Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Methodichka / Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии (МГУПП).doc
Скачиваний:
96
Добавлен:
08.04.2020
Размер:
4.39 Mб
Скачать

Подготовка питательных сред, посуды, материалов и инструментов к стерилизации.

Питательные среды и жидкости, предназначенные для стерилизации, разливают в колбы и пробирки не более, чем на половину их высоты. Сосуды закрывают ватными пробками, обтянутыми марлей. Пробки должны быть достаточно плотными, с равномерным распределением волокна ваты. Ватные пробки предохраняют среду от инфицирования микроорганизмами и обеспечивают проникновение пара в сосуд при автоклавировании. Сверху на пробку надевают бумажный колпачок, который фиксируется на горлышке сосуда с помощью шпагата или аптечной резинки. Колпачок предохраняет пробку от выбивания при возможном резком падении давления в автоклаве.

Посуду перед стерилизацией тщательно моют, сушат и заворачивают в бумагу для сохранения стерильности после прогревания.

Каждую пипетку заворачивают отдельно в длинные полоски бумаги, шириной 4-5 см. В верхний конец пипетки, который микробиолог при выполнении работ берет в руку, предварительно вставляют ватные тампоны. (тампоны выполняют ту же роль, что и ватные пробки). Заворачивание пипетки начинают с капиллярного, узкого конца по спирали. Постепенным движением бумаги по спирали заканчивают обмотку у конца с ватным тампоном. Бумага должна плотно охватывать пипетку. Завернутые пипетки заворачивают по несколько штук вместе в бумагу для предотвращения индивидуальной упаковки от загрязнений и разрывов или помещают в специальные металлические или картонные пеналы.

Шпатели обертывают по отдельности, а потом, как и пипетки, объединяют.

Чашки Петри заворачивают вместе по 2-4-8 штук, либо помещают в специальные, плотно закрывающиеся металлические пеналы.

Колбы, пробирки и другие сосуды закрывают ватными пробками, на которых сверху фиксируют бумажный колпачок.

Различные приспособления и материалы, используемые в работе с микроорганизмами, также стерилизуют, плотно упакованными в бумагу. Там, где это необходимо, предварительно вставляют ватный тампон.

Наиболее часто используемые способы стерилизации питательных сред, посуды и других материалов представлены в таблице 1.

Способы стерилизации лабораторных материалов. Таблица1.

Стерилизуемый

материал

Метод стерилизации

Режим

стерилизации

Примечание

Питательные среды с почвенной вытяжкой; карто-фельные среды

Автоклавирование

1,5-2 атм, 30 мин

В колбах, пробирках, бутылях и т. д., закрытых ватными пробками

Жидкие и агаризованные среды, не содержащие саха­ров и других веществ, раз­лагающихся при 120°С

Автоклавиро ванне

1 атм, 20 мин

То же

Жидкие и агаризованные среды с сахарами и другими соединениями, не выдерживающими нагревания при 120°С

Автоклавирование

0,5 атм, 15—30 мин

То же

Среды или компоненты сред, не выдерживающие нагревания выше 100°С

Дробная стерилизация

Текучий пар 3 раза по 30— 40 мин через сутки

То же

Среды или компоиенты сред, не выдерживающие нагревания, например, белки, некоторые витамины и др.

Фильтрование через

бактериальные фильтры

Чашки Петри, пипетки, шпатели.

Горячим воздухом

165—170°С, 2 час

Завернутые в бумагу (отверстия пипеток закрыты ватными тампонами)

Колбы, пробирки, химические стаканы, флаконы, стеклянные центрифужные пробирки

Горячим

воздухом

165—170°С, 2 час

Закрытые ватными пробками

Держатели бактериальных фильтров, резиновые пробки и шланги, фильтры Зейтца

Автоклавирование

1 атм, 20 мин

Завернутые в бумагу

Мембранные фильтры

Автоклавирование

0,5 атм, 15 мин

В сосуде с дистил­лированной водой. Можно стерили­зовать длительным кипячением

Центрифужные пробирки, изготовленные из термолабильных пластмасс

Ультрафиолетовыми лучами

Время экспози­ции устанавли­вают экспери­ментально

Пробирки после облучения хранят в стерильной посуде