- •Утверждено
- •II. Показания к применению метода
- •III. Возможности метода микроскопического исследования при выявлении кислотоустойчивых микобактерий
- •IV.Сбор диагностического материала
- •V. Организация рабочего места и оборудование, необходимое для микроскопических исследований
- •VI. Транспортировка диагностического материала
- •VII. Правила работы с диагностическим материалом
- •7.1 Прием диагностического материала
- •VIII. Приготовление мазков для микроскопических исследований
- •8.1. Подготовка предметных стекол
- •8.2. Приготовление мазков из нативного материала
- •8.3. Приготовление мазка из осадка необработанного нативного материала
- •8.4. Фиксация мазков
- •IX.Методы окраски диагностических препаратов
- •9.1. Окраска препаратов для световой микроскопии по методу Ziehl–Neelsen
- •9.2. Оборудование и реактивы для окраски по методу Ziehl–Neelsen
- •Процедура окраски.
- •X.Техника микроскопического исследования препарата
- •XI. Учет и интерпретация результатов микроскопического исследования
- •XII. Регистрация результатов исследования
- •XIII. Метод люминесцентной микроскопии
- •13.1. Метод окраски аурамином оо и родамином с
- •13.2. Метод окраски аурамином о
- •XIV. Причины возможных ошибок при выполнении микроскопических исследований
- •14.1. Ложноположительные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
- •14.2. Ложноотрицательные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
- •Возможные причины неисправностей при проведении микроскопии и способы их устранения
- •XV. Контроль и обеспечение качества микроскопического выявления кислотоустойчивых микобактерий
- •XVI. Меры безопасности при работе с инфекционным материалом
- •Правила сбора мокроты.
- •Направление на бактериоскопическое исследование
- •Лабораторный журнал регистрации результатов бактериоскопических исследований
- •Перечень лабораторного оборудования, расходных материалов, реактивов и инструментария для бактериоскопических исследований.
- •Результаты бактериоскопического исследования
- •Форма для оценки работы лаборатории при внешнем контроле качества
- •Расчет числа ложноположительных и ложноотрицательных результатов.
XI. Учет и интерпретация результатов микроскопического исследования
Основным диагностическим материалом для бактериоскопии на КУМ служит мокрота. Результаты бактериоскопического исследования на КУМ других биологических материалов (различных жидкостей, биоптатов, гноя, мочи и т.д.) имеют ограниченное значение. Так, исследование мазков из осадка центрифугированной мочи не всегда позволяет получить достоверные результаты, поскольку в моче могут присутствовать нетуберкулезные микобактерии. Этот факт в некоторых случаях объясняется неправильным сбором материала. В мазках из осадка промывных вод желудка и других материалов могут обнаруживаться кислотоустойчивые сапрофиты, которые легко спутать с МБТ. Поэтому при необходимости выявления возбудителя туберкулеза в различных биологических материалах рекомендуется использовать культуральный метод исследования.
Результат микроскопического исследования позволяет сделать заключение только о наличии или отсутствии в препарате кислотоустойчивых микобактерий. Микроскопическое исследование на КУМ не позволяет дифференцировать микобактерии комплекса Mycobacterium tuberculosis (возбудителя туберкулеза) от нетуберкулезных (атипичных) микобактерий, а также кислотоустойчивых сапрофитов. Достоверный диагноз может быть установлен только после выделения из клинического материала и идентификации культуры туберкулезных микобактерий с использованием культурального метода. Отрицательный результат бактериоскопического исследования не исключает туберкулеза, так как в мокроте некоторых пациентов может содержаться меньше микобактерий, чем позволяет выявить бактериоскопия. Чтобы обнаружить микобактерии туберкулеза при проведении бактериоскопии в 1мл мокроты должно содержаться 5000-10000 и более бактериальных клеток. Причиной отрицательного результата микроскопического исследования может быть плохая подготовка мазков мокроты.
Количество обнаруженных КУМ определяет тяжесть заболевания и степень эпидемической опасности больного. Следовательно, исследование должно быть не только качественным, но и количественным. Регистрация результатов с указанием количества обнаруженных КУМ проводится в соответствии с таблицей 1.
Таблица 1.
Градация результатов микроскопического исследования
при окраске по методу Ziehl – Neelsen.
Количество кислотоустойчивых микобактерий (КУМ) |
Минимальное число иммерсионных полей зрения, обязательных для просмотра |
Форма записи результатов |
Интерпретация результатов исследования |
КУМ не обнаружены в 300 полях зрения |
300 |
Отр. |
Отрицательный |
1-2 КУМ в 300 п/з |
300 |
Рекомендуется повторить исследование |
Результат не оценивается |
От 1 до 9 КУМ в 100 п/з |
100 |
Указать точное количество (1-9 КУМ в 100 п/з) |
Положительный |
От 10 до 99 КУМ в 100 п/з |
100 |
1+ |
Положительный |
От 1 до 10 КУМ в 1 п/з |
50 |
2+ |
Положительный |
Более 10 КУМ в 1 п/з |
20 |
3+ |
Положительный |
Соответствие градаций: точное число - единичные КУМ в препарате; 1+ - единичные КУМ в поле зрения; 2+ - умеренное количество КУМ; 3+ - значительное количество КУМ.
