Методические указания:

1. Обратить внимание на плотность и размеры приготовленных пробок. Периодически проверять диаметр скручиваемой пробки по характерному звуку, возникающему при извлечении пробки из горлышка колбы или пробирки.

2. При подготовке посуды исключить повреждения оберточной бумаги и проверять плотность ее прилегания к поверхности посуды. Указать способы и режимы стерилизации посуды и водопроводной воды.

3. Внимательно ознакомиться с прописью приготовления среды Эндо, указанной на упаковке с сухой средой. Для приготовления среды пользоваться только стерильной колбой и разливать только в стерильные чашки Петри.

4. При розливе стерильного мясопептонного агара в стерильные чашки Петри все операции необходимо проводить у пламени горелки.

5. При определении массы навески для посева в жидкую накопительную среду необходимо руководствоваться действующими нормативами безопасности пищевых продуктов - СанПиН 2.3.2.1078-01. Следует придерживаться соотношения между массой исследуемой навески и объемом среды накопления, в которую навеска вносится, определяемого приблизительно как 1:10.

Оборудование и материалы: Весы технические электронные (или механические с разновесом), рН-метр, водяная баня, электроплитка, термостат с температурой 30ºС, термостат с температурой 37ºС, колбы вместимостью 500, 250, 100 см³, пробирки бактериологические и химические, цилиндры мерные разные, стакан химический, пипетки на 1-2 см³ и 10 см³ , шпатель металлический, сухая среда Эндо, 10%-ные растворы кислоты и щелочи, вата, марля, нитки хлопчатобумажные белые, ватно-марлевае пробки к колбам и пробиркам, бумага оберточная, шпагат, ножницы, спирт этиловый, горелка газовая или спиртовка, дезинфицирующий раствор; стерильные: чашки Петри, металлические шпатели, часовые стекла или фольга, колбы со 100 см³ и пробирки с 10 см³ водопроводной воды (для приготовления разведений исследуемого материала), пипетки на 1, 2 и 10 см³ , колбы со стерильной накопительной средой Кесслер.

Лабораторная работа № 7. Анализ накопительной культуры и выделение чистой культуры. Седиментационный посев воздуха.

Задания:

1. Визуально отметить наличие или отсутствие признаков роста микроорганизмов в накопительной среде.

2. Приготовить препарат «раздавленная капля» из накопительной культуры, препарат промикроскопировать и зарисовать.

3. Провести рассев полученной накопительной культуры на среду Эндо в чашки Петри для получения изолированных колоний. Чашки с посевами поместить в термостат при температуре 37ºС, перевернув их вверх дном.

4. Провести в выбранном помещении седиментационный посев воздуха на мясопептонный агар в чашку Петри. Чашки с посевами поместить в термостат при температуре 30ºС, перевернув их вверх дном.

Методические указания:

1. Рост микроорганизмов в среде накопления после термостатирования отмечают по появлению мути, осадка, пленки на поверхности среды, газовыделению, изменению цвета среды.

2. Перед приготовлением препарата для микроскопирования содержимое колбы с накопительной культурой тщательно перемешивают. Препарат микроскопируют с сухими системами и зарисовывают с соблюдением относительных пропорций наблюдаемых объектов.

3. При рассеве накопительной культуры на дифференциально-диагностическую среду Эндо следует с одной стороны, тщательно соблюдать условия асептики, а с другой – не допускать ее инактивации вследствие перегрева.

4. При проведении в помещении седиментационного анализа воздуха чашки Петри со средой следует располагать на уровне рабочих поверхностей или на уровне пола. Во время экспозиции чашек Петри необходимо исключить появление турбулентных воздушных потоков в местах их размещения.

Оборудование и материалы: Микроскоп лабораторный, предметные и покровные стекла, бактериологические петли, термостат с температурой 30ºС, термостат с температурой 37ºС, вата, салфетки марлевые, полоски фильтровальной бумаги, спирт этиловый, горелка газовая или спиртовка, универсальный маркер, дезинфицирующий раствор; стерильные: чашки Петри со средой Эндо и мясопептонным агаром, шпатели Дригальского, пипетки на 1-2 см³ .