Вопрос 82. В трёх пробирках находятся растворы альбумина, тирозина и салициловой кислоты. Как провести идентификацию этих соединений?

Ответ. Для идентификации используем качественные реакции для предложенных веществ. Альбумин – это белок, тирозин – аминокислота с ароматическим углеводородным радикалом, салициловая кислота – ароматическая гидроксикислота, содержащая фенольный фрагмент.

Хорошо известно, что фенолы образуют окрашенные комплексы с хлоридом железа (III). Нам не известно, в какой из пробирок находится раствор салициловой кислоты, поэтому из каждой пробирки отольём немного раствора в три другие пустые пробирки (т.е., возьмём пробы для проведения реакции). К каждой пробе добавим по 1 мл раствора хлорида железа (III) и тщательно перемешаем. В одной из пробирок раствор приобретает интенсивную фиолетовую окраску, значит, в той пробирке, откуда взята эта проба, содержится раствор салициловой кислоты.

Для аминокислот с ароматическим углеводородным радикалом качественной является ксантопротеиновая реакция. Ещё раз возьмём пробы двух оставшихся веществ, добавим к каждой пробе 2...3 капли концентрированной азотной кислоты, осторожно нагреем, все время встряхивая. В одной из пробирок раствор окрасится в желтый цвет. Охладив пробирку, осторожно добавляем 2...3 капли 1 водного раствора гидроксида натрия. Появление ярко-оранжевой окраски подтверждает, что в этой пробе содержится раствор тирозина.

Идентифицировав два вещества, приходим к выводу, что в третьей пробирке находится раствор альбумина (яичного белка). Для проверки добавим к раствору в оставшейся пробирке раствор гидроксида натрия и несколько капель раствора сульфата меди (биуретовая реакция на белки), в пробирке появится фиолетовое окрашивание.

Вопрос 83. С помощью каких химических реакций можно идентифицировать жирорастворимые витамины?

Ответ. Витамин А содержит сопряженные двойные связи. Для соединений такого сотава характерно образование окрашенного комплекса по реакции с хлоридом сурьмы (III). Для проведения идентификации 1…2 капли раствора витамина или, например, рыбьего жира, помещают в сухую пробирку, добавляют 5…6 капель хлороформного раствора хлорида сурьмы (III) и 2…3 капли уксусного ангидрида. Появляется синее окрашивание, постепенно переходящее в розово-фиолетовое.

Более специфичной является реакция с сульфатом железа (II). К 2…3 каплям рыбьего жира (или к 1 капле препарата витамина А, растворенного в 10 мл хлороформа) добавляют 10…12 капель ледяной уксусной кислоты, насыщенной сульфатом железа (II), и 2…3 капли концентрированной серной кислоты. Наблюдают появление голубого окрашивания, постепенно переходящего в розово-красное.

Ещё одна качественная реакция – взаимодействие с серной кислотой (реакция Друммонда). Растворяют 1…2 капли рыбьего жира в 5…6 каплях хлороформа и добавляют 1…2 капли концентрированной серной кислоты. Появляется голубое окрашивание, быстро переходящее в буро-красное.

В основе приведенных реакций лежит дегидратирующее действие хлорида сурьмы (III) и серной кислоты на витамин А. Предшественник витамина А – каротин, дает с сульфатом железа (II) светло-зеленое окрашивание.

Для идентификации витамина D можно использовать реакцию с раствором брома в хлороформе. В сухой пробирке смешивают 1мл рыбьего жира и 1 мл раствора брома в хлороформе. В присутствии витамина D появляется зеленовато-голубое окрашивание. Реакция неспецифична.

Можно определить присутствие витамина D по реакции с анилином. В сухую пробирку наливают 1 мл рыбьего жира и 1 мл смеси анилина с концентрированной соляной кислотой (15:1), перемешивают, осторожно нагревают до кипения и кипятят одну минуту. При наличии витамина D появляется зеленая, а затем красная окраска образовавшейся эмульсии. Пробирку оставляют при комнатной температуре. Эмульсия расслаивается, нижний слой окрашивается в ярко-красный цвет.

Качественная реакция на витамин Е (токоферол) – окисление его азотной кислотой. К 5…6 каплям 0,1%-ного спиртового раствора токоферола в сухой пробирке прибавляют 10 капель концентрированной азотной кислоты и встряхивают. Образуется эмульсия, которая постепенно расслаивается и ее верхний слой приобретает красную окраску. Окрашивание вызвано окислением токоферола в продукт, имеющий хиноидную структуру. Реакция неспецифична, ускоряется при нагревании.