Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего профессионального образования
Саратовский государственный аграрный университет
имени Н.И.Вавилова
Цитология, гистология и эмбриология
Методические указания по выполнению лабораторных работ
Специальность
111801.65 Ветеринария
Специализация
Ветеринарная фармация
Саратов 2014
Цитология, эмбриология: метод. указания по выполнению лабораторных работ для направлений подготовки 111801.65 Ветеринария / Сост.: В. В. Салаутин, И.В. Акчурина // ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ». – Саратов, 2014.
Методические указания по выполнению лабораторных работ составлены в соответствии с программой дисциплины и предназначены для студентов направлений подготовки 111801.65 Ветеринария, содержат краткое описание лабораторных методов изучения. Направлены на формирование у студентов навыков анализа гистологических препаратов, определения в них органов, тканей, клеток и их функционального состояния.
Материал ориентирован на вопросы профессиональной компетенции будущих ветеринарных специалистов.
Введение
Преподавание курса цитологии, гистологии, и эмбриологии традиционно сочетает в себе три основных направления: лекционный курс, лабораторные занятия и самостоятельная работа студентов.
Основной задачей курса «Цитология, эмбриология и гистология» является изучение микроскопического строения и развитие животного в онтогенезе.
Эти знания являются обязательными как при лечении животного, так и при направленном вмешательстве в жизнь организма в интересах повышения продуктивности.
Изучение микроскопического строения организма также совершенно необходимо и для понимания физиологии, патологической анатомии, патологической гистологии, патологической физиологии и клинических дисциплин. Студент ветеринарного факультета не познавший гистологию как биологическую науку, не может стать полноценным специалистом.
Целью методических указаний для лабораторных работ является оказание помощи студентам при изучение гистологических препаратов.
Тема: «Строение клетки»
Цель: Обучение студентов навыкам работы с гистопрепаратами и определению в них клеток и их структурных единиц. Изучение строения и функции клеток.
Клетка - это живая система, состоящая из цитоплазмы, цитолеммы и ядра, являющаяся основой строения, развития и жизнедеятельности всех животных и растительных организмов Форма клеток животных чрезвычайно разнообразна, определяется той функцией, которую выполняет клетка. Клетки бывают округлые, овальные, кубические, дисковидные, плоские, веретеновидные, звездчатые и т.д. Величина клеток так же различна.
Цитоплазма животных клеток состоит из гиалоплазмы, органелл и включений.
Гиалоплазма - жидкая, внутренняя среда клетки, состоящая из воды и растворенных или взвешенных веществ.
Органеллы - обязательные составные части клетки, выполняющие определенную функцию. Делятся на общие (содержатся во всех клетках) и специальные (в клетках выполняющих специальные функции). По строению различают мембранные и немембранные органеллы. К мембранным органеллам клетки относятся цитоплазматическая сеть, митохондрии, пластинчатый комплекс, лизосомы. К не мембранным органеллам относят клеточный центр, рибосомы, микротрубочки, микрофиламенты.
Клетки многоугольной формы. Состоят из цитолеммы, цитоплазмы и ядра.
1.Цитоплазма.
2.Ядро.
3.Цитолемма.
22
3
1
2
Рис. Строение клетки
Цитолемма - оболочка клетки, выполняющая следующие функции: разграничительную, защитную, транспортную, рецепторную.
1
4
5
2
3
Рис. Строение цитолеммы (схема)
Цитолемма - состоит из гликокаликса(1), мембраны(2) и субмембраны(3). Мембрана состоит из двух слоев липидов(2) и белков(5).Субмембрана состоит из микротрубочек и микрофиламентов. Гликокаликс состоит из гликолипидов, гликопротеидов, содержит рецепторы.
П
Рис. Строение
комплекса Гольджи
Комплекс Гольджи под электронным микроскопом - стопка уплощенных цистерн, по периферии которых локализуются пузырьки. В пузырьках накапливаются и преобразуются белки, жиры и углеводы, образуются лизосомы, упаковываются и выводятся синтезированные продукты.
Эндоплазматическая сеть- система канальцев, цистерн, мешочков образующих в клетки непрерывную сеть. Различают гранулярную и агранулярную эндоплазматическую сеть.
Рис. Строение эндоплазматической сети
Гранулярная сеть на наружной поверхности мембран имеет рибосомы, синтезирует белок на экспорт. Агранулярная – сеть канальцев без рибосом, синтезирует липиды, углеводы, обезвреживает яды, токсины, лекарственныевещества, депонирует Са.
Митохондрии - это округлые, палочковидные образования, состоящие из наружной и внутренней мембран, между которыми имеется щель. Внутренняя мембрана неровная, образует много складок (крист). Внутренняя среда митохондрии называется матриксом. Функции:
обеспечение клетки энергией в виде АТФ;
участие в биосинтезе стероидных гормонов;
депонирование кальция;
участие в синтезе нуклеиновых кислот
Рис. Строение митохондрии
Лизосомы – мембранные пузырьки, содержащие гидролитические ферменты.
Образуется лизосомы в комплексе Гольджи, участвуют в расщеплении веществ (внутриклеточное пищеварение и фагоцитоз, аутолиз).
Рибосома - немембранная органелла. Рибосома состоит из большой и малой субъединиц. Каждая субъединица состоит из белка и РНК. Синтезирует белок из аминокислот. Образуется в ядрышке.
Рис. Строение рибосомы
Клеточный центр (центросома) – главный центр организации микротрубочек и регулятор хода клеточного цикла.
Рис. Строение клеточного центра
В интерфазной клетке клеточный центр состоит из двух центриолей образующих диплосому. В диплосоме дочерние центриоли лежат под прямым углом друг к другу. Каждая центриоль состоит из расположенных по окружности 9 триплетов микротрубочек. Значение центриолей: являются центром организации миктротрубочек веретена деления; образование ресничек и жгутиков; обеспечение внутриклеточного передвижения.
Микрофиламенты - нити, состоящие из сократительных белков актина и миозина, являются цитоскелетом, участвуют во внутриклеточном движении (ток цитоплазмы, движение митохондрий)
Рис. Строение микрофиламентов
Реснички (цилии) представляют собой тонкий цилиндрический вырост цитоплазмы. Внутри выроста расположена осевая нить. Свободные клетки, имеющие реснички и жгутики, обладают способностью двигаться, а неподвижные клетки движением ресничек могут перемещать жидкость.
Включения - это непостоянные скопления различных веществ в цитоплазме клеток. Различают включения трофические (белок, жир, гликоген и витамины); пигментные (гемоглобин, меланин, липофусцин); секреторные и экскреторные (это продукты метаболизма, подлежащие удалению из клетки.
Методика выполнения работы: Рассмотреть предложенные гистопрепараты сначала под малым увеличением микроскопа, затем под большим.
Препарат Общая морфология клетки
Срез печени аксолотля
При малом увеличении, а затем при большом следует рассмотреть печеночные клетки, представляющие основную массу органа. Зарисовать несколько клеток и обозначить: цитолемму, цитоплазму, ядро.
Препарат Пластинчатый комплекс Гольджи
Нервные клетки спинномозгового узла кошек
Под малым увеличением на препарате найти нервные клетки, отличающиеся крупными размерами и слабо окрашенным ядром, в котором отчетливо выделяется лишь ядрышко.
Зона Гольджи представляет собой сеть изогнутых палочек, крючков.
При большом увеличении в цитоплазме нервных клеток данный органоид выявляется в виде густой сети, окружающей ядро со всех сторон, но непосредственно вокруг ядра остается зона цитоплазмы, свободной от сетчатого аппарата. Такой характер зоны Гольджи в виде густой плетенки, охватывающей полностью ядро, встречается только в нервных клетках.
Зарисовать одну клетку и обозначить:
Ядро.
Ядрышко.
Цитоплазма.
Пластинчатый комплекс
Препарат
Жировые включения в клетках печени
В клетках черные шарики разного диаметра, которые и представляют собой жировые включения. Зарисовать одну клетку и обозначить:
Цитолемма.
Ядро.
Цитоплазма.
Жировые включения.
Препарат
Включения гликогена в клетках печени.
Включения гликогена в клетках печени окрашены в красный цвет. Ядра клеток окрашены в синий цвет, цитоплазма бледно-розовая.
Включения гликогена
1
Рис. Включения гликогена
Оборудование:
Световой микроскоп.
Гистологические препараты
Мультимедийное оборудование