харківський НАЦІОНАЛЬний медичний університет

НАВЧАЛЬНО-НАУКОВИЙ ІНСТИТУТ ПІСЛЯДИПЛОМНОЇ ОСВІТИ

кафедра медичної генетики

методичнІ ВКАЗІВКИ ДО практичного заняття

курсу за вибором

«сучасні методи генетичної діагностики»

для студентів 3 курсу МЕДИЧНИХ ФАКУЛЬТЕТІВ

НА ТЕМУ:

«Сучасні методи днк-діагностики спадкової патології»

Затверджено на засіданні кафедри «___»__________2012 р.

Завідувач кафедри, чл.-кор. НАМНУ, д.мед.н., професор _________________ О.Я. Гречаніна

ХАРКІВ 2012

"Современные методы днк-диагностики наследственной патологии"

Актуальность темы.

Реализация Проекта человеческого генома (HGP) способствовала бурному развитию генетической диагностики заболеваний, в частности генного тестирования. В настоящее время насчитывают более 4 тыс. наследственных болезней, генетическая природа которых установлена. Они, как правило, относятся к редким и составляют около 3–5% от всех известных заболеваний. Однако среди определенных этнических групп некоторые наследственные болезни встречаются чаще. Известно также, что мутации генов играют роль и в патогенезе широко распространенных заболеваний. Применение новых технологий для определения генетических мутаций позволяет в некоторых случаях выявить не только уже имеющуюся болезнь, но и предсказать вероятность ее развития у человека в будущем. Выявление и картирование большого числа генов, ассоциированных с развитием заболеваний, изменило проведение традиционных эпидемиологических исследований, позволило уточнить и лучше понять этиологию многих генетических болезней, особенно хронических, разработать методы генетического прогнозирования заболеваний, которые развиваются у лиц среднего и пожилого возраста, расширить возможности медико-генетического консультирования в предупреждении наследования некоторых неизлечимых заболеваний детьми, родители которых являются носителями соответствующих рецессивных генов (например, синдром Тэя — Сакса, серповидно-клеточная анемия, b-талассемия).

Специфической особенностью наследственных болезней является то, что их причиной (и в большинстве случаев единственной) являются изменения ДНК. Вполне понятно, что ДНК-диагностика как технология, направленная на обнаружение причины заболевания, является наиболее адекватным, объективным и информативным подходом к диагностике наследственных болезней. Молекулярно-генетические методы - большая и разнообразная группа методов, предназначенная для выявления вариаций (повреждений) в структуре участка ДНК (аллеля, гена, региона хромосомы) вплоть до расшифровки первичной последовательности оснований. В основе этих методов лежат генно-инженерные манипуляции с ДНК и РНК. Исходным этапом всех молекулярно-генетических методов является получение образцов ДНК. Источником геномной ДНК могут быть любые ядросодержащие клетки. На практике чаще используют лейкоциты, хорион, амниотические клетки, культуры фибробластов. Возможность проведения молекулярно-генетического анализа с небольшим количеством легкодоступного биологического материала является методическим преимуществом методов данной группы.

Хотя ДНК-диагностика основана на весьма сложных, трудоемких и относительно дорогостоящих исследованиях, она имеет важные преимущества перед традиционными методами диагностики.

Объект исследования - ДНК - остается практически неизменным на протяжении жизни организма, начиная со стадии оплодотворенной яйцеклетки, и это позволяет проводить исследования на любой стадии развития организма. Таким образом, с помощью ДНК-диагностики можно решать следующие задачи, которые часто не удается решить другими методами:

- подтверждение клинического диагноза или дифференциальная диагностика у пациента;

- пресимптоматическая диагностика - когда клинические признаки заболевания с поздним дебютом отсутствуют;

- пренатальная диагностика по ДНК плодного материала (ворсины хориона, клетки амниотической жидкости, кровь плода);

- преимплантационная диагностика по ДНК клеток дробящейся яйцеклетки, оплодотворенной in vitro.

Пресимптоматическая диагностика является принципиально новой возможностью, позволяющей в ряде случаев осуществлять эффективное превентивное лечение (например, в случае болезни Вильсона-Коновалова). Но даже в тех случаях, когда эффективное лечение заболевания отсутствует, получение информации о наличии или отсутствии патологического гена для членов семей со случаями наследственного заболевания имеет большое морально-психологическое значение и служит важнейшим фактором для принятия многих жизненно важных решений, связанных с планированием семьи и деторождения, выбора работы и т.д.

Наиболее важной является пренатальная диагностика, которая позволяет предотвратить рождение больных детей с тяжелыми наследственными болезнями, такими, как миодистрофия Дюшенна, муковисцидоз, миотоническая дистрофия, и позволяет семье, имеющей больного ребенка с наследственным заболеванием, родить здорового ребенка. По сути пренатальная диагностика является единственным эффективным средством профилактики для многих наследственных болезней.

С помощью методов ДНК-диагностики можно также определить носительство поврежденного гена для женщин в случае Х-сцепленных заболеваний (миодистрофия Дюшенна, гемофилия А и В и др.). Женщина-носительница, как правило, является клинически здоровой, однако ее сыновья с вероятностью 0,5 будут больны. Для женщин-носительниц необходимо рекомендовать пренатальную диагностику, в то время как женщины с генотипом, не отягощенным мутацией, не нуждаются в дальнейшем генетическом консультировании.

Таким образом, ДНК-диагностика позволяет решить ряд проблем для семей с наследственными болезнями, многие из которых просто неразрешимы другими методами. Это определяет значительную роль ДНК-диагностики не только для генетического консультирования, но и для медицины в целом.

Общая цель – знакомство с молекулярно- генетическими методами ДНК-диагностики наследственной патологии.

Конкретные цели	Навыки
1.знать область применения молекулярно – генетических методов исследования	Цели конечного уровня
2.знать принципы молекулярно – генетических методов исследования, методы прямой и непрямой ДНК-диагностики 3. знать показания к применению, возможности молекулярно – генетических методов исследования	1.умение отбирать контингент больных для проведения ДНК-диагностики
	2.умение истолковывать результаты молекулярно – генетических методов исследования