Пояснения к занятию. Микроскопический метод в диагностике инфекционных заболеваний
ОБНАРУЖЕНИЕ
ВОЗБУДИТЕЛЯ В ПАТОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ
– ЭКСПРЕСС ДИАГНОСТИКА
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
ВОЗБУДИТЕЛЯ БОЛЕЗНИ
ИССЛЕДОВАНИЕ В
ЖИВОМ СОСТОЯНИИ
ИССЛЕДОВАНИЕ
ОКРАШЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ
ИССЛЕДОВАНИЕ В
ЖИВОМ СОСТОЯНИИ
ИССЛЕДОВАНИЕ
ОКРАШЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ
ФАЗОВО-КОНТРАСТ-НАЯ
МИКРО-СКОПИЯ
ТЕМНО-ПОЛЬНАЯ
МИКРО-СКОПИЯ
ИММЕР-СИОННАЯ
МИКРО-СКОПИЯ
ЛЮМИНЕС-ЦЕНТНАЯ
МИКРО-СКОПИЯ
МИКРОСКОПИЯ С СУХОЙ
СИСТЕМОЙ И ОПУЩЕННЫМ КОНДЕНСОРОМ
ИММЕРСИОН-НАЯ
МИКРОСКОПИЯ
ОКРАСКА ЛЮМИНО-ФОРАМИ
ОКРАСКА МЕЧЕНЫМИ
АНТИТЕЛАМИ (РИФ)
Методы диагностики бактериальных инфекций
МИКРОСКОПИЯ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
а) окраска бактериальными красками
б) окраска люминесцирующими красками
в) люминесцентно-серологический метод (РИФ)
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД
(выделение и изучение чистой культуры возбудителя)
БИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД
(заражение чувствительных лабораторных животных исследуемым материалом с последующей регистрацией клинических, патологоанатомических и других изменений)
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД
(обнаружение антител в сыворотках больных по иммунологическим реакциям)
МЕТОД АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ПРОБ
МЕТОДЫ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
(полимеразная цепная реакция, ДНК-гибридизация, ДНК-аплификация)
Правила работы с иммерсионным объективом
Поворотом револьвера поместить на оптическую ось микроскопа малый объектив (х 8). Расстояние между объективом и предметным столиком должно быть равно 1 см. Максимально поднять конденсор, открыть ирис-диафрагму и, пользуясь зеркалом, навести свет. Всё поле зрения должно быть равномерно освещено.
Нанести небольшую каплю иммерсионного масла (стеклянной палочкой из флакона в штативе) на окрашенный мазок. Поместить предметное стекло на столик микроскопа так, чтобы мазок приходился на центральную вырезку столика, закрепить зажимами.
На оптическую ось микроскопа поворотом револьвера поместить иммерсионный объектив (х 90) и под контролем глаза опустить его в каплю масла осторожными движениями винта грубой настройки (макро-винта) почти до соприкосновения с препаратом.
Глядя в окуляр, поднять тубус легкими движениями макро-винта, добиваясь появления изображения. При появлении изображения работать винтом тонкой настройки (микро-винтом) – 2-3 оборота микро-винта вперед и назад, что позволит более четко рассмотреть детали препарата.
После окончания микроскопии необходимо поднять тубус макро-винтом, снять со столика препарат, досуха протереть марлевой салфеткой иммерсионный объектив, перевести на оптическую ось микроскопа пустое гнездо револьвера или малый объектив и опустить тубус до отказа.
Методика приготовления препарата из бактерий (мазка)
Обезжирить предметное стекло. Для этого центр стекла натереть сухим мылом, затем снять его марлевой салфеткой. В центр стекла (на обезжиренную поверхность) бактериологической петлей или стеклянной палочкой нанести каплю физиологического раствора (капля должна растекаться по стеклу).
Прокаленной в пламени спиртовки и остуженной петлей забрать с твердой питательной среды бактериальную массу (очень немного, менее булавочной головки).
Приготовить равномерную эмульсию бактериальной массы в капле физ. раствора (осторожными круговыми движениями) и растереть её тонким слоем 15-20 мм в диаметре. Высушить на воздухе.
Зафиксировать – провести предметное стекло (мазком кверху) через пламя спиртовки 2-3 раза так, чтобы слегка обжигало тыл руки.