Столбняк

Столбняк – типичная почвенная инфекция. Источником заболевания являются животные и человек, которые выделяют клостридий с испражнениями в почву. Споры обнаруживаются в почве 50 — 80 % исследованных проб почвы, в некоторых почвах (особенно унавоженных) — 100 %. В естественных условиях столбняком болеют лошади и мелкий рогатый скот. Многие животные являются носителями возбудителя столбняка.

Больше 50 % людей заболевает в результате ранений лопатой, гвоздем или стерней во время работы на огороде, поле. Инфекция также характерна, как сопутствующая, при огнестрельной ране в ходе вооруженных конфликтов.

Clostridium tetani при попадании в глубокую рану в анаэробных условиях не мигрирует в организме, но начинает размножаться и вырабатывает тетаноспазмин, обладающий нейротоксическими свойствами и тетанолизин, обладающий гемолитическими свойствами. Тетаноспазмин действует на периферическую нервную систему и вызывает cильнейшие тонические сокращения поперечнополосатой мускулатуры при ясном сознании. Тетанолизин вызывает лизис эритроцитов. В результате сильнейшей интоксикации и спазма дыхательной мускулатуры в большинстве случаев наступает смерть.

Профилактика столбняка: 1. Вакцинация (вакцина АКДС для людей). Есть вакцина для лошадей. 2. Соблюдение гигиены и санитарии при работе с почвой. (Для профилактики столбняка необходимо расширить края колотой раны и промыть ее раствором Н₂О₂ или КМnO₄.)

Газовая гангрена

Газовая гангрена (анаэробная гангрена, злокачественный отёк) — болезнь, которая обусловлена ростом и размножением клостридиальной микрофлоры в тканях организма. Рост этой микрофлоры возможен только при отсутствии кислорода (анаэробно), однако споры могут длительное время сохраняться на воздухе.

Раны, загрязненные землей, имеющие участки омертвевшей ткани, а также плохо кровоснабжаемые и не подвергшиеся первичной хирургической обработке (после травм, отморожений, некачественных кастраций животных, родов, при размозжении, сдавлениях, осколочно-взрывных травмах) ткани, предрасположены к газовой гангрене. Возбудитель быстро приобретает способность к заражению, выделяя газообразующие и растворяющие ткани экзотоксины, которые способствуют быстрому распространению инфекции. Возникают тахикардия, лихорадка. Кожные покровы серо-синего цвета, отёк. Рана резко болезненна, края её бледные, отечные, безжизненные, дно раны сухое. Окраска видимых в ране мышц напоминает варёное мясо. При надавливании на края раны из тканей выделяются пузырьки газа с неприятным сладковато-гнилостным запахом. При прощупывании определяется типичное похрустывание (крепитация). Состояние больного быстро ухудшается, наступает токсический шок, почечная недостаточность и гибель.

Основные возбудители газовой гангрены:

Clostridium perfringens (90 % случаев),

Clostridium septicum,

Clostridium histolyticum,

Clostridium novii,

Clostridium sordellium.

Clostridium perfringens (палочка «вздутия») — грамположительная, строго анаэробная спорообразующая палочковидная бактерия рода Clostridium. Возбудитель микробной порчи пищевых продуктов (в том числе вызывает бомбаж консервов) пищевых токсикоинфекций. человека, один из возбудителей газовой гангрены. Является санитарно-показательным организмом – индикатором фекального загрязнения.

Крупные палочковидные грамположительные клостридии. Споры овальные, расположены центрально либо субтерминально. Неподвижны, в организме человека образуют капсулу.

Хемоорганогетеротроф, облигатный анаэроб. Хорошо и быстро растёт на простых и специальных питательных средах в анаэробных условиях. На среде Китт-Тароцци — очень быстрый рост в течение 4-6 часов, помутнение с обильным газообразованием. На сахарно-кровяном агаре Цейслера образуются круглые гладкие сероватые колонии, постепенно зеленеющие и окружённые зоной гемолиза β-типа. С активным газообразованием сбраживают сахара. Для выявления Clostridium perfringens применяют специальные среды с сульитами (среду Вильсона-Блера, железо-сульфитную среду и т.д.) В этих средах данные микроорганизмы растут, выделяя сероводород, редуцируют сульфиты, образуя сульфиды. В результате в глубине питательных сред при росте Clostridium perfringens образуются характерные чёрные пятна и разрывы среды. Поэтому в санитарной микробиологии Clostridium perfringens называют сульфитредуцирующими клостридиями.

Диагноз на газовую ганрену ставят комплексно, с использованием бактериоскопии, метода чистых культур. Важна постановка серологической реакции нейтрализации токсина, с помощью которой токсин идентифицируют.

Получение накопительной культуры маслянокислых клостридий

Для получения накопительной культуры обычно используют такие свойства клостридий, как способность сбраживать углеводы, анаэробность и термоустойчивость спор. Вымытый и неочищенный картофель мелко нарезают и раскладывают в физиологические пробирки на 1/3 объема, добавляют мел (для нейтрализации масляной кислоты) и заливают водопроводной водой на 3/4 объема. Пробирки прогревают на водяной бане 15 минут при 80^о С, при этом уничтожаются вегетативные клетки и нетермостойкие споры многих микроорганизмов, а также удаляется воздух из среды. Затем пробирки закрывают пробками и культивируют при 35^о С. Через 3-5 дней ломтики картофеля всплывают, наблюдается обильное газообразование, в жидкости легко обнаруживаются бактериальные клетки с плектридиальным и клостри-

диальным типом спорообразования. На картофельной среде часто выделяется C. butyricum.

Для выделения других возбудителей маслянокислого брожения используют соответствующие питательные среды. Например, накопительные культуры пектиноразрушающих бактерий (C. pectinovorum, C. felsineum) получают методом Фрибеса. Снопики из льняной соломки (или стебля крапивы) вываривают в кипящей воде в пробирке в течение 5-10 минут, чтобы удалить экстрактивные вещества. Воду сливают, снопики заливают водопроводной водой высоким слоем, кипятят 15 минут, затем охлаждают до 25-35^о С. В снопик помещают несколько соломинок льна, не подвергшихся кипячению, и культивируют при 28-30^о С. Через 3-4 суток при наличии пектинразрушающих бактерий наблюдается помутнение среды и газообразование, при этом снопик всплывает на поверхность. Для приготовления микроскопического препарата из снопика извлекают кусочек стебля и делают соскоб с поверхности скальпелем на предметное стекло в каплю воды. Характерным свойством C. pectinovorum является накопление гранулезы, которая располагается прерывисто. У C. felsineum гранулеза заполняет всю клетку, за исключением конца клетки, где располагается спора.

Образование масляной кислоты в среде обнаруживают по реакции с хлорнокислым железом: 5 мл культуральной жидкости переносят в пробирку, добавляют 2 мл 10%-го раствора хлорнокислого железа и нагревают до кипения. Образующийся раствор маслянокислого железа имеет кроваво-красный цвет.