Определение микробного числа воздуха.

Количественные микробиологические методы исследования воздуха основаны на принципах осаждения (седиментации), аспирации или фильтрации.

Седиментационный метод. Две чашки Петри с питательным агаром оставляют открытыми в течение 60 мин, после чего посевы инкубируют в термостате при 37°С. Результаты оценивают по суммарному числу колоний, выросших на обеих чашках: при наличии менее 250 колоний воздух считается чистым, 250—500 колоний — загрязненным в средней степени, при количестве колоний более 500 — загрязненным.

Аспирационный метод. Более точный количественный метод определения микробного числа воздуха. Посев воздуха осуществляется с помощью приборов. Прибор Кротова устроен таким образом, что воздух с заданной скоростью просасывается через узкую щель плексигласовой пластины, закрывающей чашку Петри с питательным агаром; при этом частицы аэрозоля с содержащимися на них микроорганизмами равномерно фиксируются на всей его поверхности, поскольку чашка (под входной щелью) находится в постоянном вращении. После инкубации посева в термостате производят расчет микробного числа по формуле:

а - 1000

х--V

где а —количество выросших на чашке колоний; V— объем пропущенного через прибор воздуха, л; 1000 — искомый объем воздуха, л.

Для определения микробного числа воздуха используют питательный агар, для выделения гемолитических стрептококков—кровяной агар с добавлением генцианового фиолетового, с последующим контрольным микроскопированием и выборочным пересевом подозрительных колоний на кровяной агар. Staph, aureus выявляют методом посевов воздуха на желточно-солевой агар.

Для исследования воздуха могут быть применены и другие приборы (Дьякова, Речменского, Киктенко, ПАБ-1 — пробоотборник аэрозольный бактериологический, ПОВ-1 —прибор для отбора воздуха), в которых определенный объем воздуха пропускается через жидкости или фильтры, а затем делаются мерные высевы на питательные среды. Используя ПАБ-Г и ПОВ-1, можно исследовать большие объемы воздуха и обнаруживать патогеннке бактерии и вирусы. Непосредственное обнаружение патогенных и условно-патогенных бактерий — возбудителей внутрибольничных инфекций (стафилококки, синегнойные палочки и другие грамотрицательные бактерии) в настоящее время проводится при исследовании воздуха стационаров: хирургических, акушерско-гинекологических и др.

При возникновении внутрибольничных инфекций стафилококковой этиологии проводят исследование на выявление источников и путей распространения инфекции; определяют идентичность стафилококков, выделенных из объектов окружающей среды, а также от больных и обслуживающего персонала путем фаготипирования.

Определение микробного числа воды.

Водопроводную воду засевают в объеме 1 мл, воду открытых водоемов —в объемах 1,0; 0,1; 0,01 мл. Все пробы вносят в стерильные чашки Петри, после чего их заливают 10—12 мл расплавленным и остуженным до 45—50°С питательным агаром, который тщательно перемешивают с водой. Посевы инкубируют при 37°С в течение 24^48 ч,- Воду из открытых водоемов засевают параллельно на две серии чашек, одну из которых инкубируют при 37°С в течение суток, а другую —2 сут при 20°С. Затем подсчитывают количество выросших на поверхности и в глубине среды колоний и вычисляют микробное число воды — количество микробов в 1 мл.