Определение группы крови

С помощью цоликлонов анти-А и анти-В

Техника выполнения:

1. Тарелку разделите стеклографом на две части, каждую из которых маркируйте буквами А и В.

2. В каждую часть тарелки нанесите по две больших капли (0,1 мл) цоликлона (анти-А и анти-В, соответственно маркировке частей тарелки).

3. Рядом с каплями цоликлонов поместите каплю исследуемой крови в 10 раз меньше капли цоликлона (0,02-0,03 мл).

4. Стеклянной палочкой или уголком предметного стекла смешайте каплю крови с каплей цоликлона.

Рис.60. Определение группы крови с помощью цоликлонов

5. Оцените результаты исследования через 3 мин. Хотя четкая агглютинация с цоликлонами обычно наступает в первые 30 сек., возможно и более позднее наступление агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

При отсутствии агглютинации с обоими цоликлонами – это группа крови o (I).

При наличии агглютинации с анти-А-цоликлоном – группа крови A (II).

При наличии агглютинации с анти-В-цоликлоном – группа крови B (III).

Наличие агглютинации с обоими цоликлонами свидетельствует о том, что необходимо исключить неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов. Проведите контрольное исследование данной крови с изотоническим раствором хлорида натрия; отсутствие агглютинации с этим раствором подтверждает, что исследуемая кровь группы AB (IV).

11.2.Определение резус – фактора. Система антигенов

СИСТЕМА АНТИГЕНОВ Rh

Практическое значение при переливании крови имеют шесть антигенов системы Rh: три разновидности Rh-антигена - Rh^o (D), rh^’ (C), rh”(E). Антигены этой системы имеются в эритроцитах, тромбоцитах, лейкоцитах и жидкостях организма. Наиболее антигенными свойствами обладает антиген D(Rh^o).

Среди европейцев 85% населения являются носителями резус-антигена, т.е. резус-положительными, а 15% не имеют резус-антигена, т.е. резус-отрицательными.

Резус-отрицательными донорами считаются лица, в эритроцитах которых не содержится ни один из антигенов Rh^o(D), rh^’ (C) и r”(E). Резус-положительными считаются лица, у которых в эритроцитах обнаруживается антиген Rh^o (D), rh^’ (C ) или rh”(E). Лица, в эритроцитах которых имеются антигены rh^’ (C) и rh”(E), будучи донорами, относятся к резус-положительным, но будучи реципиентами, считаются резус-отрицательными, так как не имеют антигена Rh^o (D), который легко определяется в условиях стационара в связи с наличием универсальной антирезусной сыворотки Rh^o(D).

Женщины с резус-отрицательной кровью могут быть иммунизированы резус-положительным плодом.

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕЗУС-ФАКТОРА Rh^о (D)

Rh^o (D)-фактор определяется с помощью универсального стандартного реагента в пробирке без подогрева.

Рис.61. Определение резус-фактора универсальным реагентом антирезус анти-Rh(D) в пробирке без подогрева

Оснащение:

1. Пробирки – 3 шт.

2. Стандартный универсальный реагент антирезус анти-Rh^o(D).

3. Физиологический раствор хлорида натрия.

4. 33% раствор полиглюкина.

5. Исследуемая кровь.

6. Перчатки.

Техника выполнения:

1. Наденьте перчатки.

2. Возьмите стандартную универсальную сыворотку антирезус анти-Rh^o(D) введите в две пробирки по 2 большие капли (0,1 мл), в третью пробирку (контрольную) введите 2 капли (0,1 мл) изотонического раствора хлорида натрия и 1 каплю (0,05 мл) 33% раствора полиглюкина.

3. Во все пробирки введите по 1 небольшой капле (0,05 мл) исследуемой крови.

4. Содержимое пробирок перемешайте, вращая пробирки почти до горизонтального положения несколько раз.

5. Через 3 мин в пробирки с реагентом и кровью добавьте по 2-3 мл изотонического раствора хлорида натрия и перемешайте содержимое двух-трехкратным вращением пробирок (не встряхивать!).

6. При наличии агглютинации в виде крупных хлопьев (агглютинатов) из склеенных эритроцитов на фоне просветленной жидкости исследуемую кровь нужно считать резус-положительной.

7. При отсутствии агглютинации (в пробирке сохраняется розовое окрашивание, гомогенное, без хлопьев), исследуемая кровь является резус-отрицательной.

8. В контрольной пробирке агглютинации не должно быть, так как не содержит антител антирезус.