Реферат
Отчет 18 с., 18 табл.
ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ, МИКРООРГАНИЗМЫ, УЛЬТРАФИОЛЕТ
Объектом исследования являются питательные среды, содержащие воду, обработанную ультрафиолетом.
Целью разработки является исследования влияния воды, обработанной различными дозами ультрафиолета, на культуральные свойства (выживаемость, образование колоний, морфология колоний, количество живых клеток в колониях, продукция ферментов - гемолизина, бета-лактамаз, частота переноса плазмид) микроорганизмов (условно- патогенных - стафилококк, кишечная палочка, синегнойная палочка, и промышленных - лактобациллы, бифидо бактерии, пивные дрожжи, Bacillus spp, ).
В результате исследований установлена повышенная культуральная активность микроорганизмов, растущих на питательных средах выполненных на основе воды, обработанной ультрафиолетом.
ОГЛАВЛЕНЕ
Введение 3
Основная часть 6
Методы исследований 6
Результаты 9
Заключение 16
Введение
Изучение особенностей формирования дисбактериоза у человека в экстремальных условиях (космических полетах, модельных исследованиях (гипокинезия, повышенные физические нагрузки, и пр.) позволило выявить причастность ряда экстремальных факторов к дисбиотической перестройке микрофлоры пищеварительного тракта.
Изменения при этом касаются как количественных перестроек микрофлоры отдельных биотопов с развитием дисбактериоза различной степени выраженности, так и включают нарастание потенциала патогенности, проявляющегося в активизации патогенных свойств условно-патогенных ее представителей и, таким образом, создают угрозу возникновения инфекции экзогенного и эндогенного характера. В указанных работах показана значительная роль бифидо - и лактофлоры в поддержании стабильности всей микробной экосистемы кишечника и связанные с ней нарушения колонизационной резистентности. Особое значение лактобациллам, как стабилизирующему фактору микро биоценоза кишечника, придает М. Mikelsaar et al. (1987) в работе которого показана элиминация лактобацилл со слизистой толстой кишки, как пусковой механизм развития дисбактериозов у человека. Установлено значение лактобацилл, как важнейшего компонента пристеночной микрофлоры кишечника, в формировании "первого барьера", предупреждающего адгезию, размножение и контаминацию эпителия патогенными и условно-патогенными микроорганизмами.
Установлено также, что снижение уровня защитных групп анаэробных микроорганизмов может привести к транс локации аэробных и факультативно-анаэробных бактерий, персистирующих в кишечнике, в мезентериальные лимфоузлы и другие внутренние органы, с последующей экстраинтестинальной диссиминацией потециально патогенных бактерий, развитием эндогенной или экзогенной инфекции при ослаблении иммунных механизмов организма хозяина. Целый ряд этих бактерий, например микрорганизмы родов Klebsiella, Enterobacter, Proteus и целый ряд других, способны вызывать инфекционные поражения верхних дыхательных путей. (Поликарпов Н.А. 1982). Существует взаимосвязь между величиной бактериальной популяции в составе аутомикрофлоры толстого кишечника и экстраинтестинальной транслокацией этих бактерий. Установлена корреляционная зависимость между дисбактериотическими сдвигами в составе кишечной микрофлоры человека и наличием воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области.
Транслокация (проникновение, пассаж, миграция) микрофлоры пищеварительного тракта в лимфоидную ткань, внутренние органы и кровь изучались в ряде работ. Результаты этих исследований позволили определить факторы, от которых зависит эффективность барьерной функции пищеварительного тракта: структурная целостность слизистой оболочки пищеварительного тракта, колонизационная резистентность кишечника, состояние иммунной системы макроорганизма, популяционный уровень и биологические свойства микроорганизмов, позволяющие им преодолеть кишечный барьер. Понимание одного из механизмов транслокации как тяжелого проявления дисбиоза пищеварительного тракта позволяет отнести к мерам ее профилактики терапевтические средства по коррекции дисбактериоза. Это селективная деконтаминация кишечными антибиотиками и другими антибактериальными препаратами. Терапевтический эффект при использовании эубиотиков достигается напрямую посредством стабилизации микро биоценоза кишечника, а также опосредованно, благодаря выработке бактериоцинов - экскретов микроорганизмов, обладающих антимикробными свойствами и других субстанций. Хорошо известны препараты "Лактобактерин сухой", изготовленный на основе штамма Lactobacillus plantarum 8Р - АЗ, и "Бифидумбактерин сухой", изготовленный на основе штамма В.bifidum. В 1990 году внедрены в практику здравоохранения три новых препарата: бифилонг, ацилакт и М- бактерин, широко применяемые для коррекции микрофлоры кишечника.
Антагонистические свойства препаратов - эубиотиков играют важную роль в обеспечении защиты макроорганизма от инфекции, с одной стороны, и регулирования состава микрофлоры в кишечнике, с другой стороны. Конкурентоспособность сапрофитической микрофлоры против широкого спектра патогенных и условно-патогенных микроорганизмов обусловлена созданием ею неблагоприятных для последних значений Ph, продуцированием антибиотических веществ, а также селективным преимуществом при адгезии к слизистой кишечника при этом показано, что антагонистический эффект усиливается при сочетанном приеме бифидо- и лактобактерий. (Лизько Н.Н., 1991)
Использование метода микробной интерференции, основанного на применении эубиотика лактобактерина, способствовало поддержанию в организме водолазов-глубоководников оптимального уровня содержания лактобацилл - комменсалов, действие которых направлено на укрепление естественных барьеров колонизационной резистентности человеческого организма, предотвращение критического нарастания уровня содержания условно-патогенного компонента аутомикрофлоры, предотвращения экзогенной инфекции а также предотвращение транслокации патогенной микрофлоры в другие биотопы организма человека и противодействие таким образом развитию эндогенной инфекции. Нам представляется, что это действие достигается как за счет насыщения биотопа жизнеспособными клетками лактобацилл, так и за счет реализации их возможного антагонистического потенциала (экскреции бактериоцинов и др.).
Использование лактобактерина и бифидумбактерина в качестве средств коррекции нарушения колонизационной резистентности в целом решает задачу укрепления колонизационной резистентности организма водолаза в части стабилизации аутомикрофлоры человека и профилактики эндогенных инфекций. В связи с этим, технологии оптимизации наработки лактобацилл и бифидобактерий в препаративных количествах
Вид и название работы.
НИР Исследования влияния воды, обработанной различными дозами ультрафиолета, на культуральные свойства микроорганизмов
Цель работы.
Целью разработки является исследования влияния воды, обработанной различными дозами ультрафиолета, на культуральные свойства (выживаемость, образование колоний, морфология колоний, количество живых клеток в колониях, продукция ферментов - гемолизина, бета-лактамаз, частота переноса плазмид) микроорганизмов (условно- патогенных - стафилококк, кишечная палочка, синегнойная палочка, и промышленных - лактобациллы, бифидобактерии, пивные дрожжи, Bacillus spp, ).
Основание для проведения работ.
Договор № 02-19-419 от 28 июня 2002 г. между 000 "Зерноком" и Государственным научным центром Российской Федерации - Институтом медико-биологических проблем РАН.
Основная часть
Материалы и методы
Приготовление воды методом обработки ультрафиолетом
Объем воды необходимый для работы обрабатывается не фильтрованным светом источника ультрафиолетового излучения, с содержанием в лучистом потоке ультрафиолетовых квантов с длиной волны 190 - 250 нм, не менее 30% (ДРТ-400). Поток света мощностью 0,4 вт/см моделируется с помощью электромагнитного поля дополнительного устройства. Обработка производится до увеличения внутренней энергии воды в 2 раза, что определяется с помощью вискозиметра.
На основе воды, обработанной ультрафиолетом, приготовляли следующие стандартные питательные среды:
среда МРС для культивирования лактобацилл;
среда "Бактофок" для культивирования бифидобактерий;
среда LB для культивирования аэробных тест-культур;
мясо-пептонный бульон для исследования частоты переноса
плазмид при конъюгации.
Контролем явились аналогичные среды, содержащие воду, не обработанную ультрафиолетом.