- •Утверждено
- •II. Показания к применению метода
- •III. Возможности метода микроскопического исследования при выявлении кислотоустойчивых микобактерий
- •IV.Сбор диагностического материала
- •V. Организация рабочего места и оборудование, необходимое для микроскопических исследований
- •VI. Транспортировка диагностического материала
- •VII. Правила работы с диагностическим материалом
- •7.1 Прием диагностического материала
- •VIII. Приготовление мазков для микроскопических исследований
- •8.1. Подготовка предметных стекол
- •8.2. Приготовление мазков из нативного материала
- •8.3. Приготовление мазка из осадка необработанного нативного материала
- •8.4. Фиксация мазков
- •IX.Методы окраски диагностических препаратов
- •9.1. Окраска препаратов для световой микроскопии по методу Ziehl–Neelsen
- •9.2. Оборудование и реактивы для окраски по методу Ziehl–Neelsen
- •Процедура окраски.
- •X.Техника микроскопического исследования препарата
- •XI. Учет и интерпретация результатов микроскопического исследования
- •XII. Регистрация результатов исследования
- •XIII. Метод люминесцентной микроскопии
- •13.1. Метод окраски аурамином оо и родамином с
- •13.2. Метод окраски аурамином о
- •XIV. Причины возможных ошибок при выполнении микроскопических исследований
- •14.1. Ложноположительные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
- •14.2. Ложноотрицательные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
- •Возможные причины неисправностей при проведении микроскопии и способы их устранения
- •XV. Контроль и обеспечение качества микроскопического выявления кислотоустойчивых микобактерий
- •XVI. Меры безопасности при работе с инфекционным материалом
- •Правила сбора мокроты.
- •Направление на бактериоскопическое исследование
- •Лабораторный журнал регистрации результатов бактериоскопических исследований
- •Перечень лабораторного оборудования, расходных материалов, реактивов и инструментария для бактериоскопических исследований.
- •Результаты бактериоскопического исследования
- •Форма для оценки работы лаборатории при внешнем контроле качества
- •Расчет числа ложноположительных и ложноотрицательных результатов.
XIV. Причины возможных ошибок при выполнении микроскопических исследований
Снижают результативность микроскопических исследований на туберкулез:
несоблюдение показаний к данному виду обследования, связанное с недостаточной подготовленностью врачей общей практики по тактике выявления туберкулеза в современных условиях;
плохое материальное оснащение лабораторий (отсутствие бинокулярных микроскопов);
операторские ошибки;
отсутствие маркировки на стекле или повреждение ее в процессе окраски;
неправильная регистрация результатов;
неправильная маркировка флаконов с материалом;
недостаточная подготовка персонала лабораторий.
14.1. Ложноположительные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
плохая обработка многоразовых флаконов для сбора материла, в которых могут оставаться микобактерии;
повторное использование предметных стекол после положительного предыдущего мазка;
использование загрязненных бактериологических петель или деревянных палочек;
волокна шерсти, хлопка, фильтровальной бумаги, пыльца некоторых видов сосны, которая может обнаруживаться в виде коротких кокковидных палочек;
использование предметных стекол с царапинами и другими дефектами;
использование непрофильтрованного или длительного сохранявшегося раствора фуксина, содержащего кристаллы;
неправильное подогревание фуксина, испаряясь, фуксин может кристаллизоваться на стекле;
недостаточное обесцвечивание мазков, что может привести к сохранению красного окрашивания некоторых сапрофитных бактерий;
наличие микобактерий в иммерсионном масле, если иммерсионные линзы не были очищены после положительных препаратов или иммерсионное масло загрязнено микобактериями, если пипетка которой оно наносится на стекло, соприкасалась с положительным мазком.
14.2. Ложноотрицательные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
плохим качеством или недостаточным количеством исследуемого материала;
исследованием слюны вместо мокроты;
неудачным выбором частиц мокроты для приготовления мазка;
нарушением условий хранения, транспортировки, консервации материала (воздействие на материал прямого солнечного света или ультрафиолетового излучения под влиянием которых микобактерии могут утрачивать присущую им кислотоустойчивость);
приготовлением слишком тонкого или толстого мазка, плохой его фиксацией или несоблюдением режимов окрашивания;
нарушением методики просмотра мазка (малое число просмотренных полей зрения);
плохим качеством красителей и реагентов;
при повторном просмотре мазков ложноотрицательный результат может быть обусловлен, тем, что после первичного просмотра с препарата не было удалено иммерсионное масло, которое при длительном воздействии обесцвечивает окраску;
хранение окрашенных мазков в месте доступном прямым солнечным лучам или ультрафиолетовому свету.
Возможные причины неисправности при микроскопии и способы их устранения представлены в табл. 3.
Таблица 3
Возможные причины неисправностей при проведении микроскопии и способы их устранения
Возможные неисправности |
Причина возникновения |
Способы устранения |
Поле зрения нечеткое. |
Низкое расположение конденсора. Закрытая диафрагма конденсора. |
Поднять конденсор. Открыть диафрагму. |
Темные объекты в поле зрения, смещающиеся при повороте окуляра. |
Загрязнение окуляра либо царапины на линзах окуляра. Линзы контаминированы грибами. |
Необходимо очистить окуляр либо заменить его. |
Изображение недостаточно четкое. |
Препарат перевернут (мазок снизу). Загрязнение линз. Плохое качество иммерсионного масла, либо в масле находится пузырек воздуха. |
Перевернуть предметное стекло. Использовать масло хорошего качества. Очистить линзы. |
Изображение нечеткое при малом увеличении. |
Линзы запачканы маслом либо поверхности линз загрязнены. Линзы повреждены. |
Очистить либо заменить поврежденные линзы |
Противопоказания к применению метода микроскопических исследований для выявления кислотоустойчивых микобактерий.
Противопоказаний к применению метода нет.
