- •Волгоградский государственный медицинский университет
- •Волгоград, 2013
- •Учёт успеваемости и посещаемости
- •Тематический план проведения занятий по разделу «Общая микробиология»
- •Часть I морфология микроорганизмов
- •Устройство и требования, предъявляемые к работе в микробиологической лаборатории
- •Устройство микробиологической лаборатории
- •Уровень опасности работ с микробами и категории лабораторий
- •Основные помещения микробиологической лаборатории
- •Требования к работе с микроорганизмами I и IV групп патогенности
- •Требования, предъявляемые к работе в бактериологической лаборатории
- •Правила работы в микробиологической лаборатории
- •Аппаратура для выращивания микроорганизмов, стерилизации и других микробиологических исследований
- •Микроскопы и методы микроскопии
- •Контрольные вопросы
- •Морфология и структура бактерий Программ трех занятий
- •С пособы окраски
- •Позитивные
- •Самостоятельная работа студента
- •Методика окраски по Граму
- •Методика окраски по Нейссеру
- •Метод Бурри-Гинса (выявление капсулы)
- •Методика окраски по Бурри-Гинсу
- •На практическом занятии
- •Контрольные вопросы
- •Часть II физиология микроорганизмов
- •Питательные среды. Методы выделения чистых культур бактерий
- •Требования к питательным средам
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии
- •Методические указания Работа 1
- •Работа 3
- •Бактериологический метод исследования
- •Техника посева и пересева
- •Изучение бактериальных колоний
- •Выделение чистой культуры бактерий аэробов
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии
- •Методы культивирования анаэробных микробов
- •1. Физические методы:
- •2. Химические методы:
- •3. Биологические методы:
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии по теме: «Бактериологический анализ, культивирование анаэробов»
- •Ферментативные свойства бактерий
- •Среды для определения сахаролитических свойств
- •Cамостоятельная работа студента на практическом занятии
- •Контрольные вопросы
- •Основные противоэпидемические мероприятия в лаборатории Стерилизация
- •Физические методы
- •Механические методы
- •Химические методы
- •Контроль стерилизации
- •Биологический контроль
- •Внутренний контроль качества микробиологических исследований
- •Контроль температурных режимов инкубации
- •Контроль качества стерилизации и дезинфекции
- •Химический контроль
- •Термический контроль
- •Контроль качества дистиллированной воды
- •Центральное стерилизационное отделение
- •Классификация антисептиков по механизму действия
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии
- •Демонстрация опыта действия солнечного света на бактерии (опыт Бухнера).
- •Оформление альбома:
- •Санитарная микробиология воды Общие вопросы
- •Санитарно-микробиологическое исследование воды
- •Санитарно-гигиенические показатели и нормативы качества питьевой воды
- •Санитарная микробиология воздуха Общие вопросы
- •Санитарная микробиология предметов обихода и медицинского оборудования Общие вопросы
- •Санитарно-микробиологическое исследование
- •Посевы на стерильность хирургического инструмента
- •Бактериологический контроль эффективности обработки кожи операционного поля и рук хирургов
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии
- •Микрофлора тела человека
- •Микрофлора кожи
- •Микрофлора уха
- •Микрофлора конъюнктивы
- •Микрофлора дыхательных путей
- •Микрофлора полости рта
- •Микрофлора желудочно-кишечного тракта
- •Микрофлора мочеполовой системы
- •Значение нормальной микрофлоры
- •Понятие «дисбактериоз». Условия развития
- •Вопросы для обсуждения
- •Микрофлора кожи Посев волоса и «отпечатков» с губ и пальцев рук на мпа
- •Микрофлора носа и зева Посев отделяемого из носа на кровяной агар
- •Микрофлора кишечника Посев кала на среду Эндо
- •Миклофлора зубного налета
- •Оформление протокола
- •Тема: «Генетика бактерий»
- •Механизмы рекомбинаций
- •Самостоятельная работа студентов на практическом занятии
- •Опыт «Конъюгация 2»: передача плазмидного признака рези-стентности к тетрациклину (r Тc).
- •Опыт по определению колициногенности.
- •Диагностика фенилкетонурии.
- •Инфекция
- •Самостоятельная работа студентов на практическом занятии
- •Контрольные вопросы
- •Классификация химиотерапевтических препаратов
- •Механизмы антимикробного действия
- •Основные осложнения при химиотерапии
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии
- •Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом стандартных индикаторных дисков
- •Микрофлора человека и санитарная бактериология
- •Список литературы
Контрольные вопросы
Перечислить основные этапы развития микробиологии и фамилии ученых, работы которых определили появление новых этапов.
Перечислите основные открытия Л. Пастера, Р. Коха, И.И. Мечникова.
Назовите отрасли микробиологии.
Основные разделы медицинской микробиологии.
Классификационные категории в микробиологии. Что такое бинарная номенклатура?
Как пишутся названия микробов (приведите примеры), группы микроорганизмов?
Основные формы бактерий.
Как называются кокки, располагающиеся попарно? Цепочкой? Гроздьями? По четыре? Пакетами?
Как называются палочки, образующие споры? Не образующие споры?
Как называются извитые формы с одним завитком спирали? С несколькими завитками спирали?
Каким будет общее увеличение микроскопа: окуляр ×10, объектив 8? Окуляр ×10, объектив 40? Окуляр ×10, объектив 90?
Чему равна разрешающая способность микроскопа с иммерсионным объективом? Какова роль иммерсионного масла?
Перечислите структурные элементы бактериальной клетки: постоянные и непостоянные.
Оболочка бактерий, ее биологическая роль.
Какую форму принимает цитоплазма, искусственно лишенная оболочки?
Способ выявления оболочки.
Капсула, ее биологическая роль у патогенных бактерий.
Способ выявления капсулы в препаратах.
Перечислите патогенные бактерии, образующие капсулу.
Перечислите спорообразующие палочки.
Биологическая роль спор.
Процесс образования споры, условия и время, необходимые для этого процесса.
Процесс прорастания вегетативных форм бактерий из спор.
Как могут располагаться споры в теле бактерий?
Способ выявления спор в препаратах.
Включения бактерий, их биологическая роль, способ выявления.
Биологическая роль жгутиков у бактерий. Как можно увидеть жгутики у бактерий?
Часть II физиология микроорганизмов
Тема: «Питание и дыхание бактерий. Питательные среды.
Выделение чистых культур аэробов и анаэробов. Бактериологический метод исследования»
Цель:
– на основании знания особенностей физиологии микроорганизмов
научиться проводить бактериологический метод исследования.
Задачи:
– освоить механизм питания и дыхания бактерий;
– научиться методам культивирования аэробов и анаэробов;
– овладеть основными методами микробиологической техники;
– уметь выбрать питательную среду для культивирования микробов
(аэробов и анаэробов);
– овладеть методами выделения чистых культур и их
идентификации.
Изучение физиологических и биохимических свойств микробов требует специальных методик исследования, в соответствии с чем в данном разделе изложены основы микробиологической техники, методы выделения чистых культур, идентификации, методы приготовления питательных сред, методы стерилизации и т.д.
Знание бактериологических методов исследования патологического материала служит основой для изучения всех последующих разделов микробиологической диагностики. Прежде всего, необходимо выделить чистую культуру бактерий. Для ее получения необходимо иметь питательные среды и владеть методами выделения чистой культуры.
Для культивирования микроорганизмов в баклабораториях используются искусственные питательные среды.
По химическому составу и характеру биополимеров (белки, полисахариды, нуклеиновые кислоты, липиды) прокариотические клетки не отличаются от эукариотических. Основными химическими компонентами бактериальной клетки являются органогены (кислород, водород, углерод, азот, фосфор). Процесс, в ходе которого бактериальная клетка получает из окружающей среды компоненты, необходимые для построения ее биополимеров, называется питанием.
Метаболизм бактерий представляет собой совокупность двух противоположных, но взаимосвязанных процессов – катаболизма и анаболизма. Катаболизм (диссимиляция) – распад веществ в процессе ферментативных реакций и накопление выделяемой при этом энергии в молекулах АТФ. Анаболизм (ассимиляция) – синтез веществ с затратой энергии. Метаболизм бактерий исследуют с помощью биохимических и физико-химических методов в процессе культивирования бактерий в определенных условиях на питательных средах, содержащих те или иные субстраты.
К особенностям метаболизма у бактерий относятся:
преобладание процессов диссимиляции над процессами ассимиляции;
высокая интенсивность процессов метаболизма, обусловленная тем, что соотношение поверхности к единице массы больше, чем у многоклеточных;
очень широкий субстратный спектр потребляемых бактериями веществ – от углекислого газа, азота, нитритов, нитратов до органических соединений, включая антропогенные вещества – загрязнители окружающей среды;
очень широкий набор ферментов – это также способствует высокой интенсивности метаболических процессов.
Ферменты бактерий делятся на следующие группы: экзоферменты, выделяемые во внешнюю среду и действующие на субстрат вне клетки (например, протеазы, полисахаридазы, олигосахаридазы), и эндоферменты, действующие на субстраты внутри клетки (например, ферменты, расщепляющие аминокислоты, моносахары, синтетазы).
Синтез ферментов генетически детерминирован, но его регуляция идет за счет прямой и обратной связи, т. е. для одних ферментов репрессируется, а для других инициируется субстратом. Ферменты, синтез которых зависит от наличия соответствующего субстрата в среде (например, β-галактозидаза, β-лактамаза) называются индуцибельными. Другая группа ферментов, синтез которых не зависит от наличия субстрата в среде, называется конститутивными. Они в определенных концентрациях всегда содержатся в микробных клетках.
Для диагностики, изучения и в биотехнологических целях микроорганизмы культивируют на искусственных питательных средах.
