- •Утверждено
- •II. Показания к применению метода
- •III. Возможности метода микроскопического исследования при выявлении кислотоустойчивых микобактерий
- •IV.Сбор диагностического материала
- •V. Организация рабочего места и оборудование, необходимое для микроскопических исследований
- •VI. Транспортировка диагностического материала
- •VII. Правила работы с диагностическим материалом
- •7.1 Прием диагностического материала
- •VIII. Приготовление мазков для микроскопических исследований
- •8.1. Подготовка предметных стекол
- •8.2. Приготовление мазков из нативного материала
- •8.3. Приготовление мазка из осадка необработанного нативного материала
- •8.4. Фиксация мазков
- •IX.Методы окраски диагностических препаратов
- •9.1. Окраска препаратов для световой микроскопии по методу Ziehl–Neelsen
- •9.2. Оборудование и реактивы для окраски по методу Ziehl–Neelsen
- •Процедура окраски.
- •X.Техника микроскопического исследования препарата
- •XI. Учет и интерпретация результатов микроскопического исследования
- •XII. Регистрация результатов исследования
- •XIII. Метод люминесцентной микроскопии
- •13.1. Метод окраски аурамином оо и родамином с
- •13.2. Метод окраски аурамином о
- •XIV. Причины возможных ошибок при выполнении микроскопических исследований
- •14.1. Ложноположительные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
- •14.2. Ложноотрицательные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
- •Возможные причины неисправностей при проведении микроскопии и способы их устранения
- •XV. Контроль и обеспечение качества микроскопического выявления кислотоустойчивых микобактерий
- •XVI. Меры безопасности при работе с инфекционным материалом
- •Правила сбора мокроты.
- •Направление на бактериоскопическое исследование
- •Лабораторный журнал регистрации результатов бактериоскопических исследований
- •Перечень лабораторного оборудования, расходных материалов, реактивов и инструментария для бактериоскопических исследований.
- •Результаты бактериоскопического исследования
- •Форма для оценки работы лаборатории при внешнем контроле качества
- •Расчет числа ложноположительных и ложноотрицательных результатов.
V. Организация рабочего места и оборудование, необходимое для микроскопических исследований
В лаборатории, функции которой ограничены только микроскопическим исследованием мазков из нативного материала, используется световая микроскопия. Микроскопическое исследование на КУМ должно проводиться в отдельной комнате с соблюдением правил безопасности, поточности движения при обработке материала. В объединенных клинико-диагностических лабораториях для микроскопических исследований на КУМ должно выделяться отдельное помещение. Стены, потолки и полы должны быть покрыты гладким, неадсорбирующим материалом, который можно легко мыть и дезинфицировать. Кроме того, этот материал должен быть устойчивым к химическим реактивам, используемым в лаборатории. Пол не должен быть скользким, межкомнатные пороги должны отсутствовать.
В помещении для микроскопии должно быть четыре зоны:
зона для приема и регистрации диагностического материала;
зона для приготовления и окраски мазков;
рабочее место для микроскопии;
место для регистрации результатов исследований.
Диагностический материал поступает в лабораторию через окно для приема на специальный стол. На этом столе должен иметься специальный леток дезинфицируемый лоток, на котором проводят осмотр флаконов с материалом. Помещение должно иметь по крайней мере 2 раковины (или одну раковину с двумя отделениями – для окраски мазков и для мытья рук) и четыре стола или 4 изолированных рабочих места. Прием следует проводить в одноразовых перчатках. Необходимо проверить нет ли повреждений флаконов (трещин, сколов), следов протечки материала на поверхность. В случае разбивания флаконов во время транспортировки, при наличии следов протечки необходимо уничтожить (автоклавирование или кипячение) поврежденный флакон, продезинфицировать наружную и внутреннюю поверхность транспортного бикса тампоном, смоченным дезинфектантом, обладающим микобактерицидным действием, например, 5%-ным раствором фенола.
Вносят подробные сведения о каждом пациенте с описанием характера мокроты в лабораторный журнал регистрации бактериоскопических исследований (Приложение 3). Затем материал передают в основную рабочую зону для приготовления мазков.
Рекомендуемый список оборудования, реактивов и расходных материалов, необходимых для работы лаборатории, осуществляющих прямую микроскопию мазка мокроты представлен в приложении 4.
VI. Транспортировка диагностического материала
Если в данном учреждении не проводятся микроскопические исследования на выявление кислотоустойчивых микобактерий, собранный материал должен как можно быстрее централизованно доставляться в лабораторию.
До момента отправки в лабораторию герметично закрытые флаконы с материалом хранятся в холодильнике не более 48-72 часов. При более длительном хранении необходимо применять консервирующие средства.
Для транспортировки материала рекомендуется пользоваться биксами или специальными транспортировочными ящиками (контейнерами) с мягкими легко стерилизующимися прокладками на дне и с гнездами или прокладками для флаконов. Флаконы должны быть закреплены в транспортировочных ящиках в вертикальном положении, быть плотно закупорены или снабжены завинчивающимися крышками. Мазки для микроскопического исследования транспортируются в специальных планшетах. Для предохранения от перекрестной контаминации при транспортировке они не должны касаться друг друга.
Каждая проба материала должна быть промаркирована, иметь соответствующее направление, а вся партия – заполненный сопроводительный лист, в котором должны быть указаны необходимые данные каждого пациента. Категорически запрещается заворачивать флакон с материалом.
Идентификационный номер пробы материала должен быть нанесен на этикетки или боковую поверхность контейнера с материалом, во избежание ошибок при последующих манипуляциях не допускается нанесение маркировки на крышку флакона.
Сопроводительный лист составляется в 2-х экземплярах, один экземпляр передается в лабораторию, другой – с подписью сотрудника, принявшего материал для исследования, возвращается в учреждение направившее материал в лабораторию. В сопроводительном листе должны быть указаны дата и время отправки материала и подпись сотрудника ответственного за отправку.
При поступлении материла, не отвечающего вышеуказанным требованиям, а также при отсутствии направления и/или маркировки (этикетки) на флаконе с материалом он подлежит уничтожению с обязательным извещением об этом учреждения, направившего материал.