7.2.2. Определение гигроскопической воды

Принцип. Корм, приведенный в воздушно-сухое состояние, содержит некоторое количество связанной воды, называемой гиг­роскопической, которую определяют высушиванием навески при температуре 100—105 °С до постоянной массы.

Оборудование: аналитические весы с разновесами; сушиль­ный шкаф или термостат; бюксы с притертой крышкой пронуме­рованные; эксикатор; ложка для взятия кормов.

Ход определения. Бюксу с положенной на ребро крышкой высушивают в термостате в течение 30—40 мин при температуре 100—105 °С. Затем ее закрывают и ставят в эксикатор для охлажде­ния и взвешивают на аналитических весах. Насыпают в нее 2—3 г воздушно-сухого корма, закрывают и взвешивают. По разнице между взвешиваниями находят массу корма, взятую для анализа. За­тем бюксу с кормом (крышку положить на ребро) помещают в тер­мостат, нагретый до температуры 120—130 °С, и выдерживают там 3 ч при температуре 100—105 °С.

После этого бюксу закрывают крышкой, вынимают из термо­стата, ставят в эксикатор, охлаждают в течение 30—40 мин, взве­шивают. Количество испарившейся воды находят по разнице меж­ду массой бюксы и кормом после высушивания. Количество гиг­роскопической воды (Х|) в процентах рассчитывают по формуле

х_{ = (/и, • 100)//и,

где т₁ — масса воды, испарившейся из навески корма, г; 100 — коэффициент пересчета в проценты; т — масса корма в воздушно-сухом состоянии, г.

Общее содержание воды (у) в процентах рассчитывают на осно­вании результатов определения первоначальной и гигроскопиче­ской воды по формуле

у = х + х₁(100-х)-100,

где X] — процент гигроскопической воды; х — процент первоначальной воды; 100 — коэффициент пересчета в проценты.

Полученные результаты записывают по форме для определения в корме воды (гигроскопической и общего количества):

Показатель

Определение

первое | второе

Масса бюксы с навеской корма, г Масса пустой бюксы, г Масса навески корма, г

Масса бюксы с веществом после высушивания образца при 100-105 "С, г

Масса испарившейся воды, г

Содержание гигроскопической воды в воздушно-сухом веществе, % Общее содержание воды в исследуемом корме, % Содержание в корме сухого вещества, %

ГОСТ 13496.3—92 предусматривает ускоренные варианты опре­деления влажности кормов.

Определение общего количества воды в кормах путем высушива­ния в малогабаритном электросушильном шкафу при температуре 130 °С (экспресс-метод). В предварительно высушенные до посто­янной массы бюксы или металлические чашки берут две навески измельченного корма массой около 5 г каждая, взвешивают с точ­ностью до 0,01 г. Корм рассыпают тонким слоем по дну бюксы или чашки. Открытые бюксы и крышки от них помещают в электросу­шильных шкаф, предварительно подогретый до 130 ± 2 "С. Высу­шивание продолжается 40 мин, считая с момента фиксации темпе­ратуры. По истечении 40 мин бюксы вынимают из сушильного шкафа тигельными щипцами, быстро закрывают крышкой и ста­вят в эксикатор на 20—30 мин, охлаждают до комнатной темпера­туры. Эксикатор должен быть заправлен концентрированной сер­ной кислотой или прокаленным кальция хлоридом.

После охлаждения бюксы с кормом снова взвешивают и по раз­ности массы до и после высушивания определяют содержание влаги.

Определение общего содержания влаги в кормах влагомером Чи­жовой. Прибор состоит из блока высушивания, имеющего вид двух металлических плит, и блока автоматической регуляции температуры.

Подготовленные из фильтровальной бумаги пакеты закладыва­ют между нагревательными плитами прибора и выдерживают при температуре 160 + 2 °С в течение 3 мин. Затем пакет помещают на 3 мин в эксикатор для охлаждения и взвешивают. В подготовлен­ные таким образом пакеты берут две навески по 5 г каждая, взве­шивают с точностью до 0,01 г. Корм в пакете распределяют тонким слоем, обеспечивающим правильное обезвоживание, и помещают на 5 мин в предварительно нагретый до 160 + 2 "С прибор. Затем пакеты вынимают из прибора, охлаждают в эксикаторе и взвеши­вают на технических весах.

Содержание влаги (W) в процентах в исследуемом корме вычисляют по формуле

(Д1,-/я₂)- 100

где /И| — масса бюксы до высушивания, г; mj — масса бюксы с навеской после высушивания, г; 100 — коэффициент пересчета в проценты; т — масса пустой бюксы.

За окончательный результат принимают среднее арифметиче­ское двух определений. Допускаемые расхождения при параллель­ных определениях не должны превышать ±0,2 %.

Источник: 24.

7.2.3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ АЗОТА И СЫРОГО ПРОТЕИНА ПО КЪЕЛЬДАЛЮ (ГОСТ Р 51417-99 (ИСО 5983-97))

Принцип. Метод заключается в разрушении органического ве­щества серной кислотой в присутствии катализатора, высвобождении продукта реакции щелочью, в отгонке и титровании выделяющегося аммония, вычислении содержания азота, умножении результата на коэффициент 6,25 для определения содержания сырого протеина.

Реактивы: калия сульфат (х. ч., ч. д. а);

катализаторы: меди (II) оксид (СиО) или меди (II) сульфат 5-водный (C11SO4 • 5Н2О);

серная кислота молярной концентрации c(H₂S04) = 18 ммоль/дм³, p(H₂S0₄) = 1,84 г/см³;

парафиновая смола;

сахароза;

стандартные вещества: ацетанилид [точка плавления 114 °С, содержание азота (N) 103,6 г/кг] или триптофан [точка плавления 282 °С, содержание азота (N) 137,2 г/кг]. Перед использованием триптофан высушивают;

раствор натрия гидроксида массовой доли 33%;

поглощающие жидкости: серная кислота, стандарт-титр, моляр­ной концентрации с(Н2$04) = 0,05 ммоль/дм или c(H2S04) = = 0,125 моль/дм³; борная кислота массовой концентрации р(Н₃В0₃) = 40 г/дм³;

растворы для титрования: натрия гидроксид, стандарт-титр, мо­лярной концентрации c(NaOH) = 0,1 моль/дм или c(NaOH) = = 0,25 моль/дм ,

смешанный индикатор, интервал перехода при рН 4,4 до 5,8. Растворяют 2 г метилового красного и 1 г метиленового голубого в 1000 см³ 95%-ного этанола;

лакмусовая бумага;

вещества, предотвращающие выбрасывание жидкости (кусочки пемзы, стеклянные шарики диаметром от 5 до 7 мм или стружка карборунда, промытые кислотой хлористоводородной и дистилли­рованной водой и прокаленные).

Оборудование: обычная лабораторная аппаратура; установ­ки для сжигания, отгонки и титрования; весы аналитические или лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взве­шивания 200 г.

Пробы отбирают по ГОСТ 27262—87, а подготавливают по ГОСТ Р 21419-99.

Ход определения. Навеску воздушно-сухих проб массой от 0,5 до 2,0 г, а влажных и (или) неоднородных проб от 2,5 до 5,0 г переносят в колбу Кьельдаля соответствующей вместимости (обыч­но 800 см³). Добавляют 15 г калия сульфата и катализатора: 0,3 г меди II оксида или от 0,9 до 1,2 г 5-водной меди сульфата. Добав­ляют 25 см серной кислоты для первого грамма сухого вещества навески и от 6 до 12 см³ для каждого дополнительного грамма су­хого вещества. Тщательно перемешивают, чтобы полностью смо­чить навеску.

Колбу устанавливают наклонно под углом 30—40° к вертикали. Во время нагревания колба должна находиться в этом положении (под вытяжным шкафом!). Сначала ее нагревают умеренно, чтобы предотвратить поднятие пены до горла колбы или выбрасывания ее из колбы.

Примечания. 1. Желательно добавить в колбу антипенообразо-вывающие вещества, например парафиновую смо­лу. 2. Блок для сжигания является аппаратом, обеспечивающим равномерное нагревание разла­гаемой смеси.

Нагревают умеренно, время от времени поворачивая колбу до тех пор, пока не исчезнет пена. Затем нагревание усиливают, пока не установится равномерное кипение. Нагревание считается доста­точным, если кипящая серная кислота конденсируется в середине колбы Кьельдаля.

Следует избегать перегрева стенок колбы, находящихся в кон­такте с жидкостью. Если используют открытое пламя, такой пере­грев можно предотвратить путем установления колбы на лист ас­беста с отверстием, диаметр которого немного меньше диаметра колбы на уровне жидкости.

После осветления жидкости до светлого зелено-голубого цвета колбу нагревают еще в течение 2 ч. Оставляют остывать. Если ми-нерализат начинает застывать, добавляют немного дистиллирован­ной воды и перемешивают круговыми движениями. Осторожно добавляют в колбу 250—300 см* дистиллированной воды для пол­ного растворения сульфатов. При необходимости ускоряют рас­творение путем нагревания колбы в теплой воде. Перемешивают круговыми движениями и оставляют остывать. Затем добавляют немного вещества, предотвращающего выбрасывание при отгонке аммиака.

В приемную колбу отгонного аппарата приливают 25 см³ сер­ной кислоты, выбирая ее концентрацию в зависимости от ожидае­мого содержания азота в навеске. Добавляют от 100 до 150 см дис­тиллированной воды и несколько капель смешанного индикатора.

При отгонке с борной кислотой в приемную колбу переносят от 100 до 250 см³ борной кислоты и добавляют несколько капель сме­шанного индикатора. (Рекомендуется непрерывно титровать ам­моний во время отгонки, так как это позволяет уточнить конец дистилляции.)

Кончик трубки холодильника погружают на глубину не менее 1 см в жидкость, содержащуюся в приемной колбе. Медленно по стенке в отгонную колбу вводят 100 см³ раствора натрия гидроксида.

Колбу немедленно присоединяют к отгонному аппарату и на­гревают с такой интенсивностью, чтобы за 30 мин собрать около 150 см дистиллята. По истечении этого времени лакмусовой бу­магой проверяют рН дистиллята на кончике холодильника. Если реакция щелочная (бумага синеет), отгонку продолжают.

Кончик трубки холодильника сразу после окончания дистилля­ции вынимают из жидкости, чтобы предотвратить обратное заса­сывание.

Если в качестве поглощающей жидкости использовалась серная кислота, избыток серной кислоты в приемной колбе титруют рас­твором натрия гидроксида соответствующей концентрации c(NaOH) = 0,1 моль/дм³ или c(NaOH) = 0,25 моль/дм³ до конечной точки, определяемой на рН-метре или по изменению окраски раствора из зеленой в фиолетовую.

Если в качестве поглощающей жидкости использовалась борная кислота, аммоний титруют серной кислотой соответствующей кон­центрации c(H₂S0₄) = 0,05 моль/дм³ или c(H₂S0₄) = 0,125 моль/дм³ до конца титрования, определяемого при помощи рН-метра или по изменению окраски раствора из зеленой в фиолетовую.

Одновременно проводят холостое определение, используя вместо навески около 1 г сахарозы.

Контрольный анализ проводят путем определения содержания азота в ацетанилиде или триптофане, добавляя 1 г сахарозы. Выбор вещества для контрольного анализа зависит от того, насколько легко озоляются испытуемые пробы. Ацетанилид озоляется легко, в то время как триптофан сжигается труднее. Обнаружение азота ацетанилида должно составлять не менее 99,5 % и триптофана — не менее 99,0 %.

Вычисление массовой доли азота. Отгонка аммиака в серную кислоту. Если для поглощения аммиака при анализе испытуемой пробы и холостом определении взяты одинаковые объемы серной кислоты, массовую долю азота в испытуемой пробе вычисляют по формуле

^W™ т '

где Wfti — массовая доля азота, г/кг; У₀ — объем раствора натрия гидроксида, использованный для титрования при холостом определении, см³; Уу — объем раствора натрия гидроксида, использованный для титрования при анализе пробы, см³; С] — концентрация раствора натрия гидроксида, использованного для титрования, моль/дм³; М — молярная масса азота, г/моль (М = 14 г/моль); т — масса навески, г.

Отгонка аммиака в борную кислоту. Массовую долю азота в испытуемой пробе вычисляют по формуле

т

где ^— массовая доля азота, г/кг; У^ — объем серной кислоты, использованный для титрования при анализе пробы, см³; К₂ ^— объем серной кислоты, использованный для титрования при холостом определении, см ; — концентрация серной кислоты, использованной для титрования, моль/дм³; М — молярная масса азота, г/моль (М = 14 г/моль); т — масса навески, г.

Вычисление массовой доли сырого протеина. Массовую долю сырого протеина в испытуемой пробе вычисляют по формуле

W„ = 6,25 • W_N,

где W_n — массовая доля сырого протеина, г/кг; 6,25 — коэффициент пересчета в сырой протеин; — массовая доля азота в испытуемой пробе (W^i или Wfo). г/кг.

Результаты вычисляют до третьего знака и округляют до второго.

7.2.4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ СЫРОЙ КЛЕТЧАТКИ (ГОСТ 13496.2-91)

Принцип. Метод заключается в обработке навески испытуе­мого продукта смесью концентрированной азотной и 80%-ной ук­сусной кислот, промывании остатка водой, спиртом, эфиром и последующем высушивании.

Реактивы: кислота азотная по ГОСТ 4461—77 плотностью 1,4 г/см³;

кислота уксусная ледяная по ГОСТ 61—75; спирт этиловый по ГОСТ 5962—67 или спирт технический (гид­ролизный) по ГОСТ 17289—78; эфир этиловый;

фильтры бумажные диаметром 7,5—9,5 см или бумага фильтро­вальная по ГОСТ 1226—76.

Оборудование: весы аналитические; мельница лаборатор­ная марки ЛЗМ; шкаф сушильный; насос электровакуумный с раз­режением 13 Па или насос Камовского; плитка электрическая; ас­бест листовой; сито с отверстиями диаметром 1 мм; пластинка ме­таллическая с отверстиями диаметром 2—4 мм; холодильник воздушный обратный со шлифом (стеклянная трубка длиной 25—30 см с внутренним диаметром 5—10 мм); колба Бунзена с ту­бусом вместимостью 0,5—1 л; воронка Бюхнера № 4 или 5 по ГОСТ 9147—73; пинцет; промывалка; бюксы стеклянные по ГОСТ 7148—70 или алюминиевые диаметром 4—6 см и высотой 4—5 см с крышками; колбы конические плоскодонные со шлифом диа­метром 3 см вместимостью 100 мл по ГОСТ 10394—72.

Подготовка к испытанию:

приготовление 80%-ного раствора уксусной кислоты: 800 мл ле­дяной уксусной кислоты переносят в мерную колбу на 1000 мл и доводят дистиллированной водой до метки;

приготовление реактивной смеси: смешивают два объема азот­ной кислоты с девятью объемами 80%-ной уксусной кислоты;

подготовка установок для гидролиза и фильтрования. Установ­ку для гидролиза и фильтрования собирают в соответствии с ри­сунками 9 и 10;

навеску корма измельчают на мельнице и просеивают через си­то с отверстиями диаметром 1 мм.

Ход определения. Навеску массой 1—1,5 г для сочных и грубых кормов, 2 г для концентратов взвешивают с погрешностью не более 0,0002 г на аналитических весах и переносят в кониче­скую колбу на 100 мл. Осторожно по стенкам колбы приливают 40 мл реактивной смеси. К колбе присоединяют воздушный холо­дильник со шлифом и ставят на этернитовую или обычную элект­роплиту с обечайкой, накрытой металлической пластинкой с отвер­стиями. Все операции, связанные с гидролизом, фильтрованием и промыванием, проводят в вытяжном шкафу. Гидролиз выполняют при слабом равномерном кипячении в течение 30 мин, считая от на­

ч ала кипения реактивной смеси. При сильном кипении под колбу подкладывают слой асбеста.

По окончании гидролиза холодильник отделя­ют от колбы, содержимое колбы в горячем состо­янии фильтруют через бумажный фильтр, поме­щенный в воронку Бюхнера.

Бумажный фильтр с бюксой должны быть за­ранее просушены в сушильном шкафу при тем­пературе 160 "С в течение 10 мин и взвешены.

Установка для гидролиза (рис. 9) состоит из этернитовой электроплитки, колбы и воздушно­го холодильника. Вместо этернитовой электро­плитки допускается применять обычную с ци­линдрической обечайкой из жести. Сверху на­крывают металлической пластинкой с отверстия­ми. На пластинку помещают колбу с воздушным холодильником, обеспечивающим постоянство концентрации гидролиза.

Установка для фильтрования (рис. 10) состоит из колбы Бунзена, воронки Бюхнера и вакуум­ного насоса.

Колбу Бунзена закрывают просверленной ре­зиновой пробкой, в которую вставляют воронку Бюхнера. При помощи резиновой трубки колбу соединяют с вакуумным насосом. На дно ворон­ки Бюхнера помещают фильтр, который смачивают дистиллиро­ванной водой. Включают насос и, после того как фильтр хорошо присосется к воронке, приступают к фильтрованию.

Колбу промывают 3—4 раза горячей водой и смывные воды пе­реносят на фильтр. Для удаления остатка реакционной смеси оса­док на фильтре промывают горячей водой до исчезновения запаха уксусной кислоты. Затем осадок на фильтре промывают 1 мл спир­та и 10 мл эфира и выключают насос.

Фильтр с клетчаткой захватывают пинцетом, складывают вчет­веро, переносят во взвешенную бюксу, подсушивают на воздухе и

сушат в сушильном шкафу при температуре 160 °С в течение 15 мин. Высушенную бюксу с клетчаткой охлаждают в эксикаторе и взвеши­вают.

Содержание сырой клетчатки (х) в процентах вычисляют по формуле

х= -! i -100,

где mi — масса бюксы с клетчаткой и фильтром, г; m₂ ^— масса бюксы с фильтром, г; т — масса навески корма, г; 100 — коэффициент пересчета в проценты.

Содержание сырой клетчатки в пересчете на абсолютно сухое вещество (х\) в процентах вычисляют по формуле

*' = TooV¹⁰⁰'

где х — содержание сырой клетчатки, %; W — содержание влаги в испытуемом корме, %; 100 — коэффициент пересчета в проценты.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. До­пускаемые расхождения между результатами параллельных опре­делений не должны превышать ±0,15 абс.%, а между контрольны­ми анализами +0,25 абс.%.

Источник: 24.

7.2.5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СЫРОЙ ЗОЛЫ (ГОСТ 13979.6—69)

Принцип. Под общей сырой золой понимают прокаленный минеральный остаток, полученный в результате сжигания пробы корма. Под золой, нерастворимой в 10%-ной соляной кислоте, по­нимают остаток от общей золы, полученный после обработки ее этой кислотой при кипячении.

Метод определения содержания общей золы. Реактивы: 10%-ный раствор кислоты хлористоводородной по ГОСТ 3118—77; 0,1 н. раствор серебра нитрата по ГОСТ 1277—75.

Оборудование: печь муфельная; сушильный электрошкаф с терморегулятором; весы аналитические; электроплитки; измельчи­тель механический или ступка фарфоровая по ГОСТ 9147—73 или бронзовая; сито металлическое штампованное с отверстиями диа­метром 1 мм; механический рассев Журавлева; тигли фарфоровые; стаканы стеклянные низкие вместимостью 250 мл по ГОСТ 10394—772; цилиндры мерные по 50 мл по ГОСТ 1770—74; ворон­ки стеклянные для фильтрования диаметром 4—5 см по ГОСТ 8613—75; эксикатор по ГОСТ 6371—73; промывалки стеклянные.

Ход определения. Навеску воздушно-сухого и измельчен­ного корма около 1—5 г, взятую с точностью до 0,0002 г, сжигают до полного озоления в предварительно прокаленном и взвешенном на аналитических весах тигле. Сначала сжигание производят осто­рожно, избегая загорания корма. Для этого тигель помещают на электроплитку, покрытую асбестом. После прекращения выделе­ния паров и газов нагревание усиливают, асбест удаляют и продол­жают прокаливать до полного исчезновения частиц угля.

Прокаливание остатка заканчивают в муфельной печи. Темпе­ратура прокаливания не должна превышать температуру тем­но-красного каления (600—700 °С). После прокаливания в течение 2 ч тигель охлаждают в эксикаторе и взвешивают. Прокаливание повторяют до получения постоянной массы. Продолжительность повторного прокаливания 30 мин.

Содержание золы (х) в процентах вычисляют по формуле

т-т_г

где /Я| — масса тигля с золой, г; — масса пустого тигля, г; т — масса тигля с навеской до прокаливания, г; 100 — коэффициент пересчета в проценты.

Содержание золы в пересчете на абсолютно сухое вещество (ху) в процентах вычисляют по формуле

„ ₌ х- 100 ¹ 100- И^'

где х — содержание золы, %; W — содержание влаги в испытуемом корме, %; 100 — коэффициент пересчета в проценты.

За окончательный результат принимают среднее арифметиче­ское двух определений. Допускаемые расхождения при параллель­ных определениях не должны превышать ±0,05%.

Метод определения содержания золы, нерастворимой в 10%-ной соляной кислоте. Ход определения. Тигель с прокаленным ос­татком, полученным при определении общей золы, помещают на­клонно в стеклянный стакан на 250 мл и обливают 25 мл 10%-ной кислотой хлористоводородной. Содержимое стакана доводят до кипения и оставляют стоять в течение 5 мин. Тигель вынимают пинцетом и ополаскивают над стаканом дистиллированной водой из промывалки.

Содержимое стакана фильтруют через беззольный фильтр диа­метром 7—8 см, сливают жидкость тонкой струей по стеклянной па­лочке. Стакан и палочку промывают горячей водой, чтобы нераст-ворившаяся зола была вся без потерь перенесена на фильтр. Фильтр промывают горячей водой до тех пор, пока промывные воды не пе­рестанут давать муть с раствором серебра нитрата. Края фильтра за­гибают пинцетом внутрь, фильтр переносят в прокаленный и взве­шенный тигель и высушивают в сушильном шкафу. Сжигание и прокаливание до полного озоления проводят, как указано выше.

Содержание золы, нерастворимой в 10%-ной кислоте хлористо­водородной (х₂), в процентах вычисляют по формуле

где nt\ — масса тигля с нерастворимой золой, г; mi — масса пустого тигля, г; т — масса тигля с навеской до озоления, взятой для определения общей золы; г; 100 — коэффициент пересчета в проценты.

Содержание золы, нерастворимой в 10%-ной кислоте хлористо­водородной, в пересчете на абсолютно сухое вещество (*з) в про­центах вычисляют по формуле

х₂ ■ 100 100 - W'

где Xj — содержание золы, нерастворимой в 10%-ной кислоте хлористоводород­ной, %; W — содержание влаги в испытуемом корме, %; 100 — коэффициент пересчета в проценты.

За окончательный результат принимают среднее арифметиче­ское двух определений.

Допустимые расхождения при параллельных определениях не должны превышать ±0,05%.

7.2.6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ КАЛЬЦИЯ (ГОСТ 17258-71)

Принцип. Метод основан на осаждении кальция раствором аммония оксалата. Выделенный и отмытый осадок кальция окса-лата растворяют в серной кислоте. Освободившуюся при этом ща­велевую кислоту титруют раствором калия перманганата.

Реактивы: концентрированная кислота хлористоводородная по ГОСТ 3118-77;

2 н. раствор кислоты хлористоводородной по ГОСТ 3118—77;

10%-ный раствор аммиака водного по ГОСТ 3760—64;

1%-ный раствор аммиака водного по ГОСТ 3760—64;

1 н. раствор кислоты серной по ГОСТ 4204—77;

кислота серная по ГОСТ 4204—77, разведенная дистиллирован­ной водой в соотношении 1:8;

10%-ный раствор кислоты уксусной по ГОСТ 61—75;

10%-ный раствор кальция хлорида;

насыщенный раствор аммония оксалата по ГОСТ 5712—78; индикатор — метиловый красный по ГОСТ 5853—51; 0,1 н. раствор калия перманганата по ГОСТ 20490—75 (х. ч.): 3,165 г КМПО4 в 1000 см³ дистиллированной воды; кислота щавелевая по ГОСТ 2218—76 (х. ч.);

вода дистиллированная по ГОСТ 6702—72.

Оборудование: муфельная печь; водяная баня; центрифуга с частотой вращения 3000 мин тигли по ГОСТ 9147—73; колбы мерные по ГОСТ 1770 вместимостью 100 и 1000 мл; воронки диа­метром 5—7 см по ГОСТ 8613—75; пробирки центрифужные по ГОСТ 10515—75 вместимостью 1,0 и 25 мл; эксикатор по ГОСТ 6371—73; палочки стеклянные; бумага универсальная индикатор­ная; фильтры обеззоленные диаметром 5—7 см.

Ход определения. Навеску рыбной или мясокостной му­ки массой 1,0—1,5 г или 3,0—4,0 г сырья, или другого корма от­вешивают с точностью до 0,0001 г в предварительно прокален­ный до постоянной массы фарфоровый тигель и сжигают до пол­ного озоления. Сначала сжигают в муфельной печи при 200—300 "С, так как проба при нагревании при более высокой температуре может вспучиться. Окончательное озоление прово­дят в муфельной печи при температуре выше 550 "С (темно-крас­ное каление). По окончании озоления тигель помещают в экси­катор и взвешивают. Прокаливание повторяют до получения постоянной массы.

В охлажденный тигель с навеской золы вносят 5 см³ 2 н. рас­твора кислоты хлористоводородной и помещают в кипящую водя­ную баню. Содержимое тигля тщательно перемешивают стеклян­ной палочкой, нерастворившимся частицам дают осесть на дно. Раствор осторожно по палочке сливают через маленький гладкий фильтр в мерную колбу на 100 мл. Обработку осадка в тигле пов­торяют 5 см кислоты хлористоводородной еще раз. Тигель и во­ронку с фильтром 2—3 раза промывают горячей водой, подкислен­ной кислотой хлористоводородной (3 см³ концентрированной кис­лоты на 1 л воды). Вытяжку в колбе охлаждают до комнатной температуры и доводят до метки дистиллированной водой. Указан­ные операции проводят в вытяжном шкафу.

5 см³ вытяжки помещают в центрифужную пробирку и, добав­ляя в пробирку 8—10 капель 10%-ного раствора аммиака (по кап­лям), нейтрализуют кислоту хлористоводородную. Ориентировать­ся следует по изменению окраски прибавляемого в раствор индика­тора метилового красного или универсальной индикаторной бума­ги. Перемешивают содержимое до выпадения осадка, вращая пробирку между ладонями. Осадок полностью растворяют 10%-ным раствором уксусной кислоты (около 1 см³), прибавляя его по кап­лям. Полученный прозрачный раствор обрабатывают по каплям 1 см насыщенного раствора аммония оксалата. Содержимое про­бирки тщательно перемешивают и оставляют стоять не менее 2 ч для полного осаждения кальция оксалата. После чего центрифуги­руют (3000 мин ) в течение 15 мин. Жидкость над осадком сли­вают, не взмутив осадка. К осадку приливают 1,5—2,0 см³ 1%-ного раствора аммиака и после перемешивания снова центрифугируют в течение 10 мин. Прозрачную жидкость над осадком сливают. Оса­док кальция оксалата промывают 5 см³ 1%-ного раствора аммиака, содержимое пробирки центрифугируют, жидкость над осадком сли­вают.

Промывку повторяют трехкратно, после чего проверяют полно­ту удаления аммония оксалата путем добавления нескольких ка­пель 10%-ного раствора кальция хлорида к последней пробе про­мывной жидкости. В случае появления мути промывку осадка про­должают.

К промытому осадку добавляют 5 см³ 1 н. раствора серной кис­лоты и содержимое пробирки хорошо перемешивают стеклянной палочкой. Не вынимая палочки, пробирку помещают в кипящую водяную баню для растворения осадка. Полученный прозрачный раствор в горячем состоянии титруют 0,1 н. раствором калия пер­манганата до слабого розового окрашивания, не исчезающего в те­чение 1 мин.

Поправку к титру 0,1 н. раствора калия перманганата устанав­ливают следующим образом. Навеску щавелевой кислоты (6,3025 г), взятую с точностью до 0,0001 г, растворяют в 1 л дис­тиллированной воды. К 20 мл приготовленного 0,1 н. раствора при­ливают 3 см³ серной кислоты, разведенной дистиллированной во­дой (1 : 8), нагревают на водяной бане до 90 °С и медленно тит­руют раствором калия перманганата до появления розового окрашивания.

Коэффициент пересчета (К) точно по 0,1 н. раствору калия пер­манганата вычисляют по формуле

где а — количество 0,1 н. раствора щавелевой кислоты или натрия оксалата, см³; fl[ — количество раствора калия перманганата, израсходованного на титрование, см³.

Содержание кальция (х) в процентах вычисляют по формуле

_v= УК- 0,002 ■ 100 ■ 100

Л жг »

где V— количество 0,1 н. раствора калия перманганата, израсходованного на титрование, см³; К — коэффициент пересчета на точно по 0,1 н. раствору калия перманганата; 0,002 — количество кальция, соответствующее 1 см³ 0,1 н. раствора калия перманганата; 100 — объем солянокислой вытяжки, см³; V\ — объем солянокислой вытяжки из золы, взятой для определения кальция, мл; т — масса навески пробы, взятой для озоления, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметиче­ское двух параллельных определений. Расхождение между парал­лельными определениями не должно превышать 0,2%.

Источник: 24.

7.2.7. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ФОСФОРА (ГОСТ 26657-97)

Принцип. Сущность метода заключается в минерализации пробы способом сухого или мокрого озоления с образованием солей ортофосфорной кислоты и последующем фотометрическом опреде­лении фосфора в виде окрашенного в желтый цвет соединения — гетерополикислоты, образующейся в кислой среде в присутствии ванадат- и молибдатионов.

Реактивы: аммония молибдат (х. ч., ч. д. а.);

аммония ванадат мета (х. ч, ч. д. а);

кислота азотная (х. ч., ч. д. а);

вода дистиллированная;

кислота хлористоводородная (х. ч., ч. д. а) концентрированная и разбавленная дистиллированной водой 1:1; калия фосфат однозамещенный (х. ч.);

пероксид водорода (х. ч., ч. д. а), раствор с массовой дозой 30 % и раствор, разбавленный дистиллированной водой 1:9;

кальция хлорид технический, прокаленный при температуре 250—300 "С в течение 2 ч.

Оборудование: измельчитель проб растений ИПР-2; мель­ница лабораторная МРП-2; сушильный шкаф лабораторный или сушилка проб кормов СК-1; сито с отверстиями диаметром 1 мм; ножницы; весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г; мезгообразователь МЛ-1; весы лабо­раторные 3-го и 4-го классов точности с наибольшим пределом взвешивания 500 г; спектрофотометр или ФЭК с максимумом све-топропускания в области 440—465 нм; печь муфельная электричес­кая ПМ-8 или МР-64-0215 или других аналогичных типов; щипцы для тиглей муфельные; ступки фарфоровые с пестиком; тигли фар­форовые № 3 и 4; плитка электрическая с закрытой спиралью или другие аналогичных типов; эксикатор; пипетки градуированные или дозаторы той же вместимости с погрешностью дозирования не более 5 %; воронки стеклянные диаметром 36—56 мм; цилиндр мерный; стаканы или колбочки химические; колбы мерные; бюрет­ки; стеклянные или пластмассовые банки вместимостью 250 см³ с плотно закрывающимися пробками или крышками.

Примечание. Допускается использовать другую аппаратуру, мерную посуду, имеющую такие же или лучшие метрологические характеристики, а также реакти­вы по качеству не ниже отечественных.

Подготовка к испытаниям. Среднюю пробу сена, соло­мы, сенной резки и т. д. измельчают на отрезки длиной 1—3 см, корнеплоды разрезают на плоские ломтики толщиной до 0,8 см или измельчают на мезгообразователе. Измельченную пробу тща­тельно перемешивают и методом квартования выделяют среднюю пробу, масса которой после высушивания должна быть не менее 150 г. Высушивание проб проводят в сушильном шкафу при 60—65 °С до воздушно-сухого состояния. Затем пробу размалыва­ют на лабораторной мельнице и просеивают через сито. Остаток на сите измельчают ножницами или в ступке, добавляют к просеян­ной части и тщательно перемешивают.

Из средней пробы комбикормов, травяной муки, брикетов, гра­нул, жмыхов, шротов методом квартования выделяют не менее 150 г материала, размалывают без предварительного подсушива­ния и просеивают через сито. Остаток на сите растирают в ступке, добавляют к просеянной части и тщательно перемешивают.

Объединенную пробу муки животного происхождения массой не менее 1,5 кг тщательно перемешивают. Для химического анализа муки из объединенной пробы отбирают 0,5 кг, тщательно переме­шивают, высыпают на бумагу и разравнивают тонким слоем. Затем методом квартования выделяют пробу массой около 150 г, размалы­вают без предварительного подсушивания и просеивают через сито. Остаток на сите измельчают, добавляют к пробе и снова перемеши­вают. Пробы хранят в сухом месте в чистой стеклянной или пласт­массовой банке с плотно закрывающейся крышкой или пробкой.

Приготовление растворов:

раствор № 1. Один объем концентрированной азотной кислоты разводят двумя объемами дистиллированной воды, перемешивают;

раствор № 2. 2,5 г аммония ванадат растворяют в нагретой до кипения дистиллированной воде, охлаждают, добавляют 20 см³ концентрированной азотной кислоты и доводят объем раствора дистиллированной водой до 1000 см , перемешивают;

раствор № 3. 50 г аммония молибдат растворяют в горячей (свыше 75°С) воде, охлаждают и доводят объем раствора дистилли­рованной водой до 1000 см³, перемешивают;

раствор № 4 (окрашенная смесь). Равные объемы растворов № 1, 2, 3 последовательно смешивают и в случае появления мути отфильтровывают. Смесь хранят в темном месте при температуре 15—28 "С не более 6 мес;

стандартный раствор фосфата: 4,393 г однозамещенного калия фосфорнокислого, высушенного при температуре 100—105 °С в тече­ние 1 ч, растворяют в стакане или колбочке вместимостью 1000 см³, объем раствора доводят дистиллированной водой до метки, переме­шивают и хранят в стеклянной банке с притертой пробкой в течение одного года. В 1 см³ основного раствора содержится 1 мг фосфора;

растворы сравнения. В мерные колбы вместимостью 500 см из бюретки на 50 см приливают стандартный раствор фосфата в объ­емах, указанных в таблице 57. В каждую пробу добавляют 5 см разбавленного (1:1) раствора кислоты хлористоводородной, дово­дят объем дистиллированной водой до метки, перемешивают. Хра­нят не более 3 мес при температуре 15—28 °С в местах, защищен­ных от прямых солнечных лучей.

При приготовлении растворов сравнения при анализе кормов животного происхождения в мерные колбы вместимостью 500 см³ приливают основной раствор калия фосфата в объемах, указанных в таблице 57. В каждую колбу добавляют 5 см концентрированной

N° колбы