- •Утверждено
- •II. Показания к применению метода
- •III. Возможности метода микроскопического исследования при выявлении кислотоустойчивых микобактерий
- •IV.Сбор диагностического материала
- •V. Организация рабочего места и оборудование, необходимое для микроскопических исследований
- •VI. Транспортировка диагностического материала
- •VII. Правила работы с диагностическим материалом
- •7.1 Прием диагностического материала
- •VIII. Приготовление мазков для микроскопических исследований
- •8.1. Подготовка предметных стекол
- •8.2. Приготовление мазков из нативного материала
- •8.3. Приготовление мазка из осадка необработанного нативного материала
- •8.4. Фиксация мазков
- •IX.Методы окраски диагностических препаратов
- •9.1. Окраска препаратов для световой микроскопии по методу Ziehl–Neelsen
- •9.2. Оборудование и реактивы для окраски по методу Ziehl–Neelsen
- •Процедура окраски.
- •X.Техника микроскопического исследования препарата
- •XI. Учет и интерпретация результатов микроскопического исследования
- •XII. Регистрация результатов исследования
- •XIII. Метод люминесцентной микроскопии
- •13.1. Метод окраски аурамином оо и родамином с
- •13.2. Метод окраски аурамином о
- •XIV. Причины возможных ошибок при выполнении микроскопических исследований
- •14.1. Ложноположительные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
- •14.2. Ложноотрицательные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
- •Возможные причины неисправностей при проведении микроскопии и способы их устранения
- •XV. Контроль и обеспечение качества микроскопического выявления кислотоустойчивых микобактерий
- •XVI. Меры безопасности при работе с инфекционным материалом
- •Правила сбора мокроты.
- •Направление на бактериоскопическое исследование
- •Лабораторный журнал регистрации результатов бактериоскопических исследований
- •Перечень лабораторного оборудования, расходных материалов, реактивов и инструментария для бактериоскопических исследований.
- •Результаты бактериоскопического исследования
- •Форма для оценки работы лаборатории при внешнем контроле качества
- •Расчет числа ложноположительных и ложноотрицательных результатов.
XVI. Меры безопасности при работе с инфекционным материалом
Каждый медицинский работник отвечает за собственную безопасность и безопасность своих коллег по работе.
Расположение рабочих зон, оборудования и реагентов должно быть постоянным в соответствии с последовательностью выполнения работы и соблюдения эпидемиологической цепочки.
Весь персонал должен работать в медицинском халате, застегивающемся сзади, медицинском колпаке. При работе с инфекционным материалом необходимо пользоваться резиново-клеенчатым передником, одноразовыми резиновыми перчатками, точно выполнять технические приемы и соблюдать меры предосторожности предусмотренные правилами исследования, особенно при сборе и открывании флаконов с материалом. Матерчатые или бумажные лицевые маски (например, хирургические) предотвращают распространение микроорганизмов, захватывая крупные жидкие частицы около рта или носа, но не обеспечивают защиту медработника от вдыхания подсохших, взвешенных в воздухе капельных ядер аэрозоля.
Медицинским работникам противотуберкулезных учреждений и лабораторий рекомендуется использовать респираторы, обеспечивающие 95% задержку аэрозольных частиц диаметром 0,3 мкм.
При работе с мокротой следует сводить к минимуму выполнение лабораторных манипуляций, которые создают инфицирующие аэрозоли с капельными ядрами диаметром от 1 до 5 мкм. К появлению аэрозолей в лаборатории приводят:
открывание флаконов с мокротой, что особенно опасно в тех случая, когда мокрота затекла и высохла между крышкой и стенкой флакона;
взбалтывание перед открыванием флакона;
приготовление мазков на предметных стеклах;
прожигание неочищенных от остатков материала бактериологических петель, используемых для переноса материала на стекло;
фиксирование над горелкой невысохшего, влажного мазка, что приводит к вскипанию и разбрызгиванию частичек материала;
попадания капель материала на рабочую поверхность стола при отсутствии последующей дезинфекции.
При этом необходимо иметь в виду, что приготовление мазков для микроскопических исследований является одной из самых эпидемически опасных процедур.
Сбор мокроты не должен проводится в лаборатории. В целях максимальной защиты лаборантов от заражения необходимо приготовление и фиксацию мазков проводить в вытяжном шкафу, микроскопию мазков проводить отдельно от места их приготовления. В лаборатории необходимо иметь раковину с проточной водопроводной водой. Для защиты персонала лабораторий от инфицирующих частиц необходима система вытяжной вентиляции и использование бактерицидных ламп ультрафиолетового облучения. Рабочее помещение должно содержаться в чистоте и обеззараживаться бактерицидными лампами (не менее 40 мин перед началом работы и в конце рабочего дня). Запрещается принимать пищу и курить за рабочим столом. Манипуляции следует выполнять только на лотке, который необходимо стерилизовать каждый день после использования либо огнем, либо обработкой 5% раствором фенола. Во время приготовления мазков окна и двери лаборатории должны быть закрыты. Случайно залитые или забрызганные заразным материалом места на столах, полу и пр. необходимо немедленно залить дезинфицирующим раствором и оставить его на месте в течении не менее 1 часа, включить вытяжную вентиляцию, покинуть комнату, либо обработать тампоном смоченным 70° спиртом и прожечь.
После прикосновения руками к заразному материалу необходимо немедленно их дезинфицировать. Это надо делать также перед уходом из лаборатории.
По окончании манипуляций с заразным материалом предметы подлежат немедленной дезинфекции (погружаются или заливаются хлорсодержащим раствором на 4 часа). Поверхности столов и лотков должны протираться раствором соответствующего дезинфицирующего средства, например, 5% раствор хлорамина 2 раза в день (перед началом работы и после ее окончания). После окончания препарирования окна и двери должны быть открыты для проветривания.
Флаконы или плевательницы с мокротой складывают в бак или ведро для обеззараживания. Лабораторную посуду, бывшую в употреблении, дезинфицируют путем кипячения в течении 30 минут с момента закипания в мыльно-содовом растворе. Лабораторная посуда должна быть полностью покрыта кипящей жидкостью. После кипячения лабораторную посуду моют для повторного использования. Возможна также стерилизация лабораторной посуды путем автоклавирования или дезинфекция путем погружения в один из дезрастворов. Пинцеты, сушилки, мостики, кюветы обрабатывают пламенем или заливают дезинфицирующим раствором (5% раствора карболовой кислоты). Резиновые перчатки после выполнения работы автоклавируются и выбрасываются.
Внутренняя поверхность транспортировочных коробок или биксов, в которых доставляется материал, очищаются ватными тампонами, пропитанными дезраствором. Халаты, полотенца, маски обеззараживают путем замачивания в дезинфицирующем 5% растворе хлорамина в течении 4 часов (5 литров раствора на 1 кг белья) или в 1% активированном растворе хлорамина в течении 2 часов. После этого белье кипятят около 30 минут, а затем стирают обычным способом.
У каждого рабочего места должны быть вывешены методические инструкции по проведению выполняемых на этом месте рабочих процедур. Все манипуляции на каждом рабочем месте должны выполняться в строгом соответствии с инструкцией. Любые изменения в инструкции вносятся только по указанию заведующего лабораторией и должны быть завизированы его подписью с указанием даты изменения методики. Все документы должны храниться в течение 2 лет.
Приложение 1
