6. Определение степени зрелости икры и готовности ее к осеменению.

Экспресс-метод определения степени зрелости гонад у производителей осетровых.

Метод «щуповых проб». В преднерестовый период происходи поляризация – ядро выходит из зоны крупнозернистого желтка и приближается к оболочкам икринки в районе микропиле. У осетровых берут пробы щупом из каудальной части яичника. Щуп вводя под углом 30 ⁰. Икринки разрезают от анимального полюса к вегетативному, и просматривают под бинокуляром. Модифицированный щуповой метод Гончаровой. Икринки помещают в раствор Рингера с прогестероном, варят в воде, разрезают и смотрят, сохранилось ли ядро. Если сохранилось, самку не следует использовать для рыбоводных целей.

Простой способ. Икринки помещают в пробирку с жидкостью Серра (6 частей 96⁰ спирта, 3 части 40 % формалина и 1 часть ледяной уксусной кислоты) либо в 70 % уксусной эссенции. Икру просматривают под бинокуляром. Смотрят на положение ядра.

Созревшие самки отличаются мягким, округлым брюшком.

7. Способы получения зрелой икры и спермы, осеменение икры, ее учет, оценка качества половых клеток. Анестезия производителей. Чаще всего используется хинальдин. Применяется в дозировке 5 – 12 мг/л. Рыбы засыпают через 1 - 2 мин., выходят из состояния наркоза через 3 – 5 мин. после помещения в чистую воду.

Зрелые половые продукты берут тремя способами:

Способ отцеживания. Хвост и голову обертывают марлей. Левой рукой удерживают рыбу. Пальцами правой рукой осторожно сдавливают брюшко рыбы. проводя ими от головы к генитальному отверстию. Икру сцеживают в эмалированный таз так, чтобы она стекала по краю. Нельзя брать икру с кровью. Также берут сперму и у самцов.

Способ вскрытия. Самку убивают и обескровливают. Затем надрезают брюшко от генитального отверстия до передней его части на 7 – 12 см и собирают икру.

Комбинированный способ. Основную часть икры берут способом отцеживания, оставшуюся часть – путем вскрытия брюшной полости.

Способы прижизненного получения икры.

Многократное отцеживание. Методика многократного отцеживания предусматривает получение икры небольшими порциями в течение длительного периода времени до 12 и более часов. Эта технология трудоемка и настоящий момент на рыбоводных хозяйствах России не используется.

Метод «кесарева сечения». Частичное вскрытие брюшной полости с последующим наложением швов. Трудоемок, не позволянт работать с большими партиями рыб.

Метод надрезания яйцевода. Разработан в 1985 – 1986 гг, широко распространен. Производится надрез каудального участка одного из яйцеводов, после чего икру можно отцеживать как у костистых рыб. Для проведения операции используется глазной скальпель. Его вводят в генитальное отверстие и надрезают яйцевод. При получении икры крупных особей укладывают нас тол на бок, в процедуре участвуют до 3 человек. Небольшая рана быстро заживает. У многих рыб отцеживание икры производится неоднократно.

Осеменение икры. Икру осеменяют спермой от 3 – 5 самцов, что обеспечивает высококачественное оплодотворение. Осеменение желательно проводить не позднее чем через 10 – 20 мин.

В рыбоводстве применяют три способа искусственного осеменения.

Сухой (русский) способ, разработан Врасским. Применяется для лососевых рыб, сигов, карповых рыб, щуки. В эмалированный таз с икрой добавляют сперму. Икру перемешивают со спермой. Затем в таз наливают воду и снова перемешивают половые продукты. На 3 – 4 кг икры берут сперму от 3 – 5 самцов. Икру оставляют набухать в течение 3 – 5 мин.

Полусухой способ. В эмалированный таз с икрой наливают сперму, разведенную водой непосредственно перед осеменением, и сразу приступают к перемешиванию половых продуктов. Этот способ применяют для осетровых. Сперму от 3 – 5 самцов смешивают из расчета 10 мл спермы на 1 кг икры. В момент осеменения сперму разбавляют водой 1:200 и выливают в таз с икрой. Перемешивают 3 – 5 мин.

Мокрый способ. В эмалированный таз с икрой наливают воду, вносят сперму и перемешивают половые продукты. Модификация этого способа – икру и сперму одновременно вносят в эмалированный таз с водой и содержимое перемешивают. Этот способ применяют для рыбца. Оцеживают икру 15 самок, берут сперму от 5 – 8 самцов. В таз наливают 4 – 5 л воды, одновременно сливают в него икру и сперму. Половые продукты осторожно перемешивают птичьим пером.

Экологический метод получения оплодотворенной икры. Для выдерживания производителей полупроходных рыб, их нереста и сбора оплодотворенной икры применяются плавучие сетчатые садки, стационарные бассейны или лотки длиной 30 м. После нереста икра опускается на дно и набухает. Для смыва икры создается сильное течение воды, икра попадает в икросборник, откуда вылавливается сачком и доставляется в инкубационный цех.

Этот метод успешно использован на Баргузинском рыбоводном заводе для сбора икры омуля.

Оценка качества половых клеток рыб. О качестве икры можно судить по ее внешнему виду: зрелая икра прозрачна, кроме икры осетровых, округлой формы, упругая, имеет свойственную данному виду окраску. Определение качества икры с помощью физиолого-биохимических методов требует специального оборудования и весьма затруднительно. Для определения качества икры ведется при наблюдении за процессом инкубации.

Оценка спермы проводится по ее концентрации, по активности, по оплодотворяющей способности, по внешнему виду (хорошая – белого цвета, консистенция жидкой сметаны, плохая – имеет вид разбавленного молока). Ориентировочно качество определяется по 5 бальной шкале.

8. Эффективность различных способов осеменения икры в зависимости от биологических особенностей половых клеток разных видов рыб. Сухой способ может использоваться для большинства костистых рыб. Наиболее эффективен для лососевых и сиговых, так как у этих рыб спермии активируются в полостной жидкости. Мокрый способ предпочтителен для таких рыб как вьюн, рыбец, так как у них спермии в полостной жидкости совсем не активируются. Для осетровых использовались все три способа, на лучше всего зарекомендовал себя полусухой способ. Спермии осетровых рыб не активируются в полостной жидкости, а неоплодотворенные икринки, попав в воду, утрачивают способность к оплодотворению и приобретают клейкость. Поэтому преимущество полусухого способа очевидно и обусловлено биологическими особенностями.

Способы хранения и транспортировки икры и спермы. Икру, как правило, не хранят, поскольку ее качество быстро падает. Допускается хранение икры в овариальной жидкости без воды, однако, при хранении икры более 30 мин. ее оплодотворяемость снижается. Сперма хорошо сохраняется в сухих стерильных пробирках в холоде. В термосе со льдом ее можно перевозить на большие расстояния.

Криоконсервация спермы рыб – сложный физико-химический процесс, включающий несколько этапов.

- получение и отбор образов спермы;

- предварительное охлаждение (до +5 – 0⁰С);

- смешивание с защитным раствором;

- разделение на порции (контейнеры или гранулы);

- программное охлаждение;

- хранение в жидком азоте;

- отогрев;

- использование для осеменения.

Разработаны методы криоконсервации и размораживания более 200 видов пресноводных и морских рыб, а также других гидробионтов. Наибольших успехов в криоконсервации спермиев рыб достигли российские ученые. Попытки глубокого замораживания икры рыб пока не дали хороших результатов.