§ 4. Качественное определение

Методики качественных реакций. 1. Реакция со щелочью. 0,2 г измельченного растительного материала кипятят в течение 2 мин с 5 мл 10%-ного NaOH. После остывания смесь разбавляют 5 мл воды и фильтруют. 3 мл фильтрата помещают в пробирку, добавляют 3 мл 10%-ной НС1 и 10 мл бензола. Осторожно перемешивают и после расслоения жидкости сливают бензольный слой, фильтруя его через небольшой комочек ваты. Фильтрат встряхивают с 3 мл 10%-ного раствора аммиака.

При наличии антраценпроизводных аммиачный слой принимает вишнево-красное (1,8-диоксиантрахиноны), пурпурное (1,4-диокси- антрахиноны) или фиолетовое (1,2-диоксиантрахиноны) окрашива­ние.

Сущность реакции в следующем: при кипячении растительного материала со щелочью происходит гидролиз-антрагликозидов с об­разованием свободных агликонов. Одновременно антрон- и антра- нолпроизводные окисляются до антрахинонов. Образовавшиеся оксиантрахиноны за счет фенольных гидроксилов дают феноляты, растворимые в воде. При подкислении водно-щелочного извлечения диссоциация фенольных гидроксилов подавляется и соединения становятся липофильными, в результате чего при встряхивании с бензолом они из водного слоя переходят в бензол; бензольный слой при этом принимает желтую окраску оксиантрахинонов. При встряхивании бензольного слоя с раствором аммиака вновь проис­ходит образование фенолятов антрахинонов и они переходят в ам- "миачный слой. Феноляты оксиантрахинонов имеют яркий вишнево- красный, пурпурный или фиолетовый цвет в зависимости от поло­жения оксигрупп.

2. Сублимация антраценпроизводных. На дно сухой пробирки помещают 0,2 г измельченного растительного материала и осто­рожно нагревают, держа пробирку почти горизонтально. Темпе­ратура сублимации 210 °С, время сублимации 10 мин.

Сублимат конденсируется на холодных участках пробирки в виде желтых капель или желтых игольчатых кристаллов. После остывания пробирки к сублимату прибавляют 1 каплю 5%-ного NaOH в этиловом спирте; появляется яркое красное или фиолето­вое окрашивание в зависимости от состава антраценпроизводных (образование фенолятов). Сущность реакции: содержащиеся в ра­стительном материале антрагликозиды при высокой температуре расщепляются с образованием свободных агликонов; одновременно производные антрона и антранола окисляются до антрахинонов, которые возгоняются.

Таблица 1

		Хроматограмма после проявления КОН
№ п/п	№			Название вещества
рисунков	пятна		флуоресценция в
		цвет пятна в
		видимом свете	Уф свете
Рис. 14	1	Бесцветный	Светло-зеленая
	2	>	Слабо-фиолетовая
	3	»	Ярко-фиолетовая
	4	Слабо-желтый	Слабо-оранжевая
	5	Красный	Оранжево-красная
	6	Светло-желтый	Светло-голубая
	7	Слабо-желтый	Ячко-фиолетовая
	8	Темно-желтый	Те шо-коричневая
	9	Серо-коричневый	Темно-серая
	10	Красный	Фиолетово-красная	Франгулаэмодин
Рис. 15	1 о	Бесцветный	Слабо-оранжевая
	£ 3	Слабо-желтый	Слабо-темно-фиоле­
			товая
	4	»	Светло-зеленая
	5	Слабо-красный	Фиолетовая
	6	Красный	Оранжево-красная	Антрагликозиды
	7	Слабо-красный	Фиолетово-красная	»
	8	Слабо-желтый	Слабо-оранжевая
	9	Темно-желтый	Темно-коричневая
	10	Красный	Фиолетово-красная	Франгулаэмодин
Рис. 16	1	Розоватый	Оранжево-красная
	2	Слегка сероватый	Светло-зеленая
	ЗГ	Красный	Ярко-оранжевая	ГлюкофранТ'улин
	4	>	Красно-оранжевая
	5	Бесцветный	Светло-зеленая
	6	Розовый	Розовая
	7	Оранжевый	Оранжево-красная	Франгулин
	8	Красный	Фиолетово-красная	Франгулаэмодин
Рис. 17	1 О	Ярко-желтый	Темно-желтая
	Z 3	> Бесцветный	> Светло-зеленая
	4	Слабо-желтый	Красная
	5	»	Розовая
	6	Слабо-оранжевый	Оранжево-красная	Франгулин
	7	Слабо-желтый	Желтая
	8	Красный	Фиолетово-красная	Франгулаэмодин
	9	Слабо-зеленый	Розовая	Хлорофилл
Рис. 18	1	Оранжевый	Оранжевая	Луцидинпримве-
				розид
	2	Красный	Огненно-красная	Руберитриновая ки­
				слота

№ п/п рисунков	№ * пятна	Хроматограмма после проявления КОН		Название вещества
		цвет пятна в видимом свете	флуоресценция в Уф свете
		Слабо-желтый > Бесцветный > > Пурпурно-фиолето- вый	Слабо-оранжевая » Слабо-розовая » Слабо-фиолетовая Темно-коричневая	Ализарин
Рис. 19	1 2 9	Бесцветный Слабо-желтый Ярко-желтый Слабо-оранжевый Очень слабо-оран­жевый Бесцветный Слабо-фиолетово- красный Зеленовато-серый Зеленый	Фиолетовая Желто-зеленая > Красная Розовая Голубая Красно-фиолетовая Желтая Красная	Рейн Хлорофилл

Методики хроматографического определения. При анализе ле­карственного растительного сырья, содержащего антраценпроиз­водные, используется хроматография на бумаге и в тонком слое сорбента.

При исследовании состава антрагликозидов готовят водные извлечения; при анализе состава агликонов сырье экстраги­руют бензолом, этиловым или метиловым спиртом, которые при нагревании более или менее удовлетворительно экстрагируют как свободные антраценпроизводные, так и их гликозидные формы.

0,3 г измельченного растительного материала нагревают с 3 мл этилового спирта в течение 5 мин, доводя до слабого кипения. После остывания фильтруют. 0,1 мл фильтрата наносят на линию старта и хроматографируют в системе этилацетат — метиловый спирт — вода (100 : 17 : 13) на пластинках «Силуфол». Время хроматогра- фирования 30—40 мин. Хроматограмму высушивают на воздухе, обрабатывают 5%-ным NaOH в этиловом спирте и рассматривают при дневном свете и УФ свете до и после обработки. Одновременно хроматографируют стандарт «свидетель», нанося его раствор рядом с исследуемым извлечением. По величине R_f, характеру окраски и флуоресценции пятен идентифицируют антраценпроизводные ис­следуемого сырья (рис. 14—19). В табл. 1 даны пояснения к рисун­кам.

I ! 0 |о			.Оз
ЮООО 0 blOo N lo 1	>*>	О О' C4j	• ^

w ГО

S а. к о с D

ins

U. W Ч/-Ч

pj 3J je Л X

5 МЭ SB 5 я Я О я v £ з S а. е cr ST о

ft, Я S

* я

о. 3 Ч'О О) я

^ Л ш to от н

S <s ч §

Я « о во 15

S я s5 s&il

^ * й ч о I Т

g* И

- я х £

S3 SS.

с! S 5 I go

У ПЗ >=£ lot,

³¹ Си О _ 4 о

а Ее

1 I 0 10			0
|о о ( Оо «ч	0 (О	0	ООО vj- СЧ1	о • ^

2 я х S3 S Я

Я а. о О, l. а

О

О « О В о я

Н Я Я я ™ д

Я О О щ ° н

S о.* J g ¥

ос g я Я

а. я Jos

х Щ _, " as «

й К я 2

_ Я Ч * S

S о. аЗ О „кйй

« я «о gS^s

3 « Зх !»?«

о 3" СЗ

«м _м » &

IS.¹

о'о'оооооо оо

|CD0 оо оо О оо

я« I в

= Зю 2

Ф я-ч сх г Я в «Я о t; я .. ^

а о я о «*<*

Я Л C{g

Ч О щ щ ° S | S

о a 2 ч

ё а 2<Ч 5>

в

th%

| а | я

"С

о л о

S- Я X «Од S Q.4 о с о

О. X

х Щ и ЕГ э ,

S Ё з |

«И

g 5 Й » S 2 Й 5 С я и> 5

leg g&g О* Я 2 2„&

И я я ,

2 b „8 ¹ 3

Isg-a

я = S

² 3 3 8-8

• s я. 7 £ я ^м 3 ¹ й-я

Q. о __ О я

Q. и я "С и 8

J^O, <*> N <0 ^ ^ ^^

N? п/п >исунков	№ пятна	Хроматограмма после проявления КОН		Название вещества
		цвет пятна в видимом свете	флуоресценция в Уф свете
		Слабо-желтый » Бесцветный » » Пурпурно-фиолето­вый	Слабо-оранжевая > Слабо-розовая » Слабо-фиолетовая Темно-коричневая	Ализарин
Рис. 19	1 2 9	Бесцветный Слабо-желтый Ярко-желтый Слабо-оранжевый Очень слабо-оран­жевый Бесцветный Слабо-фиолетово- красный Зеленовато-серый Зеленый	Фиолетовая Желто-зеленая » Красная Розовая Голубая Красно-фиолетовая Желтая Красная	Рейн Хлорофилл

Методики хроматографического определения. При анализе ле­карственного растительного сырья, содержащего антраценпроиз- водные, используется хроматография на бумаге и в тонком слое сорбента.

При исследовании состава антрагликозидов готовят водные извлечения; при анализе состава агликонов сырье экстраги­руют бензолом, этиловым или метиловым спиртом, которые при нагревании более или менее удовлетворительно экстрагируют как свободные антраценпроизводные, так и их гликозидные формы.

0,3 г измельченного растительного материала нагревают с 3 мл этилового спирта в течение 5 мин, доводя до слабого кипения. После остывания фильтруют. 0,1 мл фильтрата наносят на линию старта и хроматографируют в системе этилацетат — метиловый спирт — вода (100 : 17 : 13) на пластинках «Силуфол». Время хроматогра- фирования 30—40 мин. Хроматограмму высушивают на воздухе, обрабатывают 5%-ным NaOH в этиловом спирте и рассматривают при дневном свете и УФ свете до и после обработки. Одновременно хроматографируют стандарт «свидетель», нанося его раствор рядом с исследуемым извлечением. По величине R_f, характеру окраски и флуоресценции пятен идентифицируют антраценпроизводные ис­следуемого сырья (рис. 14—19). В табл. 1 даны пояснения к рисун­кам.

' » ! 0
jo			•ча
ЮООО 0	Г\ v '	о о	• -ч:
loifto N lo ^ ^ 1

6 га я в л я

t- So в ⁴ я

2 о я «S3

S ас; «г £ о

о с о go =

о. е ⁴ s; ^m ®

И га о s " 5,5,

S fT н = v O.S ^я

Sg^l 8s|S.

rj М й л о 'б'-Э

f-'як Я чод

S3

г т ^ i v

У га 5 I о й

J? о- О >=! о

а "и с s

н ш

2 S I «9

1 1 |				0
1 f	0				• СО
io 1					* •«*
!о	0	0	0	ООО	о
		(О	«л.	Sj-N, C4j

ото ' я

S- я X в о_т я

я о д 5 5.4 о,

S а. е р 5 -в"

о с 3 g ■ о

ll- sssl

S-S о „ о S I я

ояа'ч

* а « я SQ3 5,

м n g a Ci

2 >,я s

£ 3 х «

S3 «

,1 s я | a . я

"rag I й| о

<и

О ОТ £ В я «I

й я е в £ 5 2 о >< »«>■

S3 CL ^ В" Щ ^ S с и «а»

о. я « ч™ *§^н

3 ^я яТ

га 5 к . • вз J я S О. И О .. ш я

|ggS

-35 s-i

J Si

У « S о. 5

® о. о _ о я Q- и m Nil.

6 т и в о я

h S S 5 fe я

га о о 3 2 ^ь

S а.* В g V

2 ^е ё я «

о. а 5 о я

^к S ~ "

а « 33 О

2 S.5 Й

Я н » 2 ¥ ft

2 в Sо 8 5 5,3

^w ч 3 я

QBfl

-J — ЯР.

2 з X * -9

S3 ,

S В . я

= 3 ' S¹ jr л. о

СХиа ^яЧ

	0	• 1<э
	00 <00 ООО О ОС)	• X
	55 О) оо К h Сч|

	0	«It,
	GD0 ооооо оо
	^О, Ixtoki^f^ СМ *-
1

ри исследовании антрагликозидов хроматографирование ведут стеме этилацетат — муравьиная кислота — вода (10 : 2 : 3); из свободных антраценпроизводных ведут в толуоле (хромато- ия на бумаге).

8 О		сэ
7 О
6 О
ш J О
го /о	О	О
• А	• б	• • в Г

Рис. 18. Схема хромато- граммы антраценпроизвод­ных марены красильной:

А — этанольное извлечение корней и корневищ марены красильной; Б — рубери- триновая кислота; В — лу- цидинпримверозид; Г — али- аарнн

Рис. 19. Схема хромато- граммы антраценпроиз­водных кассии остроли­стной:

А — этанольное извлечение из листьев кассии остро­листной; Б — реин