Питательные среды. Методы выделения чистых культур бактерий

Цель:

– знать питательные среды, методы выделе­ния чистых культур

аэробных и анаэробных бактерий, методы стерилизации;

– уметь сделать посев для изолирова­ния колоний аэробных и для

культивирования анаэробных микроорганизмов.

Изучение разнообразных свойств бактерий может производиться в лаборатории только в условиях, когда микро­бам обеспечена возможность размножаться и проявлять свою жизнедеятельность. Одним из главных условий культивирования является применение соответствующих питательных сред. Питательные среды готовят из есте­ственных продуктов животного и растительного происхождения (мяса, молока, яиц, сыворотки крови, овощей, дрожжей, казеина и др.), из искусственно полученных из этих продуктов веществ (пептона, аминопептида, дрожжевого экстракта, кукуруз­ного экстракта и др.), или из химически чистых соединений с точно известным составом (аминокислот, углеводов, витаминов, минеральных солей).

В микробиологической промышленности существует много самых разнообразных питательных сред. В зависимости от их свойств, состава и назначения питательные среды делятся на несколько групп:

По происхождению:

• естественные (молоко, желатин, картофель);

• искусственные (приготовлены из специально подо­бранных природных компонентов, например: мясопептонные среды содержат мясной перевар, пептон и определенные концентрации солей);

• синтетические (состоят из химических солей, амино­кислот, углеводов, витаминов и т.д.).

По консистенции:

(в зависимости от процентного содержа­ния агар-агара)	твердые (3-5% агар-агара);
	полужидкие (0,3%, 0,5% и 0,7% агар-агара);
	жидкие (0 % агар-агара).

По составу:

• простые (мясопептонный агар – МПА, мясопептонный бульон – МПБ, пептонная вода);

• сложные (мясопептонная основа и различные добавки, напри­мер: кровяной агар, сывороточный агар, полужидкие углеводные среды Гисса, сахарный бульон и др.).

По назначению:

• общего назначения – для культивирования боль­шинства бактерий (МПА, МПБ, кровяной агар и др.);

• специального назначения – для особых целей.

Среди них выделяют элективные и дифференциально-диагностические среды:

- желточно-солевой агар для стафилококков,

- щелочная пептонная вода для холерного вибриона;

- дифференциально-диагностические среды для энтеробактерий –

среды Эндо, Левина, Плоскирева.

Требования к питательным средам

1. Питательность (содержание всех необходимых питательных веществ).

2. Изотоничность (обеспечивает осмотическое равновесие меж­ду клеткой и средой, облегчает процессы осмоса и диффузии питательных веществ и продуктов метаболизма).

3. Определенная рН (обеспечивает функционирование фермен­тов бактерий).

4. Определенный Н-потенциал (обеспечивает окислительно-восстановитель­ные процессы в клетке бактерий; разный для аэробов и анаэробов).

5. Стерильность (позволяет правильно учесть результаты).

6. Прозрачность (позволяет увидеть рост бактерий).