Міністерство охорони здоров’я України Івано-Франківський національний медичний університет

Кафедра епідеміології та інфекційних хворіб РЕФЕРАТ на тему:

Етіологічна структура гнійних бактеріальних менінгітів, епідеміологічні особливості (джерело збудників, фактори і шляхи передачі, прояви епідемічного процесу), профілактичні та протиепідемічні заходи.

Підготувала студентка V курсу, 4- групи медичного факультету Щепанська Наталія Ярославівна

м. Івано-Франківськ 2014 р.

Зміст

1. Введення

2. Аналіз та облік результатів

3. Історія

4. Частота гнійного бактеріального менінгіту в світі в залежності від збудника

5. Характеристика збудників гнійних бактеріальних менінгітів. Класифікація. Діагностичні критерії випадку менінгіту 5.1 Haemophilus influenzae 5.2 Neisseria meningitidis 5.3 Streptococcus pneumoniae 5.4 Інші збудники

6. Патогенез бактеріального менінгіту

7. Мікробіологічна діагностика гнійних бактеріальних менінгітів

8. Показання до лабораторному дослідженню

9. Мікробіологічна діагностика гнійних бактеріальних менінгітів 9.1 Бактеріологічне дослідження спинномозкової рідини хворого 9.2 Бактеріологічне дослідження крові 9.3 Бактеріологічне дослідження ексудату з петехій 9.4 Бактеріологічне дослідження носоглоткового слизу на менінгокок

10. Дослідження трупного матеріалу

11. Методи серологічної ідентифікації менінгококів або їх антигенів 11.1 Реакція аглютинації в полістиролових пластинах 11.2 Реакція мікропреципітації для визначення серогрупи менінгококів 11.3 Метод ВІЕФ. 11.4 Використанню реакції непрямої гемаглютинації (РНГА) для виявлення антитіл при менінгококової інфекції

12. Показання до проведення серологічних досліджень

13. Сучасні методи генодіагностікі гнійних бактеріальних менінгітів 13.1 Загальні відомості та принципи 13.2 Показання до застосування методу 13.3 Виділення ДНК

14. Висновок

15. Список використаних джерел

Введення

Менінгіти бактеріальної природи - важке інфекційне захворювання, при яких в інфекційний процес втягуються м'які мозкові оболонки основи головного мозку і верхня частина спинного мозку.

Локалізація вогнища запалення та, характерні для цих захворювань, тяжкі клінічні прояви, і генералізація процесу, з ураженням різних органів і тканин, вказує на необхідність швидкого вирішення питання про етіологію захворювання, та призначення адекватної антибактеріальної терапії.

Від правильної і своєчасно проведеної низки досліджень по визначенню етіологічного фактора захворювання і раннього початку відповідного етіотропного лікування залежить результат захворювання, показники летальності, кількість і тяжкість ускладнень.

Дані лабораторної діагностики бактеріальних менінгітів та вивчення основних біологічних властивостей збудників лежать в основі визначення прогностичних критеріїв в системі епідеміологічного нагляду за бактеріальними менінгітами.

Раціонально організована, комплексна, лабораторна діагностика гнійних бактеріальних менінгітів будь-якої етіології дозволяє достовірно контролювати стан проблеми інфекційної патології.

Історія

У ХХ сторіччі людство добилося великих успіхів у боротьбі з інфекційними захворюваннями. Одні хвороби відступали в силу природних причин, інші - завдяки підвищенню рівня життя і профілактики.

До особливої групи життєзагрожуючих для людини і актуальних захворювань відноситься бактеріальний менінгіт. Перші згадки про хворобу відзначені у Павла Егінского (VII в.). За даними Трейтера В.А. (1920) епідемічні спалахи менінгіту зустрічалися в Італії в I, II і VII століттях. Пізніше італійськими лікарями дано опис клінічної характеристики менінгіту, а в 1805 р. вперше зареєстрована і докладно висвітлена епідемія цереброспінального менінгіту в Женеві. В подальшому безліч разів згадувалося про численні спалахи, що переходили деколи в епідемії, які мали широке територіальне поширення і тривали протягом багатьох років. Відомий французький дослідник, який вивчав менінгіти в Африці (60-ті роки), професор Л. Лапессоні так викладає своє враження від хвороби: "Дивлячись на дітей, що лежать в гарячковому стані і на те, як швидко настає коматозний стан і судоми, на враженні хворобою, як ударом блискавки, розумієш, чому навіть згадка про хворобу - "менінгіт" - викликає тваринний страх, неспокій, почуття безвиході і невідворотної біди ".

Ставлення до хвороби не змінилося і в даний час. Незважаючи на досягнутий прогрес у відношенні етіології і патогенезу, а також на розвиток нових напрямків в антибактеріальній терапії та профілактиці, захворювання залишається однією із найважливіших причин смертності та інвалідизації, тим самим підтверджуючи високу соціальну значимість бактеріальних менінгітів у списку інших захворювань людини.

Частота і зустрічальність гнійного бактеріального менінгіту в світі, в залежності від збудника

За останнє десятиліття відзначено зниження частоти захворюваності майже на половину. У Росії середня частота зустрічальності бактеріального менінгіту - 3 на 100000 населення. Основним етіологічним чинником є N.meningitis (60%), S.pneumoniae (30%) і H.influenzae (10%).

У США частота зустрічальності бактеріального менінгіту - від 2,5 до 3.5 випадків на 100000 популяції.

До 1990 року основними етіологічними факторами бактеріального менінгіту були три збудники - H.influenzae, N.meningitis і S.pneumoniae, які були причиною захворювання в 75% випадків. Більшість менінгітів, викликаних H.influenzae (тип b) спостерігалися у дітей, у віці до 1 року.

Проте, з появою вакцин (HibTITER, Pedvax HIB, ProHIBit) випадків H.influenzae - опосередкованих менінгітів стало значно менше. Так, у США з проведенням активної вакцинації, розпочатої в 1988 році, число випадків інфекцій ЦНС, викликаної типом b H.influenzae, знизилося до 1997 року до 0,7 на 100.000 населення (в порівнянні з 421 випадків на 100.000 у 1987 році).

Сьогодні найважливішою причиною бактеріального менінгіту є S.pneumoniae. Так, в США щорічно реєструється 3000 випадків пневмококових менінгітів щорічно, при цьому смертність при даному захворюванні висока, незважаючи на відповідну антибактеріальну терапію. Високою залишається захворюваність пневмококовими менінгітами у дітей у віці до 6 місяців і у літніх осіб. Частота інфекційного менінгіту серед новонароджених в Скандинавських країнах склала 1,9 на 100.000 новонароджених; смертність перевищила 5%.

Істотною проблемою антибактеріальної терапії менінгітів є широке поширення полірезистентних штамів S.pneumoniae. Від 12% до 35% всіх виділених в США штамів пневмококів резистентні до пеніциліну, третина з яких мають МПК до пеніциліну більше 2 мг/л.

Другим по значимості збудником бактеріального менінгіту є N.meningitis (серотипи A і С). У США захворюваність менінгітом, викликаного менінгококом, становить 0,6 випадків на 100.000 населення, найчастіше серед дітей, підлітків та молодих осіб (від 2 до 18 років).

У Ісландіі, N.meningitis викликає найбільше число захворювань - 56%, тоді як S.pneumoniae зустрічався в 20%, а H. influenzae та Listeria monocytogenes у 5% випадків відповідно. Смертність від менінгіту вона склала 20% дорослого населення; при менінгококової інфекції - 16,2%, при пневмококової - 25,9%.

Стрептококи групи В і Listeria monocytogenes є причиною бактеріального менінгіту у дітей в неонатальному періоді (1-3% від усіх випадків менінгіту у дітей). Listeria monocytogenes є причиною менінгіту у літніх, ослаблених хворих і пацієнтів з імунодефіцитом на фоні нейтропенії. У пацієнтів з шунтами найважливішими етіологічними чинниками захворювання є коагулазо-негативні стафілококи, Staphylococcus aureus, Enterobacteriaceae, P. aeruginоsa.

В етіологічній структурі нозокоміального менінгіту дуже велику проблему представляють грамнегативні бактерії. Їх частка у розвитку нозокоміальної інфекції ЦНС становить більше 30% в порівнянні з 2-4% грамнегативних збудників в етіології негоспітального менінгіту. На жаль, більшість виділених штамів - ентеробактерії, K. pneumoniae, P.aeruginosa, Serratia spp., Acinetobacter baumannii, Salmonella групи B і D, Proteus mirabilis - полірезистентністю до використовуваних для терапії менінгіту антибіотиків.

Ентерококовий менінгіт у новонароджених - доволі рідкісне, але підступне захворювання. Ризик ентерококкової інфекції ЦНС зростає у хворих після нейрохірургічних втручань.

Частка післяопераційних менінгітів - 1,8%. Серед етіологічної структури переважають S.aureus, P. aeruginosa, K. pneumoniae і рідше – ентеробактерії.

Необхідно пам'ятати, при вторинному менінгіті розвиваються як ускладнення патології ЛОР-органів, і перш за все - середній отит. Частота даного ускладнення - 22% серед усіх випадків бактеріального менінгіту.

Характеристика збудників гнійних бактеріальних менінгітів Haemophilus influenzae

Всі гнійні бактеріальні менінгіти класифікують:

за етіологією:

- менінгококовий,

• пневмококовий,

• стафілококовий,

• гемофільний,

• стрептококовий,

• ентерококовий,

• сальмонельозний, тощо;

за патогенезом:

• первинний

• вторинний;

за тяжкістю:

• середньотяжкий,

• тяжкий;

за перебігом:

• гострий (до 1 міс.),

• затяжний чи підгострий (понад 1 міс.);

• з ускладненнями;

• без ускладнень.

Діагностичні критерії випадку менінгіту:

Клінічні:

• загальноінфекційний синдром;

• менінгеальний синдром.

Менінгеальний синдром включає:

- Гідроцефально-гіпертензійні симптоми: різкий головний біль дифузного характеру, повторна блювота, загальна гіперестезія;

- Менінгеальні симптоми: менінгеальна поза, тонічне напруження м'язів спини, ригідність м'язів потилиці, позитивні симптоми Керніга і Брудзинського (верхній, середній, нижній);

- у дітей раннього віку - вибухання (рідко втягнення) і напруження тім’ячка, позитивний симптом Лесажа, закидання голови назад.

Згідно "Визначника бактерій Берджі" Haemophilus influenzae поряд з іншими численними представниками (більше 15 видів) відносять до роду Haemophilus, який входить в сімейство Pasteurellaceae (підгрупа 3), відносяться до 5 групи мікроорганізмів, що включає всі факультативно-анаеробні грамнегативні палички. З організму людини можна виділити 8 видів гемофілії, причому тільки 2 з них - Haemophilus influenzae та Haemophilus duckreyi є основними патогенами людини.

Haemophilus influenzae - Невеликі (0,3 - 0,4 * 1 - 1,5 мкм) грамнегативні, сферичні, овальні і паличкоподібні клітини. Іноді утворюють нитки і мають помітний поліморфізм, особливо в матеріалі від хворих, які отримували ОІ-лактамні антибіотики. Гемофілії нерухомі, спор не утворюють, повільно забарвлюються аніліновими барвниками. Каталазопозитивні.

Haemophilus influenzae - Факультативний анаероб, добре росте на повітрі. Більшість видів Haemophilus при культивуванні вимагають присутності в живильному середовищі X і/або V факторів. Термостабільний фактор росту X (гемин) утворюється з гема шляхом заміни двовалентного іону заліза на тривалентний. Гем, в свою чергу, у великій кількості міститься в еритроцитах, входячи до складу гемоглобіну. Фактор V - це термолабільний кофермент нікотинамідаденіндинуклеотид (НАД), який бере участь у окисно-відновних реакціях бактеріальних клітин. Фактор V синтезується рядом бактерій (наприклад стафілококами, Нейссера і іншими) і присутній в тваринних клітинах, в тому числі в еритроцитах. Додавання в поживне середовище НАД задовільняє потребу мікроорганізмів в факторі V.

Haemophilus influenzae потребує як в X, так і в V факторах росту. Температурні межі росту гемофілії +24 - +43 В° С, оптимальна +37 В° С. Виходячи з того, що гемофілії для культивування необхідні фактори росту (X і/або V), оптимальним середовищем є "шоколадний" агар, в який входить кров, що містить X і V фактори, що виділяються при термічному руйнуванні еритроцитів. В Залежно від стану популяції на поживних середовищах капсульні штами Haemophilus influenzae формує слизові М-колонії (соковиті, сіруваті, з райдужним забарвленням в минаючому світлі) або блискучі S-колонії (напівпрозорі). Безкапсульні штами на твердих середовищах формують дуже дрібні R-колонії (з нерівним краєм, без райдужного забарвлення в прохідному світлі, сірувато-білого кольору). Капсульні бактерії Haemophilus influenzae містять капсульний полісахарид одного з 6 типів (а, b, с, d, e, f), які відрізняються за складом входять до нього вуглеводів і антигенних властивостях.

Основну епідеміологічну небезпеку являє Haemophilus influenzae типу В, так як викликає важкі менінгіти, сепсис, пневмонії та інші інфекційні захворювання. Капсульний антиген Hib складається з полірибозилрибітолфосфата (PRP або ПРФ). Ідентифікація Haemophilus influenzae по ферментативної і метаболічної активності представляє певні труднощі через значні відмінності показників різних штамів одного і того ж виду. Однак, визначення метаболізму індолу, уреази та орнітиндекарбоксилази (ОДС) є необхідною умовою для біотипування Hib, яке дозволяє визначити біотип з I по VIII.

Neisseria meningitidis

Збудником менінгококової інфекції є менінгокок (Neisseria meningitis), якого відносять до роду нейссерій, включеному (згідно "Визначника бактерій Берджі ") до складу 4-ї групи мікроорганізмів, названій як "Грамнегативні, аеробні/мікроаерофільні палички і коки". Рід нейссерій включає два види патогенних мікроорганізмів: N.meningitis і N. gonorrhoeae, інші представники цього роду є резидентною флорою слизових оболонок. До останніх відносяться пігментоутворюючі, об'єднані в один вид N.subflava, а також N.sicca, N.mucosa, N.flavescens, N.lactamica. Катаральний диплококк виділений в рід Вranhamella, що включає: B.catarrhalis, B.caviae, B.ovis і B.cuniculi.

Менінгококи вимогливі до умов культивування. При рості вимагають підвищеної вологості і 5-10% вмісту СО 2 в повітрі, чутливі до найменших відхилень температури. В якості джерела нативного білка рекомендується застосовувати сироватку великої рогатої худоби, кінську або кров будь-якого іншого тварини. Основою для приготування середовищ можуть служити бульйони на основі гідролізату м'яса по Хоттінгеру, еритро-агар, агар АГВ, сухий поживний агар спеціального призначення. Сухі поживний агар, а також сироватка крові повинні бути обов'язково перевірені на придатність для культивування менінгокока. Перевірку виконувати зі свіжовиділеною культурою або еталонним штамом менінгокока, що зберігався у висушеному стані.

Морфологічно клітини менінгококів мають округлу форму і розміри близько 0,6-1,0 мкм. Величина мікробних клітин та їх форма можуть відрізнятися, що визначає характерну для менінгококів ознаку клітинного "поліморфізму". Ця ознака особливо виражена в мазках зі свіжих культур, при цьому загальна морфологічна картина культурального мазка, пофарбованого за Грамом, має вигляд безладно лежачих поліморфних (за величиною і забарвленням) грамнегативних коків (Ефект "розсипаного гороху"). Парне розташування менінгококів (Диплококів) спостерігають у препаратах, приготовлених з рідин і органів ураженого організму. У спинномозковій рідині менінгококи часто розташовуються внутрішньолейкоцитарно і мають форму кавового зерна.

Антигенна структура менінгокока складна і включає капсульний полісахарид, ліпополісахарид, білки зовнішньої та внутрішньої мембран клітинної стінки. Сучасними дослідженнями показана можливість менінгококів самостійно секретувати в навколишнє середовище ряд антигенів (наприклад, імуноглобулін А 1 - протеаза), які відіграють провідну роль у формуванні вірулентних властивостей менінгококів.

Менінгококи нерухомі, спор не утворюють, джгутиків не мають, є строгими аеробами, надзвичайно чутливі до впливу зовнішнього середовища. При зростанні на щільних поживних середовищах утворюють невеликі, злегка опуклі, напівпрозорі колонії з ідеально рівними краями. При витримуванні посівів в термостаті протягом 2 - 5 днів колонії збільшуються в розмірі, стають менш прозорими і краї їх набувають нерівного виду.

Біохімічна активність менінгококів невелика і з числа багатьох вуглеводів вони ферментують тільки глюкозу і мальтозу з утворенням кислоти без газу, не розріджують желатин, оксидазопозитивні, каталазопозитивні.

Відповідно до особливостей будови полісахаридної капсули менінгококи підрозділяють на 12 серогрупп: А, В, С, X, Y, Z, W-135, 29-Е, К, Н, L, I. Особливе епідеміологічне значення мають менінгококи серогрупи А, В, С, які здатні викликати епідемії та найбільш часто виділяються від хворих генералізованими формами менінгококової інфекції. Інші серогрупи можуть викликати захворювання, але частіше виділяються з носоглотки носіїв.

Визначення серогрупової характеристики менінгококів є найважливішою складовою в системі епідеміологічного нагляду за менінгококову інфекцію. Відповідні сучасні класифікації менінгококів за різними антигенними системам (білки, ліпополісахариди, пили та інші) дозволяють визначати їх популяційні особливості і відбирати найбільш імуногенні компоненти для конструювання вакцинних препаратів нового покоління.

Streptococcus pneumoniae

Збудником пневмококових менінгітів є Streptococcus pneumoniae або пневмокок, який входить до склад роду Streptococcus (група стрептококів ротової порожнини), включених в 17-ю групу "Грампозитивні коки".

Це овальні, іноді витягнуті уздовж осі ланцетоподібні коки, діаметром 0,5 -1,0 мкм, розташовуються парами і оточені загальною капсулою.

Будова клітинної стінки пневмококів типово для грампозитивних бактерій. Її основою є пептидоглікан з вбудованими вуглеводами, тейхоєвими кислотами, ліпопротеїнами та поверхневими білками. Пневмококи нерухомі, спор не утворюють, є факультативними анаеробами, хемоорганотрофами. Для культивування пневмококи потребують багаті поживні середовища, капнофільні умови (5 - 10% СО 2 ). Температурний оптимум +37 В° С. Каталазонегативні.

З усіх патогенністю володіють H. influenzae , вперше описані Пфейффером в 1892 р. Цей збудник є найбільш частим агентом важких генералізованих форм захворювань, особливо у дітей до 5 років. ГБМ у дорослих можуть бути обумовлені іншими серологічними типами.

Пневмококки і гемофілії, як і менінгококи, є високо вимогливими до культивування мікроорганізмами. В якості чинника, що сприяє їх зростанню використовують кров різного походження. Тому універсальною середовищем для всіх збудників може служити "шоколадний" агар.

Для проведення бактеріологічної діагностики гнійних бактеріальних менінгітів необхідно забезпечити забір матеріалу від хворих в повному обсязі з дотриманням: термінів забору, доставки патологічного матеріалу та умов транспортування.

В бактеріологічну лабораторію доставляється матеріал у такому обсязі:

1. Ліквор для первинного посіву, бактеріоскопії і серологічних досліджень у кількості не менше 1,0 мл.

2. Ліквор в 0.1% напіврідкому агарі (середа "збагачення") для бактеріологічного накопичення культури, 0,5 мл ліквору засівають в 5,0 мл напіврідкого агару негайно біля ліжка хворого.

3. "Товста крапля "крові для бактеріоскопії.

4. Кров в рідкому живильному середовищі або в 0,1% напіврідкому агарі (середовище збагачення) для бактеріологічного накопичення культури, 5,0 мл крові засівають в 50,0 мл середовища збагачення.

5. Кров в кількості не менше 2-х мл для серологічних досліджень (РПГА, ВІЕФ, ЛА та ін.)

Матеріал для бактеріологічних і серологічних досліджень доставляється в бактеріологічну лабораторію негайно після забору в теплому вигляді (t 0 = +37 0 С) в спеціально обладнаних контейнерах.

При неможливості негайної доставки допускається зберігання патологічного матеріалу в умовах термостату при +37 0 С протягом 18 годин.