Принципиальная схема бактериологического выделения возбудителей холеры

Справочная таблица № 2

Экспресс-тест для качественного одноэтапного выявления антигена Helicobakter pylori в фекалиях человека

НАЗНАЧЕНИЕ

Иммунохроматографический экспресс-тест для качественного определения антигена Helicobakter pylori в фекалиях.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ

Helicobakter pylori-грамотрицательная бактерия,поражающая слизистую оболочку желудка.Заражение Helicobakter pylori может привести к хроническому гастриту,язве желудка и двенадцатиперстной кишки. Helicobakter pylori диагностируют у 40-50% населения в развитых странах и у 80-90% в развивающихся странах.

ПРИНЦИП

Тест-система представляет собой полоску нитрацеллюлозной мембраны в пластиковом футляре (кассете) с фиксированными на ней моноклональными антителами к Helicobakter pylori , конъюгированными с коллоидными частицами золота. Поликлональные антитела зафиксированы в контрольной зоне полоски. Антигены Helicobakter pylori, находящиеся в пробе, реагируют со специфическими моноклональными мечеными антителами. Формируется комплекс антиген-антитело, который мигрирует по мембране, образуя розово-сиреневую полоску в тестовой зоне, что оценивается как положительный результат. Непрореагированный коньюгат мигрирует в контрольной зоне, где захватывается поликлональными антителами, формируя розово-сиреневую полоску, подтверждающую корректность результатов теста.

ТЕХНИКА ВЫПОЛНЕНИЯ АНАЛИЗА

1. Перед началом тестирования тестовую кассету и образец фекалий довести до комнатной температуры (20-30^оС).

2. Непосредственно перед исследованием вскрыть индивидуальную упаковку теста ( вскрытая кассета пригодна для использования в течение 1 ч ).

3. Маркировать тестовую кассету инициалами или идентификационным номером пациента.

4. Суспендировать пробу энергичным встряхиванием пробирки.

5. Отвинтить колпачок на дне пробирки, отломить кончик капельницы, внести 3 капли тестируемой суспензии в тестовое окно кассеты.

6. Результат анализа учитывают через 5-8 мин (позднее возможно проявление неспецифических реакций)

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ

Проявляется двумя красными полосами в контрольной (“C”) и тестовой (“ Т”)

зонах тестового окна. Тестовая и контрольная линии могут различаться по яркости

ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ:

Проявляется красной линией в контрольной зоне тестового окна при отсутствии тестовой линии.

СОМНИТЕЛЬНЫЙ:

При отсутствии видимой красной полосы в тестовой зоне результаты теста оценивают как сомнительные. Тест проводят повторно.

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

1.Тест предусматривает контроль за правильностью проведения процедуры. Окрашенная линия, появляющаяся в контрольной области (С) мембраны, указывает на правильность осуществления процедуры теста и работы кассеты.

2.Результаты теста не учитывают, если фон неясный и мешает увидеть или интерпретировать результаты.

ХАРАКТЕРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕСТА

Чувствительность теста: 92,5%

Специфичность теста: 95,0%

Порог чувствительности теста: 100 нг/мл

Тест не дает неспецифических перекрестных реакций с E. coli, S. aureus, Campilobacter coli, Enterococcus faecalis при их титре 10⁶ КОЕ/мл и гемоглобином в концентрации 0,5 г/л

УРЕАЗНЫЙ ТЕСТ

В лабораторию доставляют из катетера эндоскопических исследований кусочки биоптата

слизистой желудка или 12 п. кишки в пробирках, содержащих мочевину и фуксин. В нейтральной pH среде индикатор не изменяет своего цвета, а в результате наличия фермента уреазы в биоптате pH сдвигается в кислую сторону и цвет изменяется на малиновый. Для подтверждения результата медсестра делает мазки-отпечатки на обезжиренное предметное стекло. Мазки фиксируются 10 мин в 95% этиловом спирте, а затем окрашиваются по Граму .В положительном случае в препарате видны грамположительные S-образные микроорганизмы. В качестве контроля дополнительно делается посев на сектора среды Эндо для исключения наличия протея и стафилокков в слизистой желудка, так как многие патогенные микробы имеют фермент уреазу.

Занятие № 2.3.4.

Патогенные кокки. Лабораторная диагностика заболеваний, вызванных стафилококками, пневмококками, менингококками, гонококками

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

изучить биологические свойства возбудителей кокковых инфекций, принципы лабораторной диагностики кокковых инфекций, классифицировать препараты для идентификации, профилактики и лечения заболеваний.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:

1. Характеристику биологических свойств пиогенных кокков.

2. Эпидемиологию, патогенез, восприимчивость и иммунитет при инфекциях, вызванных патогенными кокками.

3. Основные клинические проявления заболеваний. 4. Принципы лабораторной диагностики.

5. Препараты для идентификации, профилактики и лечения заболеваний, вызванных патогенными кокками

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:

• дифференцировать кокки по биологическим свойствам

• интерпретировать результаты серологических реакций;

• классифицировать препараты в соответствии с их назначением.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ:

• об анаэробных грамположительных кокках - пептококках, пептострептококках и об анаэроных грамотрицательных кокках - вейлонеллах и их роли в патологии человека.