
- •Утверждено
- •II. Показания к применению метода
- •III. Возможности метода микроскопического исследования при выявлении кислотоустойчивых микобактерий
- •IV.Сбор диагностического материала
- •V. Организация рабочего места и оборудование, необходимое для микроскопических исследований
- •VI. Транспортировка диагностического материала
- •VII. Правила работы с диагностическим материалом
- •7.1 Прием диагностического материала
- •VIII. Приготовление мазков для микроскопических исследований
- •8.1. Подготовка предметных стекол
- •8.2. Приготовление мазков из нативного материала
- •8.3. Приготовление мазка из осадка необработанного нативного материала
- •8.4. Фиксация мазков
- •IX.Методы окраски диагностических препаратов
- •9.1. Окраска препаратов для световой микроскопии по методу Ziehl–Neelsen
- •9.2. Оборудование и реактивы для окраски по методу Ziehl–Neelsen
- •Процедура окраски.
- •X.Техника микроскопического исследования препарата
- •XI. Учет и интерпретация результатов микроскопического исследования
- •XII. Регистрация результатов исследования
- •XIII. Метод люминесцентной микроскопии
- •13.1. Метод окраски аурамином оо и родамином с
- •13.2. Метод окраски аурамином о
- •XIV. Причины возможных ошибок при выполнении микроскопических исследований
- •14.1. Ложноположительные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
- •14.2. Ложноотрицательные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
- •Возможные причины неисправностей при проведении микроскопии и способы их устранения
- •XV. Контроль и обеспечение качества микроскопического выявления кислотоустойчивых микобактерий
- •XVI. Меры безопасности при работе с инфекционным материалом
- •Правила сбора мокроты.
- •Направление на бактериоскопическое исследование
- •Лабораторный журнал регистрации результатов бактериоскопических исследований
- •Перечень лабораторного оборудования, расходных материалов, реактивов и инструментария для бактериоскопических исследований.
- •Результаты бактериоскопического исследования
- •Форма для оценки работы лаборатории при внешнем контроле качества
- •Расчет числа ложноположительных и ложноотрицательных результатов.
Приложение 10
Утверждено
приказ Министерства здравоохранения Республики Беларусь
« » 2004 г. №
Инструкция
по унифицированным методам микроскопических
исследований для выявления кислотоустойчивых микобактерий в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений.
I. Общие положения
Микроскопическое исследование диагностического материала для обнаружения кислотоустойчивых микобактерий проводится с целью выявления наиболее эпидемически опасных больных туберкулезом – бактериовыделителей – среди лиц, обратившихся в медицинские учреждения с подозрительными в отношении туберкулеза клиническими и/или рентгенологическими симптомами.
Метод прямой бактериоскопии является наиболее быстрым, простым и дешевым методом выявления и оценки содержания кислотоустойчивых микобактерий (КУМ) в нативном диагностическом материале (чаще всего в мокроте) без предварительной обработки детергентами и гомогенизации. Исследование проводиться с помощью световой микроскопии мазков, окрашенных по Ziehl-Neelsen, или люминесцентной микроскопии с окраской флюорохромными красителями.
Преимущество бактериоскопии заключается в быстроте получения результата, относительной простоте, доступности исследования и экономической эффективности выявления больных туберкулезом.
II. Показания к применению метода
Метод осуществляется в клинико-диагностических лабораториях (КДЛ) всех лечебно-профилактических учреждений системы здравоохранения и ведомственных учреждений и остается одним из основных методов первичного этапа обследования лиц с подозрением на заболевание туберкулезом:
у лиц, обращающихся за медицинской помощью с респираторными жалобами и/или;
с симптомами интоксикации, характерными для туберкулеза;
у лиц с изменениями в легких, подозрительными на туберкулез, выявленными лучевыми методами;
при активном обследовании лиц, входящих в группы риска по заболеванию туберкулезом;
у лиц из контактов с больными туберкулезом, выделяющими микобактерии и/или имеющими соответствующие симптомы заболевания.
Первичное бактериоскопическое обследование наряду с данными анамнеза и клинико-рентгенологического обследования пациента входит в диагностический минимум при подозрении на заболевание туберкулезом. Следует помнить, что результаты бактериоскопии не могут быть единственным основанием при постановке клинического диагноза.
Обследование с целью выявления случаев заболевания туберкулезом должно включать оценку следующих основных симптомов:
-наличие продолжительного кашля (в течение 3-х и более недель) с выделением слизистой, слизисто-гнойной мокроты или мокроты с прожилками крови;
-кровохарканья и легочного кровотечения;
-болей в грудной клетке, связанных с дыханием.
-наличие интоксикационных симптомов более 2-3 недель;
-повышения температуры;
-слабость;
-повышенная потливость, особенно ночная потливость;
-потеря веса и др.
III. Возможности метода микроскопического исследования при выявлении кислотоустойчивых микобактерий
Пределы микроскопического исследования при окраске мазков по Ziehl-Neelsen позволяют выявить кислотоустойчивые микобактерии при их содержании порядка 5000-10000 и более микробных клеток в 1 мл мокроты. Такое количество микобактерий в мокроте, коррелирует с далеко зашедшими прогрессирующими формами туберкулеза. Больные на начальной стадии заболевания выделяют значительно меньшее количество микобактерий, что ниже предела обнаружения методом микроскопического исследования.
При первичном выявлении больного легочным туберкулезом необходимо исследование не менее 3-х проб мокроты. Результативность микроскопической диагностики легочного туберкулеза повышается при увеличении кратности обследования пациента. Установлено, что при однократном исследовании выявляется 80-83% бактериовыделителей, при двукратном – на 10-14% больше и при исследовании 3-х проб мокроты результативность возрастает еще на 5-8%.
Эффективность микроскопических исследований мокроты существенно возрастает, если контролируется качество собираемого материала. Нарушение технологии приготовления мазков может быть причиной отрицательного результата микроскопического исследования.
Отрицательный результат не исключает диагноз туберкулеза, так как в мокроте может содержатся количество микобактерий ниже предела обнаружения методом микроскопии. При положительных или сомнительных результатах первичного обследования, а также при отрицательных результатах, но при наличии клинико-рентгенологических данных, пациент направляется в противотуберкулезное учреждение для подтверждения или исключения диагноза туберкулеза.