- •Физические и физико-химические методы анализа
- •4. Температура плавления (офс 42-0034-07)
- •1. Капиллярный метод
- •2. Открытый капиллярный метод
- •3. Метод мгновенного плавления
- •4. Метод каплепадения
- •5. Температура затвердевания (офс 42-0035-07)
- •6. Температурные пределы перегонки и точка кипения (офс 42-0036-07)
- •Определение температурных пределов перегонки
- •Поправочный коэффициент для приведения к нормальному значению
- •Определение точки кипения
- •7. Плотность (офс 42-0037-07)
- •Метод 1
- •Метод 2
- •Метод 3
- •Метод 4
- •8. Вязкость (офс 42-0038-07)
- •Измерение вязкости на капиллярных вискозиметрах
- •Измерение вязкости на ротационных вискозиметрах
- •Измерение вязкости на вискозиметре с падающим шариком
- •Р ис. 8.4. Вискозиметр с падающим шариком
- •10. Комплексонометрическое титрование
- •Методики определения катионов
- •10. Рефрактометрия (офс 42-0040-07)
- •11. Метод сжигания в колбе с кислородом (офс 42-0089-08)
- •11. Поляриметрия (офс 42-0041-07)
- •11. Поляриметрия (офс 42-0041-07)
- •12.2. Спектрометрия в инфракрасной области
- •Идентификация с использованием стандартных образцов
- •Идентификация с использованием эталонных спектров
- •Минимумы пропускания и допустимые пределы для пленки полистирола
- •Примеси в газах
- •Химические методы анализа
- •18. Определение азота в органических соединениях методом къельдаля (офс 42-0052-07)
- •1. Метод Къельдаля
- •2. Микрометод Къельдаля
- •3. Метод Къельдаля (обратное титрование)
- •19. Определение воды (офс 42-0086-08)
- •1. Метод к. Фишера (полумикрометод)
- •2. Микроопределение воды (кулонометрический метод)
- •3. Определение воды методом дистилляции
- •1.2. Тонкослойная хроматография (офс 42-0094-09)
- •Основные приборы и материалы:
- •Хроматографические пластинки
- •Хроматографические камеры
- •Подвижные фазы (пф)
- •Нанесение проб
- •Способы элюирования
- •Восходящая хроматография
- •Горизонтальная хроматография
- •Способы обнаружения
- •Высокоэффективная тонкослойная хроматография (вэтсх)
- •1.3. Газовая хроматография (офс 42-0095-09)
- •Подвижная фаза
- •Ввод пробы
- •Колонки
- •Детекторы
- •Неподвижные фазы
- •Методика
- •1.4. Высокоэффективная жидкостная хроматография (офс 42-0096-09)
- •Насосная система
- •Смесители
- •Инжекторы
- •Хроматографическая колонка
- •Неподвижная фаза (сорбент)
- •Детекторы
- •Подвижная фаза
- •Система сбора и обработки данных
- •Перечень условий хроматографирования, подлежащих указанию
- •Ионообменная и ионная вэжх
- •Эксклюзионная вэжх
- •Ультраэффективная жидкостная хроматография
- •Общие фармакопейные статьи
- •Физические и физико-химические методы анализа
- •1. ХроматогрАфия (офс 42-0092-09)
- •Хроматограмма и хроматографичеcкие параметры
- •Интерпретация хроматографических данных
- •Расчет содержания определяемого компонента
- •20. Нитритометрия (офс 42-0054-07)
- •Биологические методы контроля
- •25. Аномальная токсичность (офс 42-0060-07) Основной тест
- •Тест для вакцин и сывороток
- •26. Пирогенность (офс 42-0061-07)
- •Материалы и оборудование
- •Проведение испытания
- •Учет результатов
- •27. Бактериальные эндотоксины (офс 42-0062-07)
- •Подтверждение заявленной чувствительности лал-реактива
- •28. Испытание на гистамин (офс 42-0063-07)
- •Подготовка изолированного органа
- •Приготовление разведений стандартного образца и испытуемого лекарственного средства1
- •1. Разведения стандартного образца
- •2. Разведение испытуемого препарата (ип)
- •Регистрирующая система
- •Проведение опыта
- •1. Адаптация изолированного отрезка подвздошной кишки морской свинки к субмаксимальной дозе гистамина
- •2. Испытание ип на гистамин
- •29. Испытание на депрессорные вещества (офс 42-0064-07)
- •Подготовка животного к опыту
- •Приготовление разведений стандартного образца испытуемого препарата (ип)
- •Проведение опыта
- •1. Условия проведения испытания
- •2. Определение антимикробного действия
- •2.1. Устранение антимикробного действия
- •3. Испытание на стерильность
- •3.1. Отбор образцов для анализа
- •3.3. Метод мембранной фильтрации
- •3.3.1. Пробоподготовка водных растворов
- •3.3.2. Пробоподготовка жидкостей, не смешивающихся с водой
- •3.3.3. Пробоподготовка лекарственных средств, растворимых в изопропилмиристате (ипм) (и12)
- •3.5. Валидация метода мембранной фильтрации при контроле лекарственных средств, обладающих антимикробным действием
- •3.6. Метод прямого посева
- •3.6.1. Пробоподготовка нефильтрующихся жидкостей
- •3.6.2. Пробоподготовка лекарственных средств, нерастворимых в изопропилмиристате (ипм) (и12)
- •3.6.3. Пробоподготовка твердых лекарственных форм
- •3.7. Условия инкубации посевов
- •3.8. Интерпретация результатов испытания
- •4. Питательные среды
- •4.1. Состав и приготовление питательных сред
- •4.2. Стерильность питательных сред
- •4.3. Определение ростовых свойств питательных сред
- •4.4. Хранение питательных сред
- •1. Определение антимикробного действия лекарственного средства
- •1.2. Работа с тест-микроорганизмами
- •1.3. Проведение испытания
- •1.4. Учет и интерпретация результатов
- •1.5. Способы устранения антимикробного действия лекарственных средств
- •2. Особенности отбора и подготовки образцов для анализа
- •2.1. Твердые лекарственные формы
- •2.2. Мягкие лекарственные формы
- •2.3. Жидкие лекарственные формы
- •2.4. Аэрозоли
- •2.5. Трансдермальные пластыри
- •2.6. Лекарственные растительные средства
- •3. Методы количественного определения аэробных бактерий и грибов
- •3.2. Количественное определение микроорганизмов
- •3.2.2. Метод мембранной фильтрации
- •3.2.3. Метод наиболее вероятных чисел (нвч)
- •4. Определение отдельных видов бактерий
- •4.1. Энтеробактерии и подобные им грамотрицательные микроорганизмы
- •4.2. Выявление Escherichia coli
- •4.3. Выявление бактерий рода Salmonella
- •4.4. Выявление Pseudomonas aeruginosa
- •4.5. Выявление Staphylococcus aureus
- •5. Биохимические тесты для идентификации микроорганизмов
- •5.1. Тест на наличие цитохромоксидазы
- •5.2. Тест на наличие индола
- •5.3. Тест на наличие коагулазы (реакция плазмокоагуляции)
- •6. Питательные среды. Определение ростовых и селективных свойств
- •6.1. Рекомендуемые растворы и питательные среды
- •6.2. Ростовые и селективные свойства питательных сред
- •Характеристика культуральных свойств тест-микроба
- •Тест-микроорганизмы и условия для биологического определения активности антибиотиков
- •Состав буферных растворов
- •Приложение 1
- •Приложение 2
- •3. Спектрометрия в ближней инфракрасной области (офс 42-0099-09)
- •Факторы, влияющие на результаты измерений
- •Идентификация
- •Количественный анализ
Основные приборы и материалы:
– пластинки с закрепленным слоем сорбента различных модификаций;
– хроматографические камеры;
– калиброванные капилляры и микрошприцы;
– устройства для нанесения на хроматограммы обнаруживающих реаген-тов (пульверизаторы для опрыскивания, камеры для погружения хро-матограмм в раствор и др.);
– вещества-стандарты, растворители, реагенты для обнаружения хрома-тографических зон;
ультрахемископы с УФ-лампами на 254 нм и 365 нм.
Используемая лампа должна удовлетворять следующему тесту.
Проверка работы лампы. На пластинку силикагель G наносят 5 мкл 0,04 % раствора натрия салицилата в спирте 96 % для ламп с максимумом излучения при 254 нм или 5 мкл 0,2 % раствора натрия салицилата в спирте 96 % для ламп с максимумом излучения при 365 нм в виде пятна диаметром около 5 мм; пятно должно светиться.
При проведении анализов расстояние между лампой и хроматографической пластинкой не должно превышать расстояния, используемого при проверке работы лампы.
Примечание. Используемый спирт должен быть свободен от флуоресцирующих веществ.
Хроматографические пластинки
Пластинка для ТСХ представляет собой твердую подложку (стеклянную, металлическую или полимерную) с нанесенным слоем сорбента. Толщина слоя сорбента от 0,1 до 0,25 мм для аналитического варианта и от 0,5 до 2,0 мм для препаративного.
Готовые хроматографические пластинки могут содержать флуоресцирующий индикатор для детектирования веществ, поглощающих в УФ-области спектра при 254 и 365 нм.
Размер частиц сорбента для аналитического варианта ТСХ составляет 5–20 мкм. Наряду с такими пластинками можно использовать высокоэффективные хроматографические пластинки, содержащие сорбент с частицами размером 5–7 мкм. Такие пластинки позволяют увеличить эффективность разделения и уменьшить предел обнаружения хроматографических зон.
выпускаются также пластинки с монолитными сорбентами и пластинки с концентрирующей зоной (двухфазовые пластинки). Последние используются в фармацевтическом анализе для разделения сложных и гетерогенных смесей (экстракты из растительного лекарственного сырья, растворы таблеток со вспомогательными компонентами, мягкие лекарственные формы, смеси, содержащие пигменты, суспензии, растворы сухих экстрактов и др.).
Хроматографические камеры
Используют хроматографические камеры для вертикального или горизонтального элюирования с герметичными крышками. Камеры для горизонтального элюирования снабжены также устройствами для подачи элюента на пластинку. Перед проведением анализа обычно внутренние стенки камеры обкладывают фильтровальной бумагой, смоченной подвижной фазой. Для вертикального элюирования применяют камеры с перегородкой в центре дна.
Использование камеры для горизонтального элюирования позволяет осуществлять одновременное элюирование с противоположных сторон пластинки, что увеличивает производительность анализа в два раза по сравнению с использованием камеры для вертикального элюирования. при этом также уменьшается расход подвижной фазы приблизительно в 10 раз. В горизонтальной камере движение подвижной фазы по пластинке происходит только за счет капиллярных сил, вклад гравитации при этом отсутствует, что повышает эффективность разделения по сравнению с камерами для вертикального элюирования.