3. Определение резусной совместимости крови донора и реципиента путем непрямой пробы Кумбса

Непрямая проба Кумбса проводится с предварительно отмытыми и сенсибилизированными к сыворотке больного эритроцитами донора. В этой пробе агглютинация сенсибилизированных эритроцитов происходит за счет иммунных антител против белка крови человека, находящихся в сыворотке для пробы Кумбса. Она готовится из крови животных, предва­рительно иммунизированных сывороткой крови человека.

Методика проведения пробы. Сначала заготавливают отмытые эритроциты донора. Для этого пробирку с кровью донора заливают изото­ническим раствором хлористого натрия, перемешивают путем переворачи­вания пробирки, затем ее центрифугируют пять минут (до оседания эрит­роцитов), жидкость, остающуюся над эритроцитами отсасывают и снова повторяют процедуру отмывания. На другой пробирке делают надписи: фамилию, инициалы, группу крови больного и донора; проставляют номер флакона с кровью. На дно этой пробирки пастеровской пипеткой помеща­ют одну маленькую каплю (0,05 мл) отмытых эритроцитов донора и до­бавляют к ним три капли сыворотки больного, пробирку встряхивают и ставят в термостат при температуре +37°С на 45 минут. Затем пробирку извлекают, заливают до верха изотоническим раствором хлористого на­трия, перемешивают путем переворачивания и центрифугируют до осаж­дения эритроцитов. Такое отмывание необходимо произвести два раза. К отмытым, плотно осевшим эритроцитам добавляют 4-6 капель изотониче­ского раствора хлористого натрия для получения, приблизительно, 5% взвеси эритроцитов.

Одну каплю 5% взвеси этих эритроцитов переносят на белую фарфо­ровую пластинку со смачиваемой поверхностью, добавляют одну - две ка­пли сыворотки для пробы Кумбса и перемешивают стеклянной палочкой. Пластинку слегка покачивают, затем оставляют на одну-две минуты в по­кое, затем снова покачивают. Наблюдают за ходом реакции 20 минут. Если агглютинации нет, то кровь донора совместима с кровью больного в отно­шении резус-антигена Д, а также в отношении других изоантигенов, к ко­торым могли образоваться изоиммунные антитела неполной формы. Не­прямая проба Кумбса выявляет неполные антитела ко всем антигенам сис­темы Резус, системам Келл-Челлано, Даффи, Кидд и некоторым другим системам.

4. Особенности проведения проб на совместимость у больных с гемотрансфузионными осложнениями

У больных, перенесших гемотрансфузионные осложнения, происхо­дят характерные серологические сдвиги, заключающиеся в том, что в пе­риод до 10-20 дня после трансфузии идет нарастание сенсибилизации, происходит нарастание титра антител, послуживших причиной осложне­ния, появляются антитела другой специфичности. После 20 дня начинается постепенное снижение титра антител. Поэтому таким больным, в период нарастания сенсибилизации, пробу на совместимость следует проводить с сывороткой, взятой в день проведения трансфузии или не далее, чем нака­нуне.

При переливании крови после 20 дня, кроме этой пробы, желательно дополнительно проводить пробу на совместимость с порцией сыворотки, заготовленной на высоте сенсибилизации (10-20 день). Это дает возмож­ность предупредить переливание больному крови, содержащей антиген, против которого у него совсем недавно имелись антитела.