- •Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии Электронное учебно-методическое пособие
- •Предисловие
- •Тема 1 Светопольная микроскопия. Устройство биологического микроскопа
- •Основные технические характеристики микроскопа
- •Порядок работы со светопольным микроскопом
- •Приготовление витальных препаратов микроорганизмов
- •Лабораторная работа 1
- •Устройство оптического микроскопа типа «Биолар-4». Приготовление препаратов микроорганизмов
- •План проведения занятия
- •Препараты фиксированных окрашенных клеток
- •Окраска по Граму.
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа 2
- •Препараты фиксированных окрашенных клеток
- •Окраска по Граму.
- •Задание
- •Контрольные вопросы
- •Тема 2. Морфология микроорганизмов
- •«Изучение основных морфологических признаков бактерий»
- •Задание
- •Контрольные вопросы
- •Тема 2. Морфология микроорганизмов. Продолжение.
- •Методические указания
- •Контрольные вопросы
- •Тема 2. Морфология микроорганизмов. Продолжение.
- •Тема 3. Основы культивирования микроорганизмов
- •Принципы составления сред для культивирования микроорганизмов.
- •Способы культивирования микроорганизмов.
- •Поверхностное культивирование.
- •Глубинное культивирование.
- •Периодическое культивирование.
- •Непрерывное культивирование.
- •Получение чистой культуры
- •Стерилизация питательных сред, посуды, материалов и инструментов.
- •Подготовка питательных сред, посуды, материалов и инструментов к стерилизации.
- •Контрольные вопросы к теме 3.
- •Тема 4. Микроорганизмы природных биотопов.
- •Микроорганизмы литосферы
- •Микроорганизмы тропосферы.
- •Контрольные вопросы к теме 4.
- •Содержание лабораторных занятий по темам 3 и 4.
- •Лабораторная работа № 6. Приготовление питательных сред и их стерилизация. Получение накопительной культуры
- •Методические указания:
- •Лабораторная работа № 7. Анализ накопительной культуры и выделение чистой культуры. Седиментационный посев воздуха.
- •Лабораторная работа № 8. Анализ микробиологической загрязненности воздуха по Омелянскому. Изучение некоторых культуральных и морфологических особенностей выделенных микроорганизмов.
- •Итоговый контроль.
Контрольные вопросы
-
Каково строение тела мицелиальных грибов?
-
Какие признаки грибов называются культуральными?
-
Как приготовить микроскопический препарат мицелиальных грибов?
-
Назовите типы спор и органы бесполого способа размножения грибов?
-
Чем отличается строение конидиеносцев у различных мицелиальных грибов?
-
Приведите примеры грибов, размножающихся спорангиоспорами, конидиями и оидиями?
-
Каково практическое значение грибов Rhizopus, Aspergillus, Penicillium, Fusarium, Alternaria, Helminthosporium, Geotrichum?
Лабораторная работа 5.
Тема 2. Морфология микроорганизмов. Продолжение.
«Изучение основных морфологических и культуральных признаков дрожжей.
Дрожжи являются одноклеточными грибными неподвижным организма-ми, не имеющими настоящего мицелия.
Морфологические признаки дрожжей. Дрожжевые клетки имеют самую разнообразную форму (рис.18): округлую, овальную, яйцевидную (Saccharomyces), цилиндрическую (Schizosaccharomyces), лимоновидная (Saccharomycodes) и т.д.

а б в
Рис. 18. Форма клеток и способы вегетативного размножения дрожжей:
а – почкование; б – деление; в – почкующееся деление
Размеры клеток у разных видов дрожжей, применяемых в пищевых производствах, варьируют от 3…5 мкм в поперечнике и 6…10 мкм в длину, Форма и размеры дрожжевых клеток зависят от вида, возраста, питательной среды, способа культивирования. У зрелых дрожжей обнаруживаются 1…2 вакуоли различной формы. В цитоплазме имеются различные клеточные включения: гликоген, волютин, капли жира.
Способы вегетативного размножения дрожжей. Размножаются дрожжи преимущественно вегетативным способом, реже – половым с помощью спор. Одним из наиболее распространенных способов вегетативного размножения, характерного для дрожжей овальной и круглой формы является почкование (рис.18 а). Дрожжи цилиндрической формы размножаются вегетативно делением (рис.18 б). Для дрожжей лимоновидной формы характерно почкующееся деление, когда на широком основании формируется почка и одновременно закладывается перегородка (рис.18 в). Для изучения морфологии дрожжи выращивают на стерильном сусле концентрацией 8…10% СВ, сусло-агаре при 25…280С в течение 2…5 суток.
Выявление включений клетки. Гликоген (запасной полисахарид) обнаруживают при помощи прижизненной окраски дрожжей раствором йода. Гликоген окрашивается в красно-бурый цвет и является признаком зрелости дрожжей.
Метахроматин или волютин (запасной полифосфат в соединении с простыми белками и рибонуклеиновой кислотой) выявляют по способу Омелянского:
Тема 3. Основы культивирования микроорганизмов
Одна из особенностей микроорганизмов – их необычайная зависимость от условий окружающей среды. Малые размеры клеток обуславливают тесный контакт микроорганизмов со средой обитания, поэтому они реагируют на изменение условий в большей степени, чем другие живые существа.
Если в окружающей природной среде все необходимые питательные вещества находятся в доступной для микробной клетки форме и показатели физико-химических условий среды соответствуют оптимальным значениям для этого вида микроорганизма, то он активно растет и размножается, увеличивая зону своего распространения. При отклонении параметров среды от оптимальных значений и истощении питательных веществ развитие микроорганизма замедляется или вовсе прекращается. В таком состоянии клетки могут перейти в состояние анабиоза или совсем погибнуть.
Вся практическая микробиология базируется на изучении и практическом применении процессов метаболизма микробных клеток. С этой целью проводят выращивание микробных культур в искусственно созданных условиях. Этот процесс называют культивированием. Оно основано на знании физиолого-биохимических особенностей микроорганизмов и понимании значения физико-химических условий среды для жизнедеятельности микроорганизмов.
Культивированием называют выращивание микроорганизмов на питательных средах в определенных условиях, а развивающийся при этом организм - культурой. Культивирование при определенной температуре называется инкубированием (инкубацией).
Для проведения культивирования необходимо наличие питательной среды, объекта культивирования и соответствующих физико-химических условий окружающей среды.
Основные элементы культивирования представлены на рис. 3.1.
Питательная среда
Объект
культивирования
Физико-химические условия окружающей
среды






Культивирование
Микробная культура
Рис. 3.1. Основные элементы культивирования микроорганизмов.
Культура, представленная микроорганизмами одного вида, называется чистой. Культуру, содержащую более чем один вид микроорганизмов, называют смешанной или гетерогенной. В природе встречаются только гетерогенные культуры, а в производствах, основанных на использовании биохимической деятельности микроорганизмов, применяют чистые культуры.
Для изучения морфологических, культуральных и физиолого-биохимических свойств любого микроорганизма проводят его выделение из окружающей среды в чистую культуру. Это дает возможность провести идентификацию микроорганизма, установить его таксономическое положение и определить его практическую ценность. Выделение производят путем изолирования одной клетки микроорганизма одним из приемов. Затем осуществляют ее размножение на подобранной для данного микроорганизма питательной среде, создав элективные (избирательные) условия. Элективные условия обеспечивают преимущественное развитие выделяемой культуры и ограничивают развитие сопутствующих микроорганизмов.
