С₆Н₈О₆                                         М. в. 176,13

Синтез: исходным веществом является глюкоза

Описание. Белый кристаллический порошок без запаха, кислого вкуса.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте, практически нерастворим в эфире, бензоле и хлороформе.

Подлинность. 0,05 г препарата растворяют в 2 мл воды и приливают 0,5 млраствора нитрата серебра; выпадает темный осадок. (Реакцию см выше)

При добавлении к раствору препарата (1 : 1000) по каплям раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола синяя окраска последнего исчезает.

Количественное определение 0,5 г препарата в мерной колбе 50 мл,  К 10 мл приготовленного раствора прибавляют 0,5 мл 1 % раствора йодида калия, 2 мл раствора. крахмала и 1 мл 2% раствора соляной кислоты и титруют 0.1 н. раствором йодата калия до появления стойкого слабо синего окрашивания.

Метод:йодатометрия.Основан на восстановительной способности аск к-ты. Способ:прямое титрование. Титрант: йодат калия 0.1м. индикатор: крахмал(до слабо синего) или безиндикат(до слабо желтого). Ур-ния: 1) KIO₃ + 5KI + 6HCl = 3I₂ + 6KCl + 3H₂O 2)р-ция аск к-ты с I₂ (см выше) 3)от избыточной капли: KIO₃ + 5KI + 6HCl = 3I₂ + 6KCl + 3H₂O I₂+крахмал=синее

Хранение. В хорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия» света и воздуха.

34. Аминокислоты: кислота глутаминовая, метионин, цистеин. Общие и частные методы анализа фармакопейных препаратов. Метод формольного титрования (метод Серенсена).

Для испытания на подлинность АК используют общую цветную р-цию с нингидрином. В результате образующаяся соль имеет сине-фиолетовое окрашивание.

При взаимодействии с солями меди (II) АК образуют комплексные соединения темно-синего цвета:

2R-CH-COOH + CuSO4 = O NH2

| 2NaOH OC CH – R + Na2SO4 + 2H2O

NH2 Cu

R HC CO

NH2 O

Количественно АК можно определять методом кислотно-основного титрования.

Серосодержащие АК определяют йодометрическим методом.

2R – SH + I2 = R – S – S – R + 2HI

Глутаминовая кислота

COOH

|

CH – NH2

|

CH2 – CH2 – COOH

Белый кристаллический порошок, с едва ощутимым запахом. Р-ма в горячей воде.

- Глутаминовую кислоту идентифицируют с помощью ИК-спектров.

- Для испытания её подлинности и спектрофотометрического анализа используют аллоксантин.

- Для испытания подлинности глутаминовой кислоты используют цветную реакцию с резорцином в присутствии концентрированной серной кислоты. При нагревании с этими веществами глутаминовая кислота образует плав красного цвета, который при растворении в аммиаке приобретает красно-фиолетовое окрашивание с зеленой флуоресценцией.

- Количественно ее определяют алкалиметрическим методом. Титрант – 0,1М NaOH, индикатор – бромтимоловый синий.

COOH

|

CH – NH2 + NaOH =

|

CH2 – CH2 – COOH

COOH

|

CH – NH2 + H2O

|

CH2 – CH2 – COONa

Метионин

COOH

|

CH – NH2

|

CH2 – CH2 – S – CH3

Белый кристаллический порошок со сладковатым вкусом и слабым запахом меркаптосоединений. Умеренно р-м в воде.

- идентифицируют с помощью ИК-спектров

- для испытания её подлинности и спектрофотометрического анализа используют аллоксантин

- для обнаружения тиометильной группы метионин сплавляют с 30% р-ром NaOH. Происходит разрушение молекулы метионина с образованием производных меркаптана и сульфидов. Последние можно обнаружить реакцией с нитропруссидом натрия (красно-фиолет.окраш-е) или по запаху сероводорода или и меркаптана, образующихся после добавления серной кислоты:

- метионин с 10% р-ром ацетата натрия и 2,5% р-ром ацетата меди образует сиреневато-синий осадок.

- количественно метионин определяют к-о титрованием с индикатором тимолфталеином в водно-спиртовой среде.

Так же йодометрически, предварительно растворив в смеси р-ров монокалийфосфата и дикалийфосфата, в прис KI, а затем окисляют р-ро I2:

Цистеин

COOH

|

CH – NH2

|

CH2 – SH

Белы кристаллический порошок со слабым специфическим запахом. Р-м в воде.

- наличие тиогруппы в молекуле цистеина можно установить реакцией с нитропруссидом натрия (красно – фиолетовое окрашивание).

- тиогруппу подверждают реакцией с FeCl3 => синее быстро исчезающее окрашивание

С NaNO3 + CH3COOH => красное окрашивание

С селенистой кислотой выпадает красный осадок

С м-динитробензолом и NaOH => желтое окрашивание

С 10% р-ром ацетата натрия и 2,5% р-ром ацетата меди => черный осадок

Восстанавливает фосфорновольфрамовую кислоту => синее окр-е

Колич.опр-е: йодометрия в кислой среде с 0,1М р-ром I2.

Метод формольного титрования (по Серенсену):

Такое испытание рекомендовано ФС Для потверждени подлинности некоторых АК.

Эту р-цию используют для количественного определения АК.

Наличие аминогруппы затрудняет алкалиметрическое титрование, ослабляя кислотные св-ва АК. Аминогруппа связывается формальдегидом. Формольное титрование позволяет получить более точные результаты.

35. Определение азота в органических соединениях. Фармакопейный метод количественного определения кислоты глутаминовой. Свойства и реакции тиоэфирной группы. Фармакопейный метод количественного определения метионина.

Метод основан на окислении органических соединений, содержащих азот, концентрированной серной кислотой при нагревании в присутствии катализатора. При этом азот органического соединения переходит в сульфат аммония.

При действии концентрированного раствора щелочи на сульфат аммония выделяется аммиак, который поглощают определенным количеством титрованного раствора кислоты, а затем избыток кислоты титруют раствором щелочи. По количеству серной кислоты, вступившей в реакцию с аммиаком, определяют содержание азота в анализируемом веществе. По видоизмененной методике аммиак поглощают борной кислотой, а затем титруют соляной.

Метод достаточно прост и позволяет производить несколько параллельных определений, однако он не применим для определения азота в некоторых органических соединениях, содержащих азот в ядре (например, пиридин). В некоторых случаях при анализе методом Кьельдаля необходимо производить дополнительную обработку анализируемых веществ. Так, например, при окислении в серной кислоте нитросоединений (R-NO2), нитрозосоединений (R-NO), азосоединений (R-N = N-R), азоксисоединений, гидразосоединений (R-NH-NH-R) и некоторых других, кроме аммиака, образуются свободный азот и окислы азота, что приводит к неправильным результатам. Поэтому при анализе таких соединений их предварительно восстанавливают до аминов (-NH2), так как азот аминогруппы при анализе по методу Кьельдаля количественно превращается в аммиак.

Acidum glutaminicum - Кислота глютаминовая

 М. в. 147,13

Описание. Белый кристаллический порошок с едва ощутимым запа­хом, кислого вкуса.

Растворимость. Мало растворим в воде, растворим в горячей воде, практически нерастворим в 95% спирте и эфире.

Подлинность. 0,02 г препарата растворяют при нагревании в 1 мл свежепрокипяченной    воды,    прибавляют    1 мл   свежеприготовленного раствора нингидрина и нагревают;    появляется сине-фиолетовое окра­шивание.

Количественное определение.

1. Около 0,1 г препарата (точная навеска) помещают в колбу Кьель-даля емкостью 200 мл и далее поступают, как указано в статье «Опре­деление азота в органических соединениях» (стр. 762). Содержание об­щего азота в препарате должно быть не менее 9,4% и не более 9,55%.

2. Около 0,3 г препарата (точная навеска) помещают в коническую колбу емкостью 100 мл и при слабом нагревании растворяют в 50 мл свежепрокипяченной воды. К охлажденному раствору прибавляют 5 ка­пель спиртового раствора бромтимолового синего и титруют 0,1 н. рас­твором едкого натра до перехода желтой окраски в голубовато-зе­леную.

1 мл 0,1 н. раствора едкого натра соответствует 0,01471 г C5H9NO4, которой в препарате должно быть не менее 98,5%.

Methioninum Метионин

C₅H₁₁N0₂S                                                                                                   M. в. 149,21

Описание. Белый кристаллический порошок с характерным запахом и слегка сладковатым вкусом.

Растворимость. Трудно растворим в воде, практически нерастворим в органических растворителях, легко растворим в разведенных мине­ральных кислотах, растворах едких щелочей и аммиака, растворим в растворе карбоната натрия.

Подлинность. 0,05 г препарата растворяют в 1 мл воды при нагрева­нии, прибавляют 5-6 капель раствора нингидрина; появляется сине-фиолетовое окрашивание.

0,05 г препарата нагревают в пробирке с 5-6 каплями 30% раствора едкого натра до получения сплава. Пробирку закрывают кусочком филь­тровальной бумаги, которую смачивают 1-2 каплями свежеприготов­ленного 5 % раствора нитропруссида натрия; на фильтровальной бумаге появляется красно-фиолетовое окрашивание.

К охлажденному сплаву добавляют 5 мл воды и подкисляют разве­денной серной кислотой; появляется запах сероводорода и меркаптана.

Количественное определение. 1. Около 0,1 г препарата (точная навес­ка) помешают в колбу Кьельдаля емкостью 200 мл и далее поступают, как указано в статье «Определение азота в органических соединениях».

После просветления раствора сжигание продолжают в течение 4-4¹/₂ часов.

Содержание общего азота в препарате должно быть не менее 9,2% и не более 9.5%