Контрольные вопросы к теме 4.

1. Какова роль микроорганизмов в круговороте веществ?

2. Какие из природных биотопов являются естественной средой обитания микроорганизмов? Почему?

3. На какой глубине в почве содержится наибольшее количество микроорганизмов? Почему?

4. От чего зависит качественный и количественный состав микроорганизмов в почве?

5. Какие показатели определяют при кратком санитарно-микробиологическом анализе почвы?

6. Дайте краткую характеристику природных водных источников.

7. Источники загрязнения водоемов патогенными микроорганизмами.

8. Какие водные источники содержат самые чистые природные воды?

9. Качественный и количественный состав микроорганизмов атмосферного воздуха.

10. Методы определения микробиологической загрязненности воздуха и их сравнительная оценка.

11. Как изменяется микробный состав атмосферы с высотой?

13. Каким методом можно определять микробную загрязненность атмосферного воздуха?

Содержание лабораторных занятий по темам 3 и 4.

Лабораторные работы по темам 3 и 4 объединены в один цикл. Цикл содержит 3 работы: № 6, № 7 и № 8. Работа № 6 рассчитана на 2 занятия и посвящена проведению подготовительных работ для проведения культивирования и посеву экспериментального материала в жидкие селективные среды. Работа № 7 включает анализ накопительной культуры и выполнение микробиологического анализа воздуха седиментационным способом. На лабораторной работе № 8 завершают анализ культуры на диагностической среде, проводят количественный учет микроорганизмов в воздухе по Омелянскому и проводят ориентировочную идентификацию выросших на МПА колоний с описанием культуральных и основных морфологических признаков микроорганизмов.

Лабораторная работа № 6. Приготовление питательных сред и их стерилизация. Получение накопительной культуры

Занятие 1. Приготовление жидких и плотных питательных сред.

Стерилизация сред.

Задания:

1. Приготовить мясопептонный агар (МПА), разлить его в колбы (для заливки чашек Петри) и в пробирки (для скошенного агара). Сдать на стерилизацию.

2. Приготовить жидкую накопительную среду Кесслер для выявления и определения бактерий группы кишечных палочек (БГКП). Разлить среду в 3 колбы по 100 см³ , в 3 бактериологические пробирки по 10 см³ и в 3 химические пробирки по 1 см³. Сдать на стерилизацию. Остаток среды в колбе также сдать на стерилизацию.

3. Ознакомиться с устройством и работой автоклава и сушильного шкафа.

Методические указания:

1. При приготовлении плотной питательной среды из сухого концентрата навеску порошка сначала суспензируют в холодной воде и только потом постепенно нагревают до полного расплавления комочков. Нагревание проводят при постоянном перемешивании, не допуская пригорания, вспенивания и бурного кипения среды. При разливе среды в колбы и пробирки обращать внимание на коэффициент их заполнения, который не должен превышать 0,5.

2. Все емкости с плотными и жидкими питательными средами закрыть ватно-марлевыми пробками и бумажными колпачками. На колпачках простым карандашом указать название стерилизуемой среды. Для каждой среды указать способ и режим стерилизации.

3. При знакомстве с устройством автоклава особое внимание уделить работе предохранительного клапана и проверке его исправной работы, технике установки режимов стерилизации, контролю уровня воды в паровой камере.

Оборудование и материалы: Весы технические электронные (или механические с разновесом), рН-метр, водяная баня, колбы вместимостью 500, 250, 100 см³, пробирки бактериологические и химические, цилиндры мерные разные, стакан химический, пипетки на 1-2 см³ и 10 см³ , шпатель металлический, сухие питательные среды МПА и Кесслер, 10%-ные растворы кислоты и щелочи, ватно-марлевые пробки к колбам и пробиркам, бумага оберточная, шпагат, ножницы – по числу студентов и по усмотрению преподавателя.

Занятие 2. Подготовка и стерилизация посуды.

Получение накопительной культуры и приготовление

дифференциально-диагностической среды.

Подготовка к седиментационному анализу воздуха.

Задания:

1. Приготовить ватно-марлевые пробки для колб и пробирок.

2. Подготовить к стерилизации чашки Петри, шпатели Дригальского, пипетки на 1,2,10 см³ . Сдать на стерилизацию.

3. Приготовить к стерилизации колбы вместимостью 250 см³ со 100 см³ водопроводной воды и пробирки с 10 см³ водопроводной воды. Сдать на стерилизацию.

4. Приготовить дифференциально-диагностическую среду Эндо, разлить в стерильные чашки Петри, чашки со средой поставить в термостат с температурой 30ºС для подсушивания.

5. Стерильный мясопептонный агар расплавить и разлить в стерильные чашки, чашки с МПА поставить в термостат при температуру 30ºС для подсушивания.

6. Провести посев навески исследуемого материала в жидкую селективную среду Кесслер, посев поставить в термостат с температурой 37ºС.