Лабораторная работа № 8. Анализ микробиологической загрязненности воздуха по Омелянскому. Изучение некоторых культуральных и морфологических особенностей выделенных микроорганизмов.

Задания:

1. Визуально отметить наличие или отсутствие роста микроорганизмов на среде Эндо. При наличии роста описать характер колоний, выбрать наиболее характерные для БГКП колонии, окрасить материал из этих колоний по Граму. Сделать заключение о возможном присутствии БГКП в пробе взятого на исследование материала.

2. Провести подсчет числа выросших на МПА колоний в чашках Петри с посевом воздуха, сделать расчет загрязненности воздуха по правилу Омелянского и дать заключение о его чистоте.

3. Описать и зарисовать 2-4 изолированные колонии бактерий и мицелиальных грибов из числа выросших на МПА.

4. Приготовить из материала выбранных бактериальных колоний фиксированные препараты, окрасить по Граму, промикроскопировать. Выявить форму и взаимное расположение клеток, принадлежность к окраске по Грамму, наличие спор, капсул. Зарисовать. Приготовить из материала колоний препарат «раздавленная капля» и определить подвижность бактерий.

5. Приготовить из материала выбранных колоний мицелиальных грибов препарат «раздавленная капля», промикроскопировать. Выявить наличие или отсутствие септ, описать органы бесполого размножения. Зарисовать.

Методические указания:

1. Для окраски по Грамму следует брать материал из колоний, окрашенных в малиновый цвет с металлическим блеском и без него, бледно розовых, прозрачных с ровными краями, блестящих и слегка выпуклых. Параллельно следует приготовить препараты из тест-культур и окрасить их по Граму.

2. При большом числе выросших на МПА в чашках Петри колоний следует пользоваться счетчиком колоний. При отсутствии счетчика допустимо проводить подсчет колоний в отдельном секторе с последующим пересчетом на всю площадь поверхности среды.

3. При описании поверхностных колоний отмечают их форму (округлая, неправильная, ризоидная, амебовидная и др.), профиль (плоский, выпуклый, кратерообразный, конусовидный и др.), структуру (однородная, мелкозернистая, волокнистая, струйчатая и др.), поверхность (гладкая, шероховатая, складчатая, с концентрическими кругами и др.), блеск, прозрачность, цвет, размер, консистенцию.

4. Для изучения морфологических признаков бактерий можно ограничиться приготовлением 2-х препаратов: окрашенного простым способом и окрашенного по Грамму.

5. Для приготовления препарата «раздавленная капля» из культуры гриба материал следует брать на границе окрашенного и неокрашенного мицелия. Для лучшего наблюдения органов бесполого размножения с конидиеносцев предварительно отбивают конидии легким постукиванием по покровному стеклу препарата «раздавленная капля». Препарат в этом случае готовят в водном растворе этанола (1:1).

Оборудование и материалы: Микроскоп лабораторный, предметные и покровные стекла, бактериологические петли, препаровальные иглы, малый кристаллизатор (или пластиковый лоток), стеклянные рельсы, промывалки с водопроводной водой, капельницы с водой, карболовым фуксином, карболовым генциан-виолетом, с раствором Люголя, с 96º этиловым спиртом, иммерсионным маслом; вата, салфетки марлевые, полоски фильтровальной бумаги, спирт этиловый, горелка газовая или спиртовка, универсальный маркер, дезинфицирующий раствор.