6. Лабораторная диагностика, характер исследуемого материала

Основная цель лабораторного диагноза - возможно быстрее подтвердить или исключить опасность заражения бешенством человека, укушенного (или ослюненного) животным. Поэтому лабораторному исследованию подвергается аутопсийный материал (мозг, слюнные железы), полученный от животного, нанесшего укус. Домашних животных без признаков бешенства помещают на 10 дней в карантин. Иногда у них исследуют слюну.

Лабораторный диагноз бешенства у человека, как правило, устанавливается посмертно. Исследуемые материалы: аммонов рог, моз­жечок, продолговатый мозг, слюнные железы и др.

Для прижизненного диагноза исследуют слюну, спинномозговую жидкость, слезную жидкость, сыворотку крови, биоптаты кожи, отпе­чатки роговицы. Применяют вирусоскопический, иммунофлюоресцентный, вирусологический и серологический методы лабораторной диагностики. Вся работа с возбудителем бешенства и инфицирован­ными животными проводится с соблюдением режима, установленно­го для возбудителей особо опасных инфекций.

Вирусоскопический (микроскопический) метод диагностики. При­меняется для постмортального исследования. Этот метод заключает­ся в выявлении в нейронах аммонова рога (где наблюдается наиболее высокая концентрация вируса), зрительных бугров, мозжечка и коры головного мозга, а также в нейронах спинного мозга и подчелюстных слюнных железах телец Бабеша-Негри: эти цитоплазматические вклю­чения, содержащие РНП вируса, имеют овальную или округлую фор­му и размеры 1,0-15 мкм. Их можно обнаружить уже во время последних 3-4 дней инкубационного периода. Используют окраску по Муромцеву, по Туревичу или по Манну.

Иммунофлюоресцентный метод. Применяется для прижизненной и посмертной диагностики бешенства: с помощью прямой иммунофлюоресценции возможно обнаружить антигены возбудителя и включе­ния Бабеша-Негри в отпечатках роговицы, биоптатах кожи больного, постмортально - в тканях мозга и подчелюстных желез. Этот метод за­нимает лишь несколько часов и является экспресс-методом. Для типирования вируса бешенства применяют моноклональные антитела.

7. Особенности вирусологического метода диагностики (культивирование, индикация, идентификация вируса)

Вирусологический метод. Вирус выделяют прижизненно из слю­ны, слезной и цереброспинальной жидкости путем интрацеребрального заражения новорожденных мышей. При бешенстве мыши-сосунки гибнут через 6-7 дней. Для идентификации ставят реакцию нейтрали­зации с антирабическим и нормальным иммуноглобулином на мышах. Серологический метод подтверждает бешенство в случае увели­чения титра антирабических антител в четыре и более раза в парных сыворотках или в серии проб сыворотки в ИФА или РИА.

8. Противовирусный иммунитет

Человек относительно устойчив к бешенству: при укусах бешеным волком заболевают около 50% не привитых людей, а бешеной собакой – около 30%. Постинфекционный иммунитет не изучен, так как больной обычно погибает. Введение людям, укушенным бешеным животным, инактивированной антирабической вакцины вызывает выработку антител, интерферонов и активацию клеточного иммунитета.