Ферментативная активность культур, выросших в питательных средах, содержащих воду, обработанную ультрафиолетом

Оценивалась на основе выработки индуцибельного фермента (бета-лактамазы) и конститутивного фермента (гемолизина).

Определение активности бета-лактамазы Культура штамма Escherichia coli - продуцента бета-лактамазы выращивалась в виде макроколонии на среде с ампициллином в концентрации 60 миллиграмм на миллилитр в течение суток при температуре 37⁰С. По окончании инкубации макроколония стерилизовалась парами хлороформа, и поверхность среды заливалась культурой Escherichia coli. чувствительной к ампициллину. Посев инкубировали в течение суток при температуре 37⁰С. По окончании инкубации активность бета-лактамазы оценивали по диаметру зоны роста чувствительного к ампициллину штамма вокруг макроколонии штамма-продуцента бета-лактамазы.

Определение активности гемолизина. Культура золотистого стафилококка, обладающего гемолитическими свойствами, дозировано наносилась на поверхность 5% кровяного агара, приготовленного на основе воды, обработанной ультрафиолетом. Контроль - кровяной агар, приготовленный на обычной воде. Посев инкубировали в течение суток при температуре 37⁰С. По окончании инкубации активность продукции гемолизина.

Исследование культуральных свойств Saccharomyces cerevisiae

В экспериментах использовали дикий штамм пекарных дрожжей Saccharomyces cerevisiae, используемый 21-м хлебозаводом г. Москвы.

Навеску 0,5 г. сухих дрожжей суспензировали в 10 мл физиологического раствора в течение 5 -10 минут. После этого был проведен посев на питательные среды Сабуро и сусло-агар, приготовленные на дистиллированной воде и воде, подвергнутой ультрафиолетовому воздействию. Чашки с посевами термостатировали при 29⁰С в течение 2 суток.

Параллельно проводили подсчет количества клеток дрожжей в исходной суспензии. Определение количества спор дрожжей в суспензии осуществляли методом подсчета с использованием счетной камеры Горяева.

Результаты Исследование выживаемости культур лактобацилл и бифидобактерий в питательных средах, содержащих воду, обработанную ультрафиолетом

Выживаемость лактобацилл в средах, приготовленных на основе воды, обработанной ультрафиолетом, представлена на таблицах 1-8. Данные, представленные на таблицах свидетельствуют об увеличении количества жизнеспособных колоний лактобацилл при их культивировании в ростовых средах, содержащих воду, обработанную ультрафиолетом, приблизительно в 100 раз. Эта тенденция появилась на первые сутки роста и продолжалась в последующие сутки.

Таблица 1 Выживаемость лактобацилл в ростовых средах, содержащих воду, обработанную ультрафиолетом. Эксперимент l.

Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды, не обработанной ультрафиолетом		1 сутки роста	2 сутки роста
Разведения	6	5х108	108
	7	1,4х109	109
	8	нет роста	нет роста
Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды обработанной ультрафиолетом
Разведения	6	Сливной рост	Сливной рост
	7	1х109	2х109
	8	3х1010	3х1010

Таблица 2. Выживаемость лактобацилл в ростовых средах, содержащих воду, обработанную ультрафиолетом. Эксперимент 2.

Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды, не обработанной ультрафиолетом		1 сутки роста
Разведения	6	8х108
	7	1,6х109
	8	нет роста
Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды обработанной ультрафиолетом
Разведения	6	Сливной рост
	7	1,2х109
	8	3х1010

Таблица 3. Выживаемость лактобацилл в ростовых средах, содержащих воду, обработанную ультрафиолетом. Эксперимент 3

Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды, не обработанной ультрафиолетом		1 сутки роста
Разведения	6	8х108
	7	нет роста
	8	нет роста
Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды обработанной ультрафиолетом
Разведения	6	Сливной рост
	7	2,8х108
	8	3х1010

Таблица 4. Выживаемость лактобацилл в ростовых средах, содержащих воду, обработанную ультрафиолетом. Эксперимент 4.

Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды, не обработанной ультрафиолетом			1 сутки роста
Разведения		6	5,4х108
Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды обработанной ультрафиолетом
Разведения	5		Сливной рост
	6		4,0х109

Таблица 5. Выживаемость лактобацилл в ростовых средах, содержащих воду, обработанную ультрафиолетом, Эксперимент S.

Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды, не обработанной ультрафиолетом			1 сутки роста
Разведения		5	Сливной рост
		6	2х108
Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды обработанной ультрафиолетом
Разведения	5		Сливной рост
	6		2х109

Таблица 6. Выживаемость лактобацилл в ростовых средах, содержащих воду, обработанную ультрафиолетом. Эксперимент 6.

Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды, не обработанной ультрафиолетом
Разведения		5	Сливной рост
		6	1х108
Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды обработанной ультрафиолетом
Разведения	5		Сливной рост
	6		1х1010

С помощью среды, содержащей воду, обработанную ультрафиолетом, успешно оживляли из лиофильного состояния хранившийся в ампуле в течение 13 лет штамм лактобацилл (Таблица 7)

Таблица 7. Оживление штамма Lactobacillus casei К-25 с помощью ростовых сред, содержащих воду, обработанную ультрафиолетом

Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды, не обработанной ультрафиолетом
Разведения		5	Роста нет
		6	нет
Среда МРС 0,2% приготовленная на основе воды обработанной ультрафиолетом
Разведения	5		Сливной рост
	6		3х1010