- •Практикум по микробиологии
- •Часть 2. Микробиоценозы природных экосистем
- •Тема 1 микроорганизмы как часть экосистемы. Методы изучения микроорганизмов, входящих в состав микробиоценозов. Определение омч (кмафанм).
- •Микробиоценозы как часть экосистемы
- •Способы существования микроорганизмов в составе микробиоценоза
- •Методы изучения микроорганизмов, входящих в состав микробиоценозов
- •Идентификация микроорганизмов возможна при использовании системы классификации. Принципы современной систематики и классификации бактерий.
- •Определение общего микробного числа
- •Методика определения общего числа микроорганизмов омч (количества мафАнМ) бактериологическим методом
- •Методика выявления и определения количества термофильных и психрофильных микроорганизмов
- •Нормальная микрофлора кожи
- •Нормальная микрофлора дыхательных путей
- •Микрофлора разных отделов полости рта
- •Нормальная микрофлора пищевода
- •Микрофлора желудка
- •Микрофлора толстого кишечника
- •Микробиоценоз мочеполовой системы
- •Представители микробиоценоза организма человека и животных
- •Грамположительные кокки
- •Тема 3. Энтеробактерии
- •Коринебактерии, бактероиды, микобактерии
- •Модуль 6. Микрофлора пищевых продуктов и кормов.
- •Источники и пути обсеменения пищевых продуктов микроорганизмами
- •Особенности пищевых продуктов как среды обитания микроорганизмов
- •Особенности санитарно-микробиологического исследования пищевых продуктов
- •Тема 6 аэробные микроаэрофильные палочки и кокки семейств псевдомонады и ацетобактерии
- •Тема 7 молочнокислые палочки и кокки. Бифидобактерии.
- •Характеристика молочнокислых бактерий
- •Практическое значение молочнокислого брожения и молочнокислых микроорганизмов
- •Тема 8 Патогенные микроорганизмы в пищевых продуктах и кормах – листерии и иерсинии
- •Выявление и идентификация l. Monocytogenes при санитарно-микробиологических исследованиях
- •Выявление и идентификация Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis
- •1 Этап. Предварительное холодовое обогащение в неселективной жидкой среде.
- •3 Этап. Выявление характерных колоний.
- •Санитарно-показательные микроорганизмы
- •Тема 9. Микробиоценозы объектов внешней среды Микрофлора воздуха. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха.
- •Микрофлора воздуха
- •Санитарно-микробиологические исследования воздуха
- •Седиментационный метод (метод оседания) по Коху.
- •Аспирационный метод
- •Фильтрационный метод
- •Тема 10. Микроэкологические методы исследования почвы. Свободноживущие и симбиотические микроорганизмы почвы: – обитатели почвы
- •Условия обитания микроорганизмов в почве.
- •Антропогенное воздействие на почву
- •Экологические методы бактериологического исследования почвы.
- •Почвенные микроорганизмы, принимающие участие в круговороте азота
- •Свободноживущие и симбиотические азотфиксаторы семейств
- •Свободноживущие автотофные серо- железо- и марганецокисляющие почвенные бактерии
- •Грамположительные, не образующие спор палочки неправильной формы, род Arthrobacter.
- •Тема 11 санитарно-микробиологические методы бактериологического исследования почвы. Почвенные бациллы
- •Санитарно-микробиологическое исследование почвы
- •Бациллы
- •Сибирская язва
- •Диагностика сибирской язвы.
- •Тема 12 клостридии. Фузобактерии.
- •Ботулизм
- •Профилактика ботулизма
- •Столбняк
- •Газовая гангрена
- •Фузобактерии
- •Тема 13 обитатели почвы - актиномицеты и родственные им микроорганизмы
- •Тема 14 свободноживущие водные микроорганизмы – автотрофы
- •Тема 15 санитарно-микробиологическое исследование воды
- •Санитарно-микробиологическое исследование воды
- •Тема 16 водные микроорганизмы возбудители болезней
Тема 3. Энтеробактерии
Относятся к Отделу Gracilicutes, Грамотрицательные, аэробные микроаэрофильные палочки и кокки, семейству Enterobacteriaceae (кишечные бактерии).
Энтеробактерии (лат. Enterobacteriaceae) — большое семейство бактерий (более 20 родов, объединяющих более 100 видов), включающее в себя такие известные патогены как сальмонелла, кишечная палочка, чумная палочка и т. д. По форме энтеробактерий - небольшие палочки длиной - 5 мкм, грамотрицательны, как правило, подвижны (перитрихи), спор не образуют. Изредка могут образовывать капсулы.
Энтеробактерии — хемоорганотрофы, аэробы или факультативные анаэробы, большинство из них хорошо растут на простых питательных средах и ферментируют углеводы с образованием муравьиной кислоты и других конечных продуктов (так называемое формиатное брожение).
Множество представителей семейства энтеробактерий являются частью нормальной микробиоты кишечника, другие обитают в почве, воде или паразитируют на различных растениях и животных. Лучше всего изучена кишечная палочка значение энтеробактерий в патологии человека и животных.
Условно-патогенные энтеробактерии могут вызвать до 50% всех случаев септицемии, до 70% гастроэнтеритов и более 70% инфекций мочевыводяших путей. Поражения у человека и животных вызывают бактерии родов Escherichia (возбудитель колибактериоза). Shigella (возбудитель дизентерии), Salmonella (возбудитель брюшного тифа и пищевых отравлений - токсикоинфекций сальмонеллёзов), Proteus (возбудитель гнойно-септических процессов), Klebsiella (возбудитель пневмоний), Yersinia (возбудитель чумы, псевдотуберкулёза, кишечного иерсиниоза) и многие другие.
Кишечная палочка - Escherichia coli
Escherichia coli - типичный представитель семейства Ente-robacteriaceae. Escherichia соli - важнейший модельный организм, использующийся в генетике и молекулярной биологии из-за высокой изученности её генетики и биохимии.
Значение этих микроорганизмов в ветеринарии, медицине, санитарной микробиологии очень велико.
Escherichia coli - обычный обитатель кишечника различных животных и человека.
В больших количествах кишечные палочки выделяются из организма человека и животных во внешнюю среду и некоторое время сохраняются в ней. Они признаны одним из наиболее значимых санитарно-показательных микроорганизмов (СМПО) и являются индикаторами фекального загрязнения объектов внешней среды и пищевых продуктов.
Некоторые штаммы кишечной палочки обладают патогенными свойствами и вызывают у животных болезнь – колибактериоз, проявляющийся в энтеритной, энтеротоксемической, а часто также в септической форме.
Эндогенным или экзогенным путем попадая в пищевые продукты, кишечные палочки при определённых условиях могут размножаться в них. Они являются одним из возбудителей порчи пишевых продуктов.
Пищевые продукты, в которых накопились кишечные палочки и их эндотоксины, могут быть причиной пищевого отравления - токсикоинфекции.
Некоторые сероварианты кишечной палочки обладают также способностью образовывать экзотоксины (Vего-токсины, shigo-токсины). Такие Е. сoli (например, серовариант 0-157) наиболее опасны для человека. Их относят к возбудителям острых кишечных инфекций и называют энтерогеморрагическими. Клинические проявления пищевого отравления, вызванного такими штаммами, напоминают тяжелую форму дизентерии (кровавый понос, сильная интоксикация, рвота, тенезмы и боли в животе, лихорадка).
Сальмонеллы
Сальмонеллы - патогенные энтеробактерии, вызывающие инфекционную болезнь человека и животных - сальмонеллёз. Сальмонеллёзы характеризуются при остром течении лихорадкой и профузным поносом, при хроническом - воспалением легких, плевритами, артритами. У взрослых людей, животных и птиц болезнь может протекать бессимптомно (сальмонеллоносительство), у беременных самок возможны аборты. У людей при употреблении продуктов, содержащих сальмонеллы, могут возникать пищевые инфекции.
Сальмонеллы - возбудители болезней - относятся к виду Salmonella enteric У них имеется очень много (более 2,5 тысяч) разновидностей - серологических вариантов. Все эти сероварианты имеют собственные названия, например:
Salmonella Typhi - возбудитель брюшного тифа человека;
Salmonella Enteritidis, Salmonella Typhimurium - возбудители пищевых сальмонеллёзов; Salmonella Dublin, Salmonella Cholerae suis, Salmonella Abortis ovis - возбудители сальмонеллёзов животных.
Морфология и культурально-биохимические свойства сальмонелл типичны для энтеробактерий.
Proteus
Энтеробактерии рода Proteus (Proteus - бог, способный менять свой облик). Название дано из-за способности микроорганизма давать различный по характеру рост на агаровых средах. Протей обнаруживают в испражнениях многих видов животных, людей, сточных водах, почве с гниющими органическими субстратами, выделяют при хронических инфекциях мочевых путей, при пищевых отравлениях у людей. Протей - типичный гнилостный микроорганизм. Он является важным фактором, обуславливающим порчу мяса и других пищевых продуктов. Наиболее часто при санитарно-микробиологических исследованиях выделяют два вида протея: Proteus vulgaris и Proteus mirabilis.
Морфология. Бактерии рода Proteus - это мелкие, полиморфные палочки, окрашивающиеся по Граму отрицательно, располагающиеся в мазке одиночно, беспорядочно, иногда образующие нити. Бактерии рода Proteus почти всегда подвижны, не образуют спор и капсул.
Культурально-биохимические свойства. В большинстве случаев бактерии рода Proteus обладают способностью к ползучему росту по поверхности плотной среды. Такие формы называют «роящимися» (Н-форма). На плотных средах в пробирках и чашках с МПА при росте протея появляется прозрачный вуалеобразный налет, заполняющий всю поверхность среды. Появляется характерный гнилостный запах - запах гнилого мяса. Иногда встречаются «нероящиеся» формы протея (О-форма). В таких случаях на поверхности плотных питательных сред образуются изолированные, крупные и средней величины, нежные, расплывчатые, полупрозрачные, серовато-белые колонии. При росте протея в МПБ образуется сильное помутнение, обильный, рыхлый осадок, пристеночное кольцо и пленка на поверхности среды.
Важные для идентификации биохимические свойства протея - это способность гидролизовать мочевину, ферментировать мочевину, образовывать сероводород и индол, не расщеплять маннит и лактозу.
Энтеробактерии родов Citrobaсter, Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Ervinia
Род Citrobaсter имеет название, происходящее от двух слов: Citrus - лимон и bacter - мелкие палочки. Цитробактеры относятся к естественным обитателям кишечного тракта, обнаруживаются в фекалиях, моче, на объектах внешней среды, в продуктах растительного и животного происхождения. Они могут вызывать как спорадические случаи, так и вспышки заболеваний, протекающих по типу гастроэнтеритов, диспепсий; у людей обуславливают пищевую токсикоинфекцию. Также они являются этиологическим фактором при инфекциях моче- и желчевыводящих путей, отитах, остеомиелитах.
Род Klebsiella, в настоящее время широко распространен в природе: почве, воде, растительных продуктах. Обнаруживают клебсиеллы также в молоке и мясе. Заболевания, обусловленные у людей возбудителями рода клебсиелл, подлежат особому учету и регистрации. Это могут быть болезни дыхательных путей, суставов, гнойно-септические процессы, маститы. Клебсиеллы могут вызывать острые желудочно-кишечные заболевания новорожденных детей и молодняка животных, связанные с пищевыми отравлениями.
Род Enterobacter в последние годы выделяют при острых желудочно-кишечных заболеваниях, инфекциях желчных и мочевых путей.
Род Hafnia обнаруживают у млекопитающих, включая человека, в различных продуктах животного происхождения (чаще молочных), в воде, сточных водах, на различных овощах. Выделяют у людей при гастроэнтеритах, связанных с употреблением молока; из различных мясных и молочных продуктов.
Название рода Serratia Серрации иначе называют «чудесными палочками» за то, что они npи некоторых условиях способны выделять ярко-красный пигмент продигиозин. Их обнаруживают в воде, почве, пищевых продуктах, а в последние 15-20 л с возрастающей частотой - в моче, в крови, фекалиях, абсцессах, при острых кишечных инфекциях людей и животных.
Род Ervinia обитают в основном на различных растениях. Однако их выделяют и от млекопитающих животных как условно патогенные микроорганизмы. Накапливаясь в различных пищевых продуктах некоторые штаммы эрвиний в ассоциации с другими микроорганизмами также могут вызывать пищевые токсикоинфекции.
Энтеробактерии родов Citrobaсter, Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Ervinia (а иногда также Serratia) по морфологическим и культурально-биохимическим свойствам близки к E.coli и сальмонеллам, растут на тех же средах, на практике иногда даже имитируют рост сальмонелл и кишечной палочки, вследствие чего становится необходимой дифференциация с помощью разлитых биохимических тестов и серологического типирования.
СХЕМА ИДЕНТИФИКАЦИИ E.COLI И SALMONELLA
Этапы иссле-дования
|
Патологический материал Фекалии, рвотные массы, слизь, кровь при бактериемии; если животное или человек погиб – отрезок кишечника, кусочки паренхиматозных органов (печень, почки, селезёнка), лимфоузлы, кровь из сердца. Пищевые продукты, вода, корма |
|||||
1 этап |
Мазок (мелкие короткие палочки, Гр-, Сп-, Капс.-подвижные, Располагаются одиночно, беспорядочно) |
Посев на:
Эндо Левина Плоскирева Висмут-сульфит-агар XLD-агар |
||||
2 |
Изучение культурально-биохимических свойств: |
|||||
Среда |
Колони E.coli |
Колонии Salmonella |
||||
Эндо Левина Плоскирева ВСА XLD-агар |
малиновые, блестящие чёрные или фиолетовые розовые нет роста или зелёные жёлтые |
светло-розовые сизые в тон среды серо-жёлтые чёрные, блестящие красные с чёрным центром |
||||
3 |
Дополнительное биохимическое тестирование |
|||||
Тест |
E.coli |
Salmonella |
||||
Выделение индола Выделение сероводорода Ферментация лактозы Свёртывание молока Рост на 3-х сахарном агаре
|
+ - + + Среда становится жёлтой , появляются разрывы |
- + - - Столбик среды жёлтый. «косяк» - красный, чёрные пятна. |
||||
4 |
Серологическая диагностика: постановка реакции агглютинации с многочисленными комплексными и моноспецифическими диагностическими сыворотками |
|||||
5 |
Биопроба: на белых мышах или цыплятах(летальная) |
|||||
ТЕМА 4
«МИКРОБИОЦЕНОЗЫ ТЕЛА ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ»
