- •Итоговое контрольное занятие «оои, капельные инфекции, гноеродные кокки»
- •1. Особенности организации работы баклаборатории особо опасных инфекций.
- •2. Какие признаки (критерии) характерны для особо опасных инфекций?
- •3. Аллергены для диагностики особо опасных инфекций.
- •Значение реакции иммунофлуоресценции в диагностике оои.
- •Морфологические и тинкториальные особенности возбудителя чумы.
- •Культуральные свойства возбудителя чумы.
- •Подвиды Yersinia pestis.
- •Главные факторы патогенности возбудителя чумы
- •Плазмиды и факторы патогенности возбудителя чумы.
- •Эпидемиология чумы.
- •Пути и способы заражения человека чумой.
- •Основные клинические формы чумы, материал для мб диагностики.
- •В каких случаях ставится аллергическая проба с пестином?
- •Характеристика иерсиний, патогенных для человека, отличия от палочки чумы.
- •Методы мб диагностики чумы.
- •Специфическая профилактика чумы.
- •Морфологические и тинкториальные свойства бруцелл.
- •Культуральные свойства бруцелл.
- •Эпидемиология бруцеллеза.
- •Почему бруцеллез – особо опасная инфекция?
- •Патогенез бруцеллеза.
- •Микробиологическая диагностика бруцеллеза.
- •Методы мб диагностики бруцеллеза.
- •Серодиагностика бруцеллеза.
- •Преимущества реакции Кумбса при серодиагностике бруцеллеза.
- •Серологические экспресс-реакции для диагностики бруцеллеза.
- •Реакция Хеддльсона и реакция Райта, их сущность.
- •Проба Бюрне, сущность, постановка, учет результатов.
- •Специфическая профилактика бруцеллеза.
- •Морфологические и тинкториальные свойства Bacillus anthracis.
- •Культуральные свойства возбудителя сибирской язвы.
- •Плазмиды и факторы патогенности возбудителя сибирской язвы
- •Отличия сибиреязвенной палочки и антракоидоз.
- •Эпидемиология сибирской язвы.
- •Патогенез сибирской язвы.
- •Основные клинические формы сибирской язвы.
- •Методы мб диагностики сибирской язвы
- •38. Бактериоскопическая диагностика сибирской язвы.
- •Выделение чистой культуры возбудителя сибирской язвы.
- •В каких случаях ставится аллергическая проба с антраксином?
- •Специфическая профилактика и лечение сибирской язвы.
- •Морфологические и тинкториальные свойства возбудителя туляремии.
- •Культуральные свойства возбудителя туляремии.
- •Факторы патогенности возбудителя туляремии.
- •Географические расы возбудителя туляремии.
- •Эпидемиология туляремии.
- •Патогенез туляремии.
- •Специфическая профилактика туляремии.
- •Культуральные свойства стафилококков.
- •Заболевания, которые вызывают стафилококки.
- •Межвидовые различия стафилококков.
- •Факторы патогенности стафилококков.
- •Методы микробиологической диагностики стафилококковых инфекций.
- •Выделение чистой культуры стафилококков.
- •Для чего и как проводят фаготипирование?
- •Какие экзотоксины продуцируют стафилококки?
- •Ферменты защиты и агрессии стафилококков.
- •Факторы патогенности стафилококков, влияющие на процесс фагоцитоза.
- •Как определяют гиалуронидазную активность?
- •Мембраноповреждающие токсины, разновидности, механизм действия.
- •Свойства стафилококковых энтеротоксинов.
- •Как у стафилококков определяют наличие плазмокоагулазы?
- •Методы определения чувствительности к антибиотикам
- •Классификация стрептококков по росту на кровяном агаре.
- •Культуральные свойства стрептококков.
- •Выделение чистой культуры пиогенных стрептококков.
- •Какие заболевания вызывают стрептококки?
- •Серологическая классификация стрептококков.
- •Факторы патогенности стрептококков.
- •Какие стрептококки вызывают скарлатину?
- •Патогенез скарлатины.
- •Особенности иммунитета при скарлатине.
- •Патогенез ревматизма.
- •Факторы патогенности стрептококков.
- •Морфология пневмококков.
- •Правила взятия и пересылки материала при подозрении на менингококковую инфекцию.
- •Эпидемиология менингококковых инфекций.
- •Культуральные свойства менингококков.
- •Методы микробиологической диагностики менингококковых инфекций.
- •Формы менингококковых инфекций.
- •85. Патогенез менингококковых инфекций.
- •Какие заболевания вызывают пневмококки?
- •Бактериологическая диагностика менингококковых инфекций.
- •Бактериоскопическая диагностика менингококковых инфекций.
- •Серологическая классификация менингококков.
- •Иммунологическая диагностика менингококковых инфекций.
- •Специфическая профилактика менингококковых инфекций.
- •Отличия пневмококков от других стрептококков.
- •Факторы патогенности менингококков.
- •94. Какие заболевания вызывают гонококки?
- •95. Морфологические, тинкториальные, культуральные свойства гонококков.
- •96. Бактериоскопическая диагностика гонореи.
- •97. Бактериологическая диагностика гонореи.
- •98. Серологическая диагностика гонореи.
- •99. Иммунитет при гонорее.
- •100. Для каких целей используют гоновакцину.
- •101. Факторы патогенности гонококков.
- •102. Эпидемиология гонококковых инфекций.
- •103. Морфологические и тинкториальные свойства дифтерийной палочки.
- •104. Культуральные и биохимические свойства дифтерийной палочки.
- •105. Факторы патогенности дифтерийной палочки.
- •106. Дифтерийный токсин, активация, структура, механизм действия.
- •107. Генетический контроль синтеза дифтерийного токсина.
- •108. Эпидемиология дифтерии.
- •109. Патогенез дифтерии.
- •110. Микробиологическая диагностика дифтерии.
- •111. Методы определения токсигенности дифтерийной палочки.
- •112. Специфическая профилактика и лечение дифтерии, препараты.
- •113. Основные свойства возбудителя коклюша.
- •114. Факторы патогенности коклюшной палочки.
- •115. Эпидемиология и патогенез коклюша.
- •116. Микробиологическая диагностика коклюша.
- •117. Специфическая профилактика коклюша, препараты.
- •118. Морфологические и тинкториальные особенности туберкулезной палочки.
- •119. Классификации микобактерий по скорости роста и пигментообразованию.
- •120. Факторы патогенности туберкулезной палочки.
- •121. Свойства микобактерий, определяемые высоким содержанием липидов.
- •122. Эпидемиология туберкулеза.
- •123. Патогенез туберкулеза, строение бугорка.
- •124. Методы обогащения исследуемого материала при мб диагностике туберкулеза.
- •125. Бактериоскопическая диагностика туберкулеза.
- •126. Бактериологическая диагностика туберкулеза, преимущества и недостатки.
- •127. Аллергический метод диагностики туберкулеза.
- •128. Специфическая профилактика и лечение туберкулеза.
- •129. Понятие о микобактериозах, их возбудители.
- •130. Основные свойства возбудителя проказы.
- •131. Эпидемиология и патогенез проказы.
- •132. Микробиологическая диагностика проказы.
-
Свойства стафилококковых энтеротоксинов.
Они характеризуются антигенной специфичностью, термостабильностью, устойчивостью к действию формалина и пищеварительных ферментов. Устойчивы при диапозоне pH от 4.5 до 10.0. Энтеротоксины низкомолекулярные белки с м.м. от 26 до 34 кД со свойствами суперантиенов
-
Как у стафилококков определяют наличие плазмокоагулазы?
Плазмокоагулазу выявляют путем внесения выделенной культуры в пробирку с цитратной плазмы кролика. Ее можно приготовить в любой лаборатории. У кролика из сердца берут 8 мл крови, вносят в пробирку с 2 мл 5% лимонно-кислого натрия и ставят в холодильник. После полной осадки форменных элементов плазму отсасывают в стерильную пробирку. Она может храниться в холодильнике 8-10 дней. Перед использованием ее разводят 1:5 (1 мл плазмы и 4 мл изотонического раствора хлорида натрия) и разливают в аглютинацийни стерильные пробирки по 0,5 мл. Полную петлю культуры стафилококков эмульгируют в плазме и помещают в термостат на 3 часа, затем оставляют при комнатной температуре на 18-20 часов. Предварительный учет свертывания плазмы проводят через 3 ч, окончательный - на второй день. Очень удобно пользоваться стандартной сухой цитратной плазмы кролика. Перед употреблением в ампулу добавляют 1 мл изотонического раствора хлорида натрия и после полного растворения ее разводят 1:5. Плазма человека малопригодна для постановки реакции плазмокоагуляции, поскольку в ней могут быть консерванты, лекарственные вещества, антитела, которые могут подавлять образование плазмокоагулаза.
Если выделена культура вызывает гемолиз, коагулирует плазму и дает положительную лецитовителазну реакцию, уже на третий день можно выдать результат на наличие S. aureus. Если культура обладает только плазмокоагулаза или только вителазну активность, для окончательного установления вида стафилококка необходимо определить дополнительные критерии патогенности: ферментацию маннита в анаэробных условиях, ДНК-азную активность, продукцию лизоцима, фосфатазы, а также определить чувствительность к новобиоцин.
-
Методы определения чувствительности к антибиотикам
а) Метод дисков. Бумажные диски, пропитанные определенными антибиотиками, помещают на газон исследуемой бактериальной культуры в чашке Петри, Посевы инкубируют в течение 16-24 часов, после чего учитывают результаты опыта по образованию зон задержки роста бактерий.
По диаметру зон задержки роста ориентировочно судят о степени чувствительности бактерий к антибиотикам . Зона задержки роста до 15 мм указывает на слабую, до 25 мм - на среднюю и свыше 25 мм - на высокую чувствительность. Более точные результаты получают при использовании метода серийных разведений.
б) Метод серийных разведений. Этот метод позволяет определить минимальную задерживающую концентрацию антибиотика для данного микроорганизма (МЗК) как на жидких, так и на плотных питательных средах.
МПБ разливают по 2 мл в серию пробирок. Готовят основной раствор антибиотика, для чего берут навеску антибиотика и растворяют в дистиллированной воде из расчета 1 мг антибиотика на мл растворителя.
Левомицетин предварительно растворяют в 96° этиловом спирте из расчета 0,25 мл спирта на 1 мг антибиотика; после полного растворения добавляют такое количество дистиллированной воды, чтобы раствор содержал в 1 мл 1 мг антибиотика.
Тетрациклин и окситетрациклин растворяют в сантинормальном растворе соляной кислоты из расчета 1 мл на 1 мг антибиотика.
Эритромицин сначала растворяют в чистом метиловом спирте из расчета 1 мл на 10 мг эритромицина. После растворения добавляют такое количество дистиллированной воды, чтобы получить раствор, содержащий в 1 мл 1 мг антибиотика.
Исходный раствор антибиотика в количестве 2 мл вносят в первую пробирку с МПБ, перемешивают и получают определенную его концентрацию.
Из первой пробирки 2 мл разведенного антибиотика переносят во вторую пробирку и после перемешивания переносят 2 мл в третью пробирку и т.д. до предпоследней, откуда 2 мл выливают. Последняя пробирка является контролем, в ней нет антибиотика и она свидетельствует о пригодности среды для роста культуры.
После разведения антибиотика во все пробирки вносят по 0,1 мл испытуемой бульонной культуры. Для этого используют 3-4-часовые или 18-часовые культуры, разведенные МПБ в 50 раз.
Пробирки помещают в термостат на 12-18 часов, но предварительные результаты можно учитывать через 6-8 часов.
По истечении необходимого срока инкубации определяют максимальное разведение антибиотика, которое еще подавляет рост культуры. Концентрация антибиотика в последней пробирке с видимой задержкой роста и представляет собой минимальную задерживающую концентрацию антибиотика (МЗК) или минимальной подавляющей концентрацией (МПК).
Штамм считается чувствительным к антибиотикам, если МЗК препарата для данного штамма соответствует концентрации этого препарата, создаваемой в организме. Измеряется МПК в мг/л или мкг/мл.
Минимальная подавляющая концентрация (МПК) - наименьшая концентрация антибиотика (мг/л или мкг/мл), которая in vitro полностью подавляет видимый рост бактерий.
в) Определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста проводится аналогично тестированию диско-диффузионным методом. Отличие состоит в том, что вместо диска с антибиотиком используют полоску Е-теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной. В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной подавляющей концентрации (МПК).
Несомненным достоинством диффузионных методов является простота тестирования и доступность выполнения в любой бактериологической лаборатории. Однако с учетом высокой стоимости Е-тестов для рутинной работы обычно используют диско-диффузионный метод.